8-1 细菌的直接涂片计数法
● 直接涂片计数法是将一定数量的样品在载玻片上制成一定面积的涂片，然后在显微镜下直接计数，从而可以推算出定量样品内的含菌量。 ● 主要适用于鲜乳、稀奶油和发酵剂等的细菌计数。
☺ 操作简便，在短时间内即可得到结果。
声学处理☹ 不能区分活菌与死菌，计数结果偏高，只适用于菌数较高的样品。若样品菌数低时是差较大。
二、实验原理
● 镜台测微尺是一块中央有精确刻度的玻片,刻度的总长为1mm，等分为100小格，每小格长10μm，用于对目镜测微尺进行标定和测定视野半径。 三、实验材料
1. 检样
嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus）或德氏乳杆菌保加利亚亚种（Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus）发酵剂或市售酸牛奶。
2. 试剂与染剂 革兰氏染液、1％甲苯胺蓝染液、2％冰醋酸、9mL无菌生理盐水。
3. 器材
镜台测微尺、划有1cm2方格的载玻片、微量移液器、无菌微量移液器吸头、接种环、香柏油、二甲苯、1mL无菌吸管、无菌试管、显微镜等。 四、实验流程
五、实验方法
渗铝
1 测定视野半径 ： 向镜台测微尺刻度中心滴加香柏油，油镜观察，先使一端与左侧视野圆弧相切，再向右查格数乘以镜台测微尺每格长度0.01mm，即为油镜视野圆的直径，除以压缩机论坛2为半径。
2 制备样品稀释液： 1：10或1：100
3 涂片：用微量移液器取上述稀释菌液10µL（0.01mL长沙县黄兴中学）滴加于载玻片1cm2方格内，涂均，注意液体不可外流出方格，涂面要薄而均匀。自然干燥后，火焰固定。
4 染：革兰氏染或1％甲苯胺蓝染1min，水洗后用新能源汽车产业发展规划2％冰醋酸脱1～2s，牛奶基质无，乳酸菌或其他菌体蓝。
5 镜检与计数：油镜观察，计数任意10个视野中的菌数，求平均值，公式计算。
式中：r为显微镜油镜视野圆的半径（mm），B为稀释倍数，并将1cm2的涂抹面积换算为100mm2iec标准，0.01mL折算为每毫升的菌数，故最终还需乘以104。
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