第48卷第2期渔业现代化Vol.48No.2 2021年4月FISHERY MODERNIZATION Apr.2021 DOI：10.3969/j.issn.1007-9580.2021.02.014
丁香油、MS-222和异丙酚对大黄鱼的麻醉效果分析 杨乐，张晓林，刘贤德
（集美大学水产学院，农业农村部东海海水健康养殖重点实验室，福建厦门361021）
摘要：研究了丁香油、间氨基苯甲酸乙酯甲磺酸盐（MS-222）和异丙酚对养殖大黄鱼（Larimichthys crocea）的麻醉效果，以期为下一步活体运输麻醉剂的选择提供参考。首先在（20±0.5）t水温下，对3种麻醉剂的适宜质量浓度进行了探索，初步得出适宜的质量浓度分别为：丁香油10mg/L、MS-22240mg/L、异丙酚0.2mg/ L。在此质量浓度下，进一步优化了大黄鱼的适宜麻醉水温。结果显示：丁香油在20t.MS-222在15t、异丙酚在25t水温下的麻醉效果较好。根据优化的质量浓度和水温，分别对3种麻醉剂麻醉后的大黄鱼进行模拟运输，发现随着模拟运输时间的延长,3种麻醉剂麻醉后的大黄鱼复苏率均逐渐降低，模拟运输24h后丁香油和MS-222麻醉的复苏率可达90%，而异丙酚麻醉的复苏率为70%，说明丁香油和MS-222的麻醉效果较好。对丁香油和MS-222经济成本分析表明，丁香油的成本相对较低，更适合作为大黄鱼活体运输的麻醉剂。 关键词：大黄鱼；活鱼运输；麻醉剂；丁香油；MS-222；异丙酚
中图分类号:S983文献标志码:A文章编号：1007-9580（2021）02-0091-06
人'黄鱼（Larimichthys crocea）属于鲈形目、石首鱼科、黄鱼属，因肉质细嫩、味道鲜美，且蛋白质含量较高、脂肪含量较低，受到广大消费者的青睐，是中国重要的经济鱼类之一［1-2］。大黄鱼对于人工操作、噪音、运输等会表现出极其明显的应激反应，长途活体运输常导致较高的死亡率，现已成为大黄鱼活体物流的技术瓶颈［3］o麻醉剂在国内外已被广泛地用于催产、标志及运输等渔业生产和研究之中。常见的渔用麻醉剂有间氨基苯甲酸乙酯甲磺酸盐（MS-222）、丁香油、二氧化碳、2-苯氧乙醇和乙醚等，其中最常用的是MS-222和丁香油，异丙酚是近年来发展起来的一种麻醉剂［4-8］。多项研究证明，麻醉剂在降低鱼类对捕捞、人工操作及运输等应激反应方面发挥较好的作用［9］o
研究了丁香油、MS-222、异丙酚在不同质量浓度和水温下对大黄鱼的麻醉效果，并将适宜剂量的3种麻醉剂用于模拟运输，以评估对运输应激的缓解作用，同时对3种麻醉剂的麻醉效果和成本进行了比较分析，旨在为后期开展大黄鱼的长途活体运输提供参考。
1材料与方法
1.1材料
试验用鱼选自福建省宁德市蕉城区三都澳海区，规格均一、体表无伤、生长状况良好的大黄鱼成鱼，
体质量（250.52±15.30）g，体长（22.36±2.02cm），从养殖海区运至集美大学水产学院试验场暂养2周，连续充气，每天早晚各投喂一次商业配合饲料，并进行排污换水处理，其间除亡或存活状况不好的鱼，一周后开始试验。
试验用3种麻醉剂：丁香油（华硕香料油有限公司），密度1.05g/mL，纯度（以丁香酚计）为99%，橘黄的油状液体，有浓重香味，不易溶于水，使用时先按照丁香油：乙醇=1：9的体积比配置成母液后再溶于水；MS-222鱼用剂（上海渔夫宝水产用品有限公司），淡黄液体，可直接溶于水，纯度在99.5%以上；异丙酚（上海麦克林生化科技有限公司），密度0.962g/mL，纯度为98%，乳白脂溶性制剂，微溶于水。
收稿日期：2020-07-22
基金项目：福建省自然科学基金（2019J01694）
