木质素含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法

创意平板折叠桌木质素含量检测试剂盒说明书可见分光光度法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC4200
规格:50T/48S
产品内容:
试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存。每次用完用封口膜密封保存。
试剂二:液体30mL×1瓶,4℃保存。
标准品:粉剂×1支,200mg木质素(纯度50%,木质素含量25mg),4℃保存。用高氯酸定容至1mL,充分混匀溶解,配成25mg/mL的标准液。使用前混匀。
产品说明:
木质素是构成植物细胞壁的成分之一,具有使细胞相连的作用。木质素存在于木质组织中,主要作用是通过形成交织网来硬化细胞壁,为次生壁主要成分。
木质素中的酚羟基发生乙酰化后在280nm处有特征吸收峰,280nm的吸光值高低与木质素含量正相关。试验中所需的仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL石英比皿、可调式移液、研钵/匀浆器、EP管、封口膜、高氯酸、冰乙酸和蒸馏水。
操作步骤:
一、样品处理:
样品80℃烘干至恒重,粉碎,过40目筛,称取约5mg于1.5mL EP管中。
电镀件
二、测定步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至280nm,冰乙酸调零。桃花岛奇遇
上海南市区2、操作表:在1.5mL离心管中依次加入下列试剂:
测定管标准管空白管样品(mg)5--
试剂一(µL)500500500
高氯酸(µL)20-20
标准液(µL)-20-
封口膜密封,充分混匀。于80℃水浴锅水浴40min,进行乙酰化。每隔10min震荡一次,然后自然冷却。
试剂二(µL)500500500
充分混匀后于常温8000g离心10min,取上清。
上清液(µL)202020
出乌兰记冰乙酸(µL)980980980
测定280nm下的吸光值A,记为A测定管、A空白管、A标准管,计算△A=A测定管-A空白管、△A标准=A标准管-A空白管。
三、木质素含量计算:
C标准=C原液×V标准÷V乙酰化×V上清÷V检测=0.0098mg/mL
着眼于中国的可持续发展
木质素(mg/g)=△A÷(△A标准÷C标准)×V检测÷(W×V上清÷V乙酰化)
=0.3×△A÷△A标准÷W
C标准:标准液在最终检测体系中的浓度,0.0196mg/mL;C原液:标准液浓度,25mg/mL;V标准:加入的标准液的体积,0.012mL;V乙酰化:乙酰化反应体积,0.612mL;V上清:上清液体积,0.012mL;V检测:检测反应总体积,0.6mL;W:样本质量,g。
注意事项:
1、试剂一有毒性,请操作时做好防护措施,加热前必须用封口膜密封,以防气体溢出。
2、加热过程中有剧烈反应,震荡时轻摇,以免压力过大喷出造成人身伤害。
3、冰乙酸具有强刺激性,建议操作过程全部在通风橱内操作。
4、取上清加冰乙酸步骤根据自己样品乙酰化程度,冰乙酸的用量可调整,保证△A在0.1-0.8之间即可,
并在公式中参与计算。

本文发布于:2024-09-22 09:41:34,感谢您对本站的认可!

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