荧光定量PCR（qPCR）是一种基于聚合酶链式反应（PCR）的分子生物学技术，它可以快速、准确地定量检测DNA或RNA的数量。与传统PCR不同的是，qPCR在反应过程中会实时监测DNA合成过程中释放出的荧光信号，从而实现对样品中目标序列数量的快速、准确测定。 qPCR原理
qPCR基于PCR技术，也分为三个步骤：变性、退火和延伸。在变性步骤中，样品中的DNA双链被加热至95℃以上，使其解旋成单链。然后，在适当条件下使引物与目标序列配对形成双链结构，并由聚合酶进行扩增。在延伸步骤中，聚合酶以3'端为起点向5'端方向延伸，并在新合成链上合成一个互补链。
qPCR与传统PCR最大的不同之处在于检测方式。传统PCR通常通过电泳等方法检测扩增产物，而qPCR则利用荧光染料或探针实时监测扩增过程中释放出的荧光信号。
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荧光染料是一种荧光化合物，它可以与DNA或RNA结合并发出荧光信号。在qPCR中，荧光染料通常被加入到PCR反应体系中，以便实时监测扩增过程中释放出的荧光信号。
SYBR Green是一种常用的荧光染料，它可以与双链DNA结合并发出强烈的绿荧光信号。在qPCR过程中，SYBR Green会随着DNA扩增而不断累积，并释放出越来越多的荧光信号。因此，通过测量反应体系中SYBR Green的荧光强度，就可以快速、准确地定量检测样品中目标序列的数量。
探针
民事案由规定除了荧光染料外，还有一种更为精确和可靠的检测方式——探针法。探针是一种特殊设计的寡核苷酸序列，在PCR反应体系中与引物共同作用来扩增目标序列，并通过特定的信号转化机制实时监测扩增过程中释放出的荧光信号。
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探针通常分为两类：TaqMan探针和Molecular Beacon探针。TaqMan探针是由引物和一个带有荧光团和荧光猝灭团的特殊寡核苷酸序列组成的，而Molecular Beacon探针则是由引物和一个带有荧光团和熄灭团的特殊寡核苷酸序列组成的。
在qPCR反应过程中，如果探针与目标序列结合，则荧光团和熄灭团之间的距离发生改变，从而导致荧光信号的释放。通过检测反应体系中荧光信号的强度变化，就可以实时监测扩增过程中目标序列数量的变化。
总结
qPCR是一种基于PCR技术的分子生物学技术，它可以快速、准确地定量检测DNA或RNA的数量。与传统PCR不同的是，qPCR在反应过程中会实时监测DNA合成过程中释放出的荧光信号或探针信号，从而实现对样品中目标序列数量的快速、准确测定。在qPCR反应过程中，荧光染料或探针是实现实时监测信号释放最为重要的因素之一。托里拆利实验
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