作者简介：杨乐（1997-），男，硕士研究生，研究方向：水产动物遗传育种。E-mail：1356543490@qq 通信作者：刘贤德（1974—），男，教授，博士，研究方向：水产动物遗传育种。E-mail：*************
92渔业现代化2021年
1.2麻醉试验
土婆婆pk洋媳妇试验前先将试验鱼停食2d，再将鱼从养殖池转入装有麻醉剂的容器中，观察鱼的活动状态。待鱼进入麻醉状态后将其转入干净的海水中进行复苏，并用秒表记录麻醉和复苏过程中鱼的各种行为特征出现的时间。不同质量浓度麻醉剂对大黄鱼的麻醉试验中，设置丁香油质量浓度为5、10、20、40、80mg/L；MS-222质量浓度为30、40、50、60、70mg/L；异丙酚质量浓度为0.1,0.2、0.4,0.6,0.8mg/L。依据不同质量浓度麻醉剂对大黄鱼的麻醉效果，选择适宜的质量浓度对大黄鱼进行不同水温条件下的试验，设置水温为10弋,15弋,20弋,25T、30T。
1.3模拟运输试验
依据麻醉试验结果，设置质量浓度为10mg/L的丁香油、40mg/L的MS-222和0.2 mg/L的异丙酚对试验大黄鱼进行麻醉，待大黄鱼进入麻醉状态后将其放入装有4倍鱼体重量水（鱼水质量比为4：1），充氧的密封塑料袋内，设置5个时间段（12h,24h,36h,48h,72h）进行模拟运输试验。每种麻醉剂试验5袋，每袋2尾鱼，将装有大黄鱼的密封塑料袋放入温度为20^,15弋,25弋的恒温箱内，每隔6h对密封塑料袋进行换气充氧。模拟运输12h、24h、36h、48h、72h 后将鱼从塑料袋中取出放入干净的海水中进行复苏，观察试验鱼的生存状态并计算复苏率。
金泰勋1.4数据分析
从把鱼放入装有麻醉剂的水体中开始，到鱼出现各种麻醉行为阶段的时间来反映麻醉效果，再将其放入干净的海水中为开始，记录鱼出现复苏行为阶段的时间来评估复苏效果。复苏率为麻醉剂作用一段时间后，从复苏到完全复苏的鱼尾数占试验鱼总尾数的百分比。
采用Excel2013进行数据统计分析，并用Origin9.0软件绘制相关图表。数据结果以平均值土标准误差（Mean土SE）表示,P<0.05表示有显著性差异,P>0.05表示无显著性差异。
2结果
2.1大黄鱼麻醉阶段和复苏阶段的行为状况
在3种麻醉剂作用下，大黄鱼在麻醉和复苏阶段表现出一系列明显不同的行为状态（表1），据此可区分不同的麻醉或复苏阶段。其中，麻醉以进入A3阶段为宜，复苏以进入R4阶段为宜。
将大黄鱼放入装有麻醉剂的容器后，起初有明显撞壁应激行为，一段时间后鱼体对外界刺激的反应能力降低，撞壁行为变得不明显，鳃盖张合频率降低，但鱼体仍然可以水平游动（A1阶段）；接着鱼体失去平衡，时而侧翻游动（A2阶段）；进而停止游动，侧躺于容器底部，不再进行连续性游动（A3阶段），此时认为鱼体已进入麻醉状态。如果质量浓度过高，麻醉鱼会停止呼吸（A4阶段），这种状态被认为是深度麻醉状态。经过一定时间后，将处于A3阶段的鱼放入海水中进行复苏，一段时间后恢复呼吸（Rl阶段），随后鱼体行为逐渐恢复正常，直至完全正常（R4阶段）。
注：0表示鱼体刚放人装有麻醉剂的容器；A1~A4表示鱼体麻醉阶段的行为状态;R1~R4表示鱼体复苏阶段的行为状态表1麻醉及复苏各阶段鱼的行为状况
Tab.1Behavioral status of the fish during anesthesia and recovery 麻醉阶段行为特征
对外界刺激反应明显，鲍盖张合频率及肌
肉收缩正常
A1
对外界刺激反应能力降低，鲍盖张合频率
降低，身体平衡性较好
A2
除强刺激外对外界反应能力弱，鲍盖有规
律地缓慢张合，鱼体失去平衡
A3
完全失去反应能力，鲍盖张合微弱没有规
律，鱼体不再持续游动
A4鳃盖张合停止
