袁毅君;王廷璞;焦成瑾;谢天柱;袁惠君;张继;詹斌
【摘 要】以康县地方茶树的茎、叶为外植体诱导愈伤组织,比较了不同激素组合对茎、叶诱导愈伤组织的影响.结果表明,以幼叶和幼茎作为外植体能获得较多的愈伤组织;幼叶外植体的适宜培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L,幼茎外植体的适宜培养基为6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L. 【期刊名称】《青海大学学报（自然科学版）》
新疆日报【年(卷),期】2010(028)005
【总页数】4页(P6-9)
【关键词】康县地方茶树;外植体;愈伤组织诱导
【作 者】袁毅君;王廷璞;焦成瑾;谢天柱;袁惠君;张继;詹斌
【作者单位】天水师范学院生命科学与化学学院,甘肃,天水,741001;天水师范学院生命科学与化学学院,甘肃,天水,741001;天水师范学院生命科学与化学学院,甘肃,天水,741001;天水师范学院生命科学与化学学院,甘肃,天水,741001;兰州理工大学生命科学与工程学院,甘肃,兰州,730050;天水师范学院生命科学与化学学院,甘肃,天水,741001;西北师范大学生命科学学院,甘肃,兰州,730070;陇西县文峰镇政府,甘肃,定西,748000
【正文语种】中 文
【中图分类】S722.3
茶树(Camellia sinensis L.)品种为甘肃康县本地茶树，采自甘肃康县阳坝宋沟村无公害绿茶园;组培用茶树枝为当年春茶采制结束，修剪茶树后新发30～40 d的枝条。
1.2.1 外植体的消毒处理
取康县茶树新发枝条的茎、叶，用自来水冲洗1h，在超净工作台上用75%的酒精表面灭菌30 s，再用0.1%的浸泡灭菌10 min后，用无菌水冲洗5次，用无菌滤纸吸干水分备用。
1.2.2 筛选诱导培养基
每天观察外植体的生长情况，记录愈伤数。诱导率/%=愈伤组织个数/接种外植体个数×100
由表2、表3可知，取材部位和材料的发育阶段对愈伤组织诱导均有影响，幼叶、幼茎能够诱导产生愈伤组织。幼叶外植体诱导出的愈伤组织质地较硬，诱导率较高，但诱导时间较长，与以往的报道结果相一致［4］。幼茎易褐变，所以诱导率低。因此，采用幼叶作为外植体较适宜。
将不同发育阶段的叶片接种于培养基上，10 d后，部分叶片卷曲、膨大，颜开始发黄;15 d时，叶片变厚，尤以切口处明显，颜不再变黄;培养20 d，在叶片切口处可见较疏松的翠绿愈伤组织，生长速度较慢叶片的叶脉比叶缘更易产生愈伤组织。6种培养基上都有部分叶片褐变，4号培养基褐变率最低，局部褐化不影响愈伤组织生长。接种不同发育阶段的茎，培养10 d左右时茎端膨大处出现淡黄绿愈伤组织，15 d后淡绿愈伤组织明显。
不同激素组合中愈伤组织的出愈率有较大差异。由表4可知，在1与5号培养基中未能诱导出愈伤组织;叶外植体:4号培养基上愈伤组织诱导率最高，达52%;其次为6号培养基，46.25
%;茎外植体: 6号培养基最高达10.34%，其次为2号培养基，8%。其中，4号培养基上，以幼叶为外植体的生长状态最好，出愈率最高，为52.00%;6号培养基上，以幼茎为外植体生长状态好，出愈率为6种培养基中最高，为10.34%。与以往的报道结果相一致［4，9－12］(图1)。
(1)取材部位和外植体的发育阶段，对康县地方茶树愈伤组织的诱导影响显著，幼叶、幼茎都能诱导出愈伤组织，而老熟组织不能用于愈伤组织诱导。
(2)幼叶外植体诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+6－BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L，幼茎外植体诱导愈伤组织的适宜培养基为6－BA0.5 mg/L+NAA1.0 mg/L+2，4－D2.0 mg/L;两种培养基的蔗糖浓度为30 g/L，琼脂为7 g/L，pH为5.8。
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参考文献:
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【相关文献】
1.2.3 选择外植体
分别取茶树枝顶芽至第3叶间的茎段作为幼茎，第3叶以下的为老茎，第1叶至第3叶叶片为幼叶，第3叶以下叶片为老叶，消毒后将叶片切成约1 cm2的小块，茎段切成0.3～0.5 cm小段，接入愈伤组织诱导培养基中。每处理5次重复，每瓶接种3～7个外植体。培养条件:温度25℃，光照12 h/d、光照强度1 500～2 000 lx，25～30 d继代1次。
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