孔明棋
摘要】目的 评价沉降式液基细胞学检查技术在宫颈病变筛查中的应用价值。 方法 回顾性分析2008年8月-2011年8月间5086例宫颈细胞学标本，采用自然沉降式宫颈液基细胞学检查技术和TBS报告系统诊断，对细胞学诊断阳性的标本进行阴道镜检查和组织病理学检查，所有病例的诊断均双盲进行。 结果 5086例宫颈细胞学筛查出鳞状细胞癌（SCC）7例，高级别鳞状上皮内病变（HSIL）24例，低级别鳞状上皮内病变（LSIL）42例，不除外高度鳞状上皮内病变的不典型鳞状上皮细胞（ASC-H）15例，意义不明的鳞状上皮细胞（ASC-US）198例，非典型腺细胞（AGC）3例，腺癌（ACC）2例，与活检病理诊断符合例数分别为：SCC100.00%(7/7)，HSIL91.67%(22/24)和LSIL90.48%(38/42) ，ACC2例100.00%(2/2)。 结论 沉降式宫颈液基薄层细胞制片技术对宫颈病变检出阳性率高，高度病变与组织活检符合率高。【关键词】沉降式液基薄层细胞学 宫颈病变 诊断【中图分类号】R730.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）17-0096-02 子宫颈癌是女性的常见恶性肿瘤之一，据统计全世界每年约有50万左右的新发病例，严松江大学城论坛
重威胁妇女健康[1]。从宫颈癌前病变发展为宫颈癌是一个漫长的过程，大约需要10年时间。因此，宫颈癌可以通过早期发现、早期来提高治愈率。目前用于宫颈病变筛查的细胞学检查已由传统的巴氏涂片细胞学发展到液基薄层细胞学检查（Liquid-based thinlayer cytology test，LCT），液基薄层细胞学检查制片技术主要分为膜式、沉降式两种制片方法。文献报道的多为膜式制片，关于沉降式制片报道很少。本文总结本院5086例宫颈细胞应用沉降式液基薄层细胞学技术检查结果分析，探讨该技术在宫颈病变筛查中的应用价值。
1 材料与方法
1.1 材料 收集2008年8月至2011年8月本院5086例门诊及住院病人和健康查体者的宫颈细胞学标本。患者年龄21-84岁。门诊及住院病人临床表现多为白带增多，接触性出血，不明原因的阴道出血、宫颈病变后复查。
1.2 方法
1.2.1 标本的采集与处理 妇科医生用窥器暴露宫颈，用棉球轻轻擦去宫颈表面的粘液及血液，将专用宫颈采样刷置于宫颈口，宫颈刷前方尖部刷毛插入宫颈管，后方刷毛暴露在子宫颈外口，将刷子朝一个方向缓慢旋转2-3圈，然后将采样刷头放入细胞保存液内，拧
紧瓶盖，用力震荡，使细胞充分脱落并固定。核对病人姓名、编号，填写完整的检查申请单送细胞室。
1.2.2 制片方法：用涡旋器震荡样品，然后将样品移入盛有梯度密度液的试管中，两次离心后（第一次离心的意义：200转，2分钟，使有诊断意义的细胞与粘液、血液、炎性细胞分离；第二次离心的意义：800转，10分钟，集中有诊断意义的细胞）在离心管底部形成细胞小球，加入缓冲液混匀并转移到沉降管中，细胞由于自然重力作用而沉降，粘附至涂有粘附剂的载玻片上，形成一个直径1.3cm的细胞薄层，然后进行巴氏染，中性树胶封片，细胞学诊断医师阅片。
1.2.3 细胞学诊断标准 采用2001TBS（the Bethesda system）系统。样本质量评判分为：单个或成团的形态完整且保存完好的子宫颈管腺上皮细胞或鳞状化生细胞；任何存在异常细胞的样本均属合格样本。不满意样本：血液或炎细胞覆盖过多，超过75%的鳞状上皮细胞被遮盖；鳞状上皮细胞数量过少，少于5000个鳞状上皮细胞。诊断结果分为：正常范围（within normal limits，WNL），鳞状上皮细胞的异常分为：非典型鳞状细胞（atypical squamous cells，ASC），低度鳞状上皮内病变（low grade squamous intraepithelial lesion，LSIL），高度鳞状上皮内病变（high grade squamous intraepithelia
l lesion，HSIL）以及鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）；腺上皮细胞异常分为：非典型腺细胞（atypical glandular cells，AGC），子宫颈管原位腺癌（adenocarcinoma in situ，AIS），腺癌（adenocarcinoma，ACC）。
1.2.4 阴道镜检查及活检 凡经细胞学检查提示细胞异常者均进行阴道镜检查，选择碘染异常处多点活检。若未发现明显可疑病变部位，常规在移行带3，6，9，12点位置取活检。
跨国采购网挂机平台 1.2.5 分析方法 以阴道镜活检组织学诊断的结果为准，与细胞学检查结果进行对照。
2 结果
2.1 沉降式液基细胞标本质量评价：完全满意的标本5015例，占98.60%，不满意标本71例，占1.40%。