复苏阶段行为特征
R1开始恢复鲍盖张合
R2鱼体开始游动，身体平衡性没有恢复
R3身体平衡完全恢复，对外界反应恢复
R4行为完全恢复正常
2.2不同麻醉质量浓度的麻醉效果
图1所示，在3种不同质量浓度的麻醉剂下，大黄鱼进入麻醉的时间各不相同，但三者的变化趋势是一致的。即麻醉剂的质量浓度越高，大黄鱼进入麻醉状态的时间越短，完全复苏所需时间越长。丁香油在5~10mg/L范围内大黄鱼进入麻醉的时间降幅最大，在10倍以上；在10~80mg/L范围内时间降幅相
比较小。MS-222在30~40mg/L范围内大黄鱼进入麻醉的时间降幅最大；在40~50mg/ L范围内大黄鱼进入麻醉的时间几乎没有变化；在50~70mg/L范围内进入麻醉的时间降幅相对较
第2期杨乐等：丁香油、MS-222和异丙酚对大黄鱼的麻醉效果分析93
公牛通讯小。异丙酚在0.1~0.8mg/L范围内大黄鱼进入麻醉时间降幅差别不大。
2.3不同水温下的麻醉效果
设置丁香油10mg/L、MS-22240mg/L、异丙酚0.2mg/L，探讨不同水温条件下对大黄鱼休眠诱导所需时间的影响，试验结果如图2所示。在10~30七的温度范围内，随着水温的改变，鱼体进入麻醉时间均呈先增后减趋势。在丁香油中，水温为20T时，鱼体进入麻醉时间最长；在MS-222中，水温为15T时，鱼体进入麻醉时间最长；对于异丙酚，在水温为25T时，大黄鱼进入麻醉的时间最长。
质量浓度/(mg/L)质量浓度/(mg/L)质量浓度/(mg/L)
图13种麻醉剂不同质量浓度下鱼体进入麻醉状态(A3阶段)及完全复苏(R4阶段)的时间Fig.1Time for the fish to enter the anesthesia state(A3)and complete recovery(R4)at
different concentrations of the three anesthetics
120
100
80奩60
40
20
丁香油(10mg/L)
□A3(S)・R4(S)
400
350
MS-222(50mg/L)
□A3(S)・R4(S)
Hil已ill
101520
温度/°C
253010152025
温度/°C蕲州在线
异丙酚(0.2mg/L)
30
00
图2水温对3种麻醉剂麻醉效果的影响
Fig.21nfluence of water temperature on anesthetic effect of three anesthetics
2.4模拟运输试验的复苏率
按照麻醉试验得到适宜麻醉质量浓度和水温
对大黄鱼进行模拟运输，不同运输时间下的复苏
率如图3所示。由图3可知，随着运输时间的延
长，大黄鱼复苏率会逐渐降低。当模拟运输时间
为24h时，丁香油和MS-222麻醉的复苏率为
90%，而异丙酚麻醉的复苏率为70%。
3讨论
3.1丁香油、MS-222、异丙酚麻醉大黄鱼的适宜
大明宫词导演质量浓度选择
Marking等［l0］认为，理想的麻醉剂质量浓度需同时满足被试动物3min之内进入麻醉状态, 5min之内苏醒的要求。
图3运输时间对大黄鱼复苏率的影响Fig.3Effect of transportation time on the recovery rate of Larimichthys
crocea
94渔业现代化2021年
丁香油价格低廉，安全性高［ll］o试验中，丁香油质量浓度为5mg/L时，大黄鱼长时间不能进入麻醉状态，可能是由于丁香油质量浓度过低所导致的；在10~40mg/L的质量浓度范围内，大黄鱼进入麻醉时间相差不大且复苏时间较短。由于高质量浓度的麻醉剂会对鱼体造成伤害，选择10mg/L的丁香油为本试验的适宜质量浓度，试验结果与赵艳丽等［12］对大黄鱼的麻醉效果结果一致［13］。
