骨磨片(ground section)甲苯胺蓝(toluidine blue)染试剂盒产品说明书
(中文版)
主要用途
骨磨片(ground section)甲苯胺蓝(toluidine blue)染试剂是一种旨在通过甲苯胺蓝染料的使用,观察分析由成骨细胞和破骨细胞产生的的各种骨组织形成状态的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。广泛应用于各种不脱钙骨组织、类骨质和软骨组织的染分析。产品即到即用,性能稳定,显清晰。 技术背景
甲苯胺蓝(toluidine blue)是一种异染性(metachromatic)染料,其分子式是C15H16ClN3S,分子量为305.83。常用于骨组织浅表染,观察成骨细胞和破骨细胞产生的的骨粘合线(cement line)、反折线(reversal line)、长线(dermacation line)、类骨质(osteoid)、钙质化新骨(mineralized)等骨组织变化,以评价各种骨整合(osseointegrat
ion)、新骨形成、材料再吸收(materials resorption)、骨组织重塑(remodeling)和骨组织计量测定(histomorphometrics)等。
产品内容
清理液(Reagent A) 毫升
净化液(Reagent B) 毫升
脱水液(Reagent C) 毫升
染液(Reagent D) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存 会员信息系统染液(Reagent B)在4℃三氯氢硅冰箱里,避免光照;其余的保存在室温下; 清理液(Reagent A)具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证6月
用户自备
(偏振光)光学显微镜:观察染后的组织细胞
实验步骤
实验开始前,准备好甲基丙烯酸甲酯(methylmethacrylate;MMA)包埋的不脱钙骨组织,进行机器或手动不脱钙骨磨片样品,10至50微米厚(通常为30微米),然后进行下列操作: 1. 小心加上xx微升 清理液(Reagent A),铺满整个样品表面 2. 室温下,孵育3分钟
3. 小心移去样品上的 清理液(Reagent A)
4. 室温下,小心将切片置入xx毫升 净化液(Reagent B)中浸泡30秒
5. 小心加上xx微升 脱水液(Reagent C),铺满整个样品表面
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6. dirac室温下,孵育15分钟
7. 小心移去样品上的 脱水液(Reagent C)
8. 等待切片晾干
9. 小心加上xx微升 染液(Reagent D),铺满整个样品表面
10. 室温下,孵育5至20分钟,避免光照
11. 小心移去切片上的 染液 (Reagent D徐立毅简历)
12. (选择步骤)小心加上xx微升 脱水液(Reagent C),铺满整个样品表面
13. (选择步骤)小心移去样品上的 脱水液(Reagent C)
14. 室温下,小心将样品置入xx毫升 净化液(Reagent B)中浸泡1分种
15. 小心移去样品上的 净化液(Reagent B)
16. 封片
17. 即刻在光学或偏振光显微镜下观察:
注意事项
1. 本产品为50次操作
2. 操作时须戴手套
3. 染过程,避免光照
4. 清理液(Reagent A)具有腐蚀性,注意操作安全
荷花淀赏析5. 如果使用包埋后硬组织切片机切片的样品,建议使用无离子水稀释 染液 (Reagent D)10倍后染
6. 可以进行骨小梁参数计量,借助VIDAS图象分析系统进行测量,参数包括骨小梁的体积、骨小梁的宽度、骨小梁的间隙等
7. 脱水液(Reagent C)具有脱作用,如果染过深,可以使用 脱水液(Reagent C)快速处理,避免脱过度
8. 骨组织包埋切片或磨片,以及厚度差异,对于染的孵育时间会有不同
9. 建议使用非水相封片
10. 参考图像如下:黑实体箭头为浅蓝类骨质;白空箭头为成骨细胞产生新生骨组织
11. 本公司提供系列骨组织染试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定着清晰