分光光度法测定地表水中叶绿素a影响因素的探讨作者：刘畅来源：《农业与技术》2014年第04期 宇宙星神玩具摘 要：采用分光光度法对水中叶绿素a的含量进行测定，分析了影响其准确测定的因素，探讨了滤膜数量、提取过程及光照条件对测定结果的影响。结果表明：增加滤膜数量需增加离心次数；提取过程需保证沉淀无素；上清液需多次离心时应转移至干燥离心管中；提取后的样品应置于暗处，并在24h内分析完毕。 关键词：叶绿素a；分光光度法；研磨法；影响因素
中图分类号：S-3 文献标识码：A
乡愁赏析 叶绿素a应用生态学报是估算浮游植物生物量的重要指标[1]，在环境监测中，叶绿素a含量是评价湖泊富营养化的重要参数。我国目前尚无国家标准分析方法，在环境监测中，地表水中叶绿素a监测的主要依据是《水和废水监测分析方法》（第四版）[2]中的分光光度法，该方法采用丙酮作为溶剂，通过研磨、萃取和离心的方法提取叶绿素a。本文结合实际监测工作，对本方法各环节的影响因素进行探讨。
1 实验部分
1.1 主要仪器
紫外-可见分光光度计、离心机、抽滤装置、研钵、0.45µm乙酸纤维滤膜。 1.2 主要试剂
90%丙酮溶液、碳酸镁粉末。
思凡mv 1.3 实验方法
1.3.1 过滤
在抽滤器上装好乙酸纤维滤膜。倒入定量体积的水样进行抽滤，抽滤时负压不能过大（约为50kPa）。水样抽完后，继续抽1～2min，以减少滤膜上的水分，该过程需在避光条件下完成。
1.3.2 提取
将滤膜放入研钵中，加入少量碳酸镁粉末及2～3mL90%自发功丙酮，充分研磨，提取叶绿素a。用离心机（3000～4000r/min）离心10min（可根据样品的浓度和浊度适当延长离心时间），将上清液倒入10mL容量瓶中，再用2～3mL90%丙酮，继续研磨提取，离心10min，并将上清液再转入容量瓶中，重复1～2次，用与谢野晶子90%丙酮定容为10mL，摇匀。
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