UCSC 操作步骤

启动子区含有丰富的转录因子结合位点(transcription factor binding sites,TFBS),启动子序列基本上是由这些短序列组合而成,主要在TSS上游1kb的范围内。在TSS附近-60bp到+40bp是核心启动子 区,它对于精确转录是必须的最小单元。对于一个已知基因的启动子可以在NCBI上查到其转录起始位点,并通过网上软件初步分析该基因启动子的大致序列及一 些顺式调控元件(分析时应把包括整个基因包括在内).
常见的在线预测工具有:pubmed数据库
软件神经网络启动子预测器 (NNPP,/seq_tools/promoter.html),
Promoter scan (bimas.v/molbio/proscan/), 
Dragon Promoter Finder (research.i2r.a-star.edu.sg/promoter),昆虫组合 
Promoter2.0 Prediction Server (www.cbs.dtu.dk/services/promoter/) 
Soft Berry (www.softberry), 
网上还提供了一些常见基因的数据库:
真核启动子数据库第85版(The Eukaryotic Promoter Database Current Release 85 ,EPD,www.epd.isb-sib.ch/)
转录起始位点数据库:dbtss.hgc.jp/该数据库主要包括人,小鼠等常见生物的基因转录起始位点及该基因启动子的可能情况。
通过初步分析后,还应通过实验的方法加以确认.包括PCR步查法(对于一些短的启动子来说).如果预测目的启动子为长启动子,PCR步查较难时,也可采用 筛选基因组文库的方法,筛选阳性克隆子并送长的克隆去测序。对一些关键的顺式调空元件可以通过凝胶阻滞试验(蛋白基因作用)来加以确认。
查询启动子的更多方法:
1.国家专利数据库UCSC
(1)网址:genome.ucsc.edu/cgi-bin/hgNear
在Genome里选择物种,比如human,search里输入你的基因名PTEN,点击Go
(2)出现新的页面,看到“Known Gene Names”下面的PTEN了吧,点它
(3)又回到了和(1)类似的页面,此时,点击sequence
(4)出现一个新的页面,选中promoter,同时可以输入数值修改具体的序列区域,比如Promoter including 2000 bases upstream and 100 downstream,即表示启动子-2000~+100区域
mncc(5)点击“get sequence”,出现页面中最上面的序列“>uc001kfb.1 (promoter 2000 100) PTEN - phosphatase and tensin homolog”就是你要的人PTEN启动子-2000~+100区域的序列了 
2、Ensembl
水产品包装设计(1)网址:/index.html
在“Search Ensembl“标题下search后的下拉框中选中物种名homo sapiens(人),for框中输入基因名PTEN,点击Go
(2)出现的新页面中比较乱,但不要管它,直接寻“Ensembl protein coding gene ”字样的,对,也就是第二个,点击它
(3)新出现的页面也很乱,不过依然不用管它,看到左侧有点肉(实在不知道怎么描述了)的那些选项了吗,对,就是“Your Ensembl”下面那一堆,在里面“Genomic sequence”,点它
(4)现在的界面就一目了然了,在“5' Flanking sequence”中输入数值确定启动子长度(默认为600),比如1000,点击update;进销存管理系统论文
(5)出现的序列中,标为红的就是基因的外显子,红之间黑的序列就是内含子,而第一个红自然就是第一外显子了,那么从开始的碱基一直到第一个红的碱基间自然就是启动子-1000~+1的序列啦
这样,你不仅查到了启动子,连它的外显子、内含子序列也全部搞定了 
3、SIB-EPD
(1)网址:www.epd.isb-sib.ch/
(2)具体使用方法大同小异,就是输入物种名、基因名,限定启动子序列区域
不过有了前两个,我想已经足够用了,个人感觉SIB-EPD的库容量太小,很多基因查不到 

本文发布于:2024-09-23 17:10:24,感谢您对本站的认可!

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