MS-222易溶于水，复苏时间短［l4］o对鲫鱼、金鱼、罗非鱼的研究中表明，在运输过程中使用MS-222既能提高活体的存活率，又能延长运输时间，这与本试验结果一致［15-17］。但其具有酸性，会对鱼体的品质造成一定的影响［18］。试验中，MS-222质量浓度为30mg/L时，鱼体不能进入完全麻醉状态。在40~50mg/L的质量浓度范围内,MS-222对大黄鱼的麻醉效果相似。但50mg/L的MS-222，对鱼体的麻醉时间超过了3min，不符合理想麻醉质量浓度的要求。因此, 40mg/L的MS-222为本试验的适宜质量浓度。
异丙酚具有低浓度，高效率的特点［l9］o试验中，异丙酚的质量浓度为0.1mg/L时，大黄鱼可在3min内进入麻醉状态，但其剂量不易掌握。且麻醉试验初期，大黄鱼的应激水平明显强于丁香油和MS-222o在0.1〜0.8mg/L的质量浓度范围内，麻醉时间随着麻醉剂质量浓度的升高而缩短，与Balko等［20］研究结果相同。质量浓度在0.2〜0.6mg/L内，异丙酚对大黄鱼的麻醉效果无明显差异，所以0.2mg/L的异丙酚为本试验大黄鱼的适宜质量浓度。
3.2水温对麻醉效果的影响
水温是影响麻醉效果的重要因子。通过研究青鳉、虹鱒、斑点叉尾鮰表明，在有效质量浓度范围内，随着水温的升高，鱼类进入完全麻醉状态所需时间会缩短［21-23］。这主要是因为鱼鳃是麻醉剂进入鱼体的主要途径，温度升高时增加了其呼吸频率，使得单位时间内麻醉剂通过鱼鳃的剂量增加，从而减少了鱼体进入麻醉的时间［24］o然而，本试验结果显示,3种麻醉剂随着水温的升高，进入麻醉时间先增加后减小。在15~25t 时,3种麻醉剂使大黄鱼进入麻醉状态需最长的时间，推测原因可能是15~25t处于大黄鱼的最适生长温度范围，在此温度范围内，大黄鱼具有较强抗逆性，能够抵抗外部环境的变化，因而进入麻醉状态所需时间最长，但具体的机理还需要进一步研究。也有研究表明，水温较高时麻醉剂的效果降低，即在较高温度下，鱼麻醉运输后的复苏率和存活率大大降低［25］o目前，关于水温对鱼类麻醉效果的研究结果存在较大争议，这可能与鱼的种类、长度和体重、性别、状态、压力等等有着密切的关系［26］。
3.3丁香油、MS-222、异丙酚模拟运输的复苏
率及成本比较
在运输过程中大黄鱼应激性强，具有较高的死亡率，但通过合理使用麻醉剂可降低其死亡率［27］o试验结果显示，运输时间为12h时，丁香油、MS-222、异丙酚的复苏率都在80%以上。延长运输时间
至24h，丁香油和MS-222的复苏率为90%，而异丙酚的复苏率仅为70%，已不具备实际运输的意义。说明丁香油和MS-222的麻醉效果好，在对大黄鱼进行短距离运输时，可优先考虑。根据市面上出售的2种麻醉剂的价格可得，丁香油单价0.33元/mL,MS-222单价0.23元/mL，两者售价相差不大。但是，由于丁香油的不溶性，在使用过程中需要加无水乙醇按1：9(丁香油：无水乙醇)的体积比配置成母液后使用，这相当于增加了丁香油的体积，减少了用量，间接地减少了经济成本。综合考虑可得，相对于其他2种麻醉剂，丁香油更适合作为大黄鱼活体运输的麻醉剂。
4结论
比较了丁香油、MS-222和异丙酚3种麻醉剂对大黄鱼的麻醉效果。结果显示，当丁香油、MS-222和异丙酚的质量浓度分别为10mg/L、40mg/L、0.2mg/L时，大黄鱼的适宜麻醉水温分别为20t、15t、25t，其中，丁香油的麻醉效果较好，经济成本更低。建议在大黄鱼的活体运输中，可优先考虑丁香油。
□
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