酿酒酵母蛋白表达载体是什么?

王亚忱

酿酒酵母蛋⽩表达载体是什么？

李汉柏酿酒酵母基因表达载体系统是基于⼴泛使⽤的pYES2载体⽽构建的，它是⼀个可⽤于在酵母中表达重组蛋⽩，或者通过在酵母中进⾏过表达以研究基因功能的强⼤⽽有效的系统。⽬的基因可以克隆在该载体上，通过客户选择的启动⼦来介导表达。VectorBuilder上有⼏种可供选择的标准启动⼦，其中之⼀是来⾃酵母半乳糖激酶（GAL1）基因的强诱导型启动⼦，它是酵母重组蛋⽩表达系统中最常⽤的启动⼦。

软件项目管理论文独裁国家在典型的酵母实验菌株（如INVSc1）中，GAL1启动⼦的转录活性与培养基中的碳源有⼀定的关系。在葡萄糖存在的情况下，GAL1启动⼦的的转录受到抑制；半乳糖则会激活该启动⼦。因此，通过简单地去除葡萄糖的培养基，并⽤含有半乳糖的培养基替代，可以实现⽬的基因的诱导表达。

peek或者，将棉⼦糖作为碳源。棉⼦糖既不抑制也不诱导GAL1启动⼦的转录，即使在棉⼦糖存在情况下，加⼊半乳糖也⾜以激活GAL1启动⼦。与使⽤葡萄糖培养基培养的细胞相⽐，半乳糖对使⽤含棉⼦糖培养基培养的细胞诱导更快。然⽽，由于棉⼦糖⽆法抑制GAL1启动⼦，所以该⽅法会导致诱导前⽬的基因的“泄漏”表达。

通常情况下，利⽤葡萄糖维持培养的细胞经半乳糖诱导后约4⼩时可检测到重组蛋⽩的表达，⽽⽤棉⼦糖培养的细胞仅需约2⼩时即可。建议您设置⼀个时间梯度来优化重组蛋⽩的表达。

他者

本文发布于:2024-09-25 14:32:03，感谢您对本站的认可！

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