(一)原理:氨基酸具有酸、碱两重性质,因为氨基酸含有-COOH基显示酸性,又含有-NH2基显示碱性。由于这二个基的相互作用,使氨基酸成为中性的内盐。当加入甲醛溶液时,-NH2与甲醛结合,其碱性消失,破坏内盐的存在,就可用碱来滴定-COOH基,以间接方法测定氨基酸的量,反应式可能以下面三种形式存在。phh
(二)试剂
(1) 40%中性甲醛溶液
(2) 0.1%麝香草酚酞乙醇溶液。
(3) 0.100N氢氧化钠标准溶液。
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(三)操作步骤:
称取一定量样品(约含20毫克左右的氨基酸)于烧杯中(如为固体加水50毫升),加2-3滴指示剂,用0.100N NaOH溶液滴定至淡蓝。加入中性甲醛20毫升,摇匀,静置1分钟,此时蓝应消失。再用0.100N NaOH溶液滴定至淡蓝。记录两次滴定所消耗的碱液毫升数,用下述公式计算 计算:
氨基酸态氮(%)=( N V×0.014×100)/W
式中:
N:NaOH标准溶液当量浓渡。
V:NaOH标准溶液消耗的总量(m1)
W:样品溶液相当样品重量(克)。
0.014:氮的毫克当量。
三、双指示剂甲醛滴定法:
(一)原理:
与单法相同,只是在此法中使用了两种指示剂。从分析结果看,双指示剂甲醛滴定法与亚硝酸氮气容量法(此法操作复杂,不作介绍)相近单滴定法稍偏低,主要因为单指示剂甲醛滴定法是以氨基酸溶液PH值作为麝香草酚酞的终点。PH值在9.2,而双指示剂是以氨基酸溶液的PH值作为中性红的终点,PH值为7.0,从理论计算看,双滴定法较为准确。
(二)试剂:
(1) 40%中性甲醛溶液
(2) 0.1%麝香草酚酞乙醇溶液。
(3) 0.100N氢氧化钠标准溶液。
(4) 0.1%中性红(50%乙醇溶液)
叶绿素荧光参数 (三)操作步骤:
取相同的两份样品,分别注入100毫升三角烧瓶中, 一份加入中性红指示剂2-3滴,用0.100N NaOH溶液滴定终点(由红变琥珀),记录用量,另一份加入麝香草酚酞3滴和中性甲醛20毫升,摇匀,以0.100N NaOH准溶液滴定至淡蓝。按下述公式计算。
计算:
氨基酸态氮(%)=( N(V2-V1防喷盒)×0.014)/W×100人脸识别atm问世
式中:
V2:用麝香草酚酞为指示剂时标准碱液消耗量(毫升)
V1:用中性红作指示剂时碱液的消耗量(m1)。
N:标准碱液当量浓度。
W:样品的重量(克)。.
0.014:氮的毫克当量。
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注意事项:
测定时样品的颜较深,应加活性炭脱之后再滴定.