一 、叶绿素种类：
种类 | 颜 | | 比例 |
叶绿素a | 蓝绿 | 663nm | 3 | 生殖器官
叶绿素b | 黄绿 | 645nm | 1 |
| | | |
类胡萝卜素包括：胡萝卜素和叶黄素，二者之比是2：1。（ß-胡萝卜素的乙醚溶液在451处有吸收峰）
三、测定意义：
2、低生物碱品系，叶绿素含量高，不易烤
高生物碱品系，叶绿素含量低，易烤
3、叶绿素含量影响烟叶成熟落黄河烘烤特性
叶绿素和类胡萝卜素测定
一、叶绿素测定
1、原理：用有机溶剂将叶绿素提取出来，制成待测液，根据提取液对某一波长的光有选择吸收，吸光度符合朗莫-比尔定律，计算出待测液中叶绿素含量： E＝lgI0/I＝KCL
如果比皿厚度一定，则上式简化为：
E＝KC
K：吸光系数
C：浓度
茎叶图 如果待测液中含有2种以上有物质，其吸光度也符合朗莫-比尔定律
溶液中含有2种有物质时，有下式成立：
Eλ1=Ka1 Ca+Kb1 Cb ………（1）
Eλ94gay2=Ka2 Ca+Kb2 Cb ………（2）
在叶绿素的待测液中含叶绿素a和b ，则有：
E6632-溴芴＝82.04Ca＋9.27Cb ………（1）
E645＝16.75Ca＋45.6Cb ………（2）
E663＝82.04Ca＋9.27Cb ………（lwip1）
E645＝16.75Ca＋45.6Cb ………（2）
解联立方程式（1）和（2）得到：
Ca=0.0127 E663-0.00259 E645
Cb=0.0229 E645-0.00467 E663
Ca+b=0.00805E663+0.0203E645
2、测定步骤
①待测液制备：0.5-2g样品于乳钵（研钵）内，加4倍体积的丙酮和约位移比10mL 80%的丙酮，乳棒研磨。用吸管仔细吸取抽出液转移到50mL容量瓶内，重向乳钵内加入10mL 80%的丙酮，继续研磨，合并抽出液，如此反复，直至研磨看不出有素浸出为止，最后用80%丙酮定容到50mL，充分混匀，放冷暗处，使瓶内溶液澄清。
②测定：
吸取2mL待测液，用80% 丙酮稀释到20mL，测定其在645nm，663nm处的吸光值E645，E663。
3、计算：
把测定值代入下式计算得到叶绿素a 和b 的浓度，单位：g/L
Ca=0.0127 E663-0.00259 E645
Cb=0.0229 E645-0.00467 E663
Ca+b=0.00805E663+0.0203E645
根据叶绿素浓度和待测液体积，分取倍数，计算出叶绿素含量
待测液体积：50mL，取2mL稀释成20mL 后测定吸光值。则有：
二、类胡萝卜素测定：
1、原理：将叶绿素a和b 分离出去，剩下的类胡萝卜素溶于乙醚中，测定这个有溶液在451nm处的吸光值，计算出类胡萝卜素的近似含量
2、测定：
提取：5g样用丙酮提取叶绿素a和b 以及类胡萝卜素，蒸净提取液中的丙酮，加入乙醚，和等量20% （W/V）KOH的甲醇溶液，提取液中的叶绿素被皂化，皂化液移入分液漏斗，以免层加食盐水防止乳化，同时用水充分洗涤，加无水硫酸钠脱水，定容乙醚层，测定其在451nm处的吸光值。
3、计算
C=E/KL
E:吸光值，
K：吸光度，K451=250
L：比皿厚度/cm
C：胡萝卜素浓度: g/L
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