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大胆猜想与小心求证ＴＶＳＳｓｏｄｉｕｍｄｏｄｅｅｙｌｓｕｌｆａｔｅ
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肺炎军团菌反应调节子ＬｅｔＡ对ｄｏｒＡ，朋坍基因调节 作用的研究
中文摘要
t612
肺炎军团菌（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）是革兰染阴性的兼性细胞内寄生菌，能在人源单核细胞和阿米巴原虫内寄生。肺炎军团菌内两组基因，ｄｏｔ／ｉｃｍ，被发现编码四型蛋白分泌系统（ＴｙｐｅＩＶｓｅｃｒｅｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ）并与肺炎军团菌在真核细胞内的增殖过程有关。近来，ＤｏｔＡ和ＲａｌＦ蛋白被证实为Ｄｏｔ／Ｉｅｍ分泌系统的底物，ＤｏｒＡ蛋白同时也是该分泌系统的重要成分，是定位于肺炎军团菌内膜部分的跨膜蛋白。肺炎军团菌反应性调节子ＬｅｔＡ诱导处于平台期的肺炎军团菌的表型转换，诱导其诸如动力、感染性、细胞内增殖能力、细胞毒性等表型的表达。ＬｅｔＡ０突变株被证实不能有效感染真核细胞宿主。我们运用了萤火虫荧光素酶报告基因融合（１ｕｅｉｆｅｒａｓｅｒｅｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅｆｕｓｉｏｎｓ）技术显示了，Ｌｅ慷对参与肺炎军团菌细胞内生长过程的如叫和ｒａｌＦ基因有调节作用，通过ＲＮＡ狭线杂交分析或Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析，萤火虫荧光素酶报告基因检测所得到的结果获得了验证。虽然通过这些方法确证了，在ｌｅｔＡＨ突变株内，而叫和ｒａｗ基因的转录是明显减少的，而通过Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ进行ＤｏｔＡ蛋白分析时，却发现ＤｏｔＡ蛋白在／ｅｔａ付突变株内的含量是明显高于在野生株内的，而在／ｅｔＡ一突变株膜内的整合则是明显减少的。这些数据表示，ＬｅｔＡ除了在转录水平调节面聃和ｒａｌＦ基因的表达以外，对ＤｏＶｌｅｍ四型分泌系统的功能至少是有部分影响的，ＬｅｔＡ的缺失导致了Ｄｏｒａ蛋白的细胞内积聚，抑制了ＤｏｔＡ蛋白在细胞膜内的整合，这也可能是影响／ｅｔＡＨ突变株在真核细胞内增殖能力的原因之一。 关键词：肺炎军团菌；四型分泌系统；ＤｏｔＡ；ＲａＷ；ＬｅｔＡ；细胞内生长
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华中科技大学同济医学院硕士研究毕毕、『ｐ论立ｔｈｅｉｎｎｅｒｍｅｍｂｒａｎｅ．ｗｈｉｃｈｃａｎａｌｓｏｂｅｔｈｅｒｅａｓｏｎｏｆｉｎｉｌｉｂｉｔｉｏｎｏｆｉｔｓｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｇｒｏｗｔｈｗｉｔｈｉｎｅｕｋａｒｙｏｔｅｈｏｓｔｃｅｌｌｓ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｌｅｇｉｏｎｅｌｔａｐｎｅｕｍｏｐｈｉｔａ；ｔｙｐｅＩＶｓｅｃｒｅｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ；ＤｏｔＡ；ＲａｌＦ；ＬｅｔＡ；ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｇｒｏｗｔｈ．
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