㊃短篇论著㊃
王甩艳1，张秀明1，林喜荣1，罗燕萍1，贺玉莹2，莫红梅1ә
1.深圳市罗湖区人民医院医学检验科，广东深圳518001;
2.深圳市罗湖医院集团医学检验中心，广东深圳518001
摘要：目的对男性不育患者进行精子D N A检测，探讨精子D N A碎片指数(D F I)㊁精子高D N A着性(H D S)与受检者的精子形态及年龄的关系㊂方法选取深圳市罗湖区人民医院生殖中心601例精液样本，显微镜法计算正常形态精子百分比，流式细胞仪检测精子D F I和H D S，并分析其与受检者的正常形态精子及年龄之间的关系㊂结果正常形态精子百分比<4.00%组与ȡ4.00%组之间的D F I和H D S比较，差异有统计学意义(P<0.05)㊂各年龄组间D F I比较，差异均有统计学意义(P<0.05)，而各年龄组间H D S比较差异无统计学意义(P>0.05)㊂正常形态精子百分比与精子D F I㊁H D S呈负相关(r=-0.162,P<0.05;r=-0.281,P< 0.05)，年龄与精子D F I呈正相关(r=0.132,P<0.05)，而年龄与精子H D S无相关性㊂结论精子D F I和
H D S可作为反映男性生育能力的指标㊂
关键词：精子D N A碎片指数；精子高D N A着性；不育
D O I:10.3969/j.i s s n.1673-4130.2021.05.024中图法分类号:R698.2
文章编号:1673-4130(2021)05-0621-03文献标志码:A
精液常规检测是对男性生育能力进行评估的基础检查项目，但对精子功能的亚细胞结构不能做出评估[1-2]㊂精子D N A检测包括精子D N A碎片指数(D F I)和精子高D N A着性(H D S)㊂精子D F I是一个被认为较各种常规精液参数更为有效的男性不育指标，可以预测自然受孕和体外受精的结果[3-5]㊂精子H D S指高可染性的精子即核未完全缩合的不成熟精子占总精子的百分数，反映的是精子的成熟度[6]㊂精子D N A损伤有关的因素包括年龄㊁环境污染物等[7]㊂本文对男性不育患者的精子D F I㊁H D S与其形态和患者年龄进行相关性分析，旨在探讨其在男性生殖能力评估上的应用价值㊂
1资料与方法
1.1一般资料选取2018年5月至2020年1月深圳市罗湖区人民医院生殖中心的601例患者精液样本㊂601例患者婚后均正常性生活1年以上不育，无外伤及遗传性疾病家族史，体检未发现明显睾丸㊁附睾及输精管异常等，且基本排除女方不孕因素㊂正常形态精子百分比为0.00%~9.00%，平均(3.45ʃ1.91)%；年龄21~72岁，平均(35.76ʃ7.43)岁㊂1.2精子形态学分析采用改良巴氏染，按照世界
卫生组织(WHO)‘人类精液检查与处理实验室手册第5版“标准[8]，进行精子形态评价，正常形态精子百分比参考范围ȡ4.00%㊂
1.3精子D F I和H D S检测方法使用的仪器是流式细胞仪(m i n d r a y,B r i C y t e E6)，采用F C S A S软件分析精子的D F I和H D S㊂检验原理是正常精子D N A 紧密结合而具有抗酸性，维持双链的稳定性，而受损的或不成熟的精子形成松散的染质结构，其D N A 在酸作用下变成单链，吖啶橙(A O)与双链D N A结合发出绿荧光，与单链D N A结合发出红荧光，然后通过配有专用软件的流式细胞仪得出相关参数㊂D F Iɤ15%：精子D N A完整性好;15%<D F I<30%：精子D N A完整性一般;D F Iȡ30%：精子D N A完整性差㊂H D Sɤ15%：精子成熟染质含量正常;
H D S>15%：精子成熟染质含量异常㊂星光咏叹调
1.4统计学处理采用S P S S17.0统计软件进行数据分析，计数资料以[n(%)]表示，组间差异采用非参数检验分析，受检者的正常形态精子及患者年龄与精子D F I和H D S的相关性均采用P e a r s o n相关分析㊂2结果
2.1精液样本检测结果受检的601例精液样本中，精子D N A完整性好的有243例(40.43%)；精子D N A完整性一般的有241例(40.10%)；精子D N A 完整性差的有117例(19.47%)㊂精子成熟染质含量正常的有494例(82.20%)，精子成熟染质含量异常有107例(17.80%)㊂
2.2正常形态精子百分比与精子D F I和H D S的相关性依据正常形态精子百分比将患者分为< 4.00%组和ȡ4.00%组，分析两组精子不同程度
㊃126㊃
国际检验医学杂志2021年3月第42卷第5期I n t J L a b M e d,M a r c h2021,V o l.42,N o.5
*基金项目：广东省深圳市医疗卫生三名工程项目(S Z S M201601062)㊂
ә通信作者,E-m a i l:437897734@q q.c o m㊂
本文引用格式：王甩艳，张秀明，林喜荣，等.精子D F I㊁H D S与精子形态和患者年龄的相关性分析[J].国际检验医学杂志,2021,42(5): 621-623.
D N A完整性和成熟染质含量的分布情况，见表1㊁2㊂随着正常形态精子百分比的增大，精子D F Iɤ15%的个体所占的比率逐渐上升，而精子D F Iȡ30%和15%<D F I<30%的个体所占的比率逐渐下降，且精子H D S的比率趋势与D F I一致㊂非参数检验显示正常形态精子百分比<4.00%组与ȡ4.00%组之间的D F I和H D S比较，差异有统计学意义(P<0.05)㊂P e a r s o n相关分析表明正常形态精子百分比与精子D F I呈负相关(r=-0.162,P<0.05)，正常形态精子百分比与精子H D S呈负相关(r=-0.281,P< 0.05)㊂
表1两组D F I比较
组别n D F Iɤ15%15%<D F I<30%D F Iȡ30%P <4.00%组345114(33.04)145(42.03)86(24.93)<0.05ȡ4.00%组256129(50.39)96(37.50)31(12.11)
表2两组H D S比较
组别n H D Sɤ15%H D S>15%P
核衰变<4.00%组345257(74.49)88(25.51)<0.05ȡ4.00%组256237(92.58)19(7.42)
2.3年龄与精子D F I和H D S的相关性依据年龄将患者分为<35岁㊁35~<40岁和ȡ40岁3组，分析3组之间的精子不同程度D N A完整性和成熟染质含量的分布情况，见表3㊁4㊂随着年龄的增大，精子D F Iɤ15%的个体所占的比率逐渐下降，而精子D F Iȡ30%和15%<D F I<30%的个体所占的比率不断上升㊂各年龄组间D F I比较，差异均有统计学意义(P<0.05)，而各年龄组间H D S比较差异无统计学意义(P>0.05)㊂P e a r s o n相关分析表明患者年龄与精子D F I呈正相关(r=0.132,P<0.05)，患者年龄与精子H D S无相关(r=0.020,P>0.05)㊂
表3各组D F I比较
组别n D F Iɤ15%15%<D F I<30%D F Iȡ30% <35岁组305149(48.85)119(39.02)37(12.13) 35~<40岁组15964(40.25)63(39.62)32(20.13)ȡ40岁组13730(21.90)59(43.07)48(35.03)
表4各组H D S比较
组别n H D Sɤ15%H D S>15%
<35岁组305249(81.64)56(18.36)
35~<40岁组159128(80.50)31(19.50)
ȡ40岁组137117(85.40)20(14.60)
3讨论
精子D N A损伤是男性不育的主要分子原因，这对生育有负面影响㊂依据WHO指南，精液分析检测常规参数是评估男性生育能力的主要方法㊂然而，常规的精液分析对男性生育能力的预测是很有限的，很多时候并不能够解释男性不育的原因㊂在全球范围内进行精子D N A片段分析，可作为男性不育症的预后和诊断及其管理的工具[9]㊂近年来的研究发现，精
子在受孕和胚胎发育过程中也扮演了重要角，包括遗传物质表达异常㊁表观遗传规律紊乱㊁D N A完整性降低等㊂因此在评估男性生育力时，精子D N A完整性受到越来越多的关注㊂
精子D N A是父源遗传物质，其完整性对子代健康的重要性不言而喻㊂精