2.2 上皮细胞的异常 5086例中宫颈细胞学阳性病例291例，占5.72%，包括SCC病例7例，占0.14%； HSIL病例24例，占0.47%，LSIL病例42例，占0.83%，不除外高度鳞状上皮内病变的不典型鳞状上皮细胞（ASC-H）15例占0.29%，意义不明的鳞状上皮细胞（ASC-US）198例占3.89%，非典型腺细胞（AGC）3例占0.06%，腺癌（ACC）2例占0.04%。
2.3 液基细胞学与组织病理对照情况，部分病人未获得组织学检查资料，对照情况见表1。
表1 液基细胞学与组织病理诊断对照
3 讨论
合格的标本是提高细胞学敏感性和准确性的前提，传统的巴士涂片在制片的过程中约有80%的采集细胞滞留在采样器上而被丢弃，是造成漏诊的主要原因。加上涂片中有较多的粘液、血液、炎症细胞、杂质等。因此，传统的巴氏涂片标本不合格率约为13%-25%。[2] 1999年TCT（Thinprep cytologic test）首次在我国应用，它改变了常规涂片的操作方法，标本取出后立即洗入细胞保存液中，这样几乎保留了取材器上所得到的全部标本，也避免了巴氏涂片细胞过度干燥造成的假象。液基细胞学的优势表现在容易收集、储存、运输及转移，杜绝了空气干燥及人工假象，通过液基制片去除了部分无诊断意义的炎细胞和红细胞，背景更干净，细胞薄层一致，结构清晰，可最大限度地提高阅片效率。潘秦镜等[3]报告，TCT能检出100%的SCC，93.2%的HSIL，72.4%的LSIL，显示了高度的敏感性和特异性，而假阴性率仅为2.3%，大大低于传统巴氏法的15%-40%。本组研究显示，沉华东
降式液基细胞学标本的满意率为98.60%，明显高于传统涂片。
沉降式技术对标本的前期处理就是利用密度梯度离心的方法，使杂质成分与有效诊断上皮细胞成分分层，从而达到去除杂质的目的，沉降式技术利用自然沉降的原理，更加有效的捕获病变细胞，并达到薄层制片的效果，某些腺细胞及肿瘤细胞由于自然沉降，保持特有的三维立体结构。膜式制片技术是通过负压过滤膜采集细胞，然后依靠过滤器内微弱的正压和玻片与细胞间正负电荷的作用，把滤膜上的细胞转移到玻片上，膜式制片，如果前期处理不认真，标本内富含大量的粘液、血液，薄片将表现为片内有空区，聚集圆圈边缘，甚至出现白片的情况。比较而言，沉降式制片，由于标本前期处理采取了标准化的梯度离心技术，操作人员可以控制细胞的分散度和密度，几乎没有白片出现，这方面要优于膜式制片。沉降式制片细胞的密度及均匀度取决于单位体积内有效细胞的数量、载玻片的清洁度、载玻片表面与与粘附剂形成的共价键及负压吸引器的值，粘附剂的质量也是重要因素之一。
本组5086例宫颈细胞学检查出阳性病例291例占5.72%，细胞学与组织学符合率为69.97%，除ASC-US符合率为51.45%外，其余均>90%.张建新，张长淮等报告[4]15393例沉降式液基细胞学检查，细胞学与组织学符合率SCC为100%（7/7），HSIL为93.6%（10
3/110），LSIL为82.0%（443/540）。本组病例在ASC-US的判读中，假阳性率偏高。作者总结认为严格掌握TBS关于ASC-US诊断标准至关重要。应重点观察细胞核的形态异常，细胞为鳞状分化，细胞核增大，面积为正常中间层鳞状细胞核的2.5-3.0倍，核质比轻度增高，核染质轻度加深，但均匀分布。核的异型在质量和数量上都不足以达到LSIL.诊断。ASC-US需要与以下细胞鉴别：鳞状化生细胞、角化不全的鳞状上皮细胞、炎性改变引起的细胞改变、萎缩性改变、人为假象（取材固定、制片等环节）、变性的宫内膜细胞及组织细胞，避免将上述细胞误认为异型细胞，造成过诊断。对于细胞学阳性而组织学切片阴性的病例要考虑以下几种可能性：（1）细胞学的过度诊断，（2）活检未能取到病变部位，（3）组织处理或制片不当，（4）组织学的诊断不足或误诊。
通过5086例宫颈细胞沉降式液基细胞学检查分析，作者认为该技术可明显提高制片质量，高度病变与组织学检查结果符合率高，应用液基细胞学制片技术并严格掌握TBS诊断标准，可确保宫颈细胞学检查的准确性。
参考文献
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蒋克铸
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[2]张威，梅平，刘艳辉，等.液基细胞学与传统巴氏涂片对普查人宫颈病变的比较[J]. 广东医学,2005; 26(5):640-641.
[3]潘秦镜，李凌，乔友林，等. 液基细胞学在宫颈癌高发区筛查的研究[J]. 中华肿瘤杂志, 2001; 23: 309-312.
[4]张建新，张长淮，周艳秋等. 15393例宫颈液基细胞学与组织病理学的对照分析. [J] 中华病理学杂志, 2007; 36(7): 485-488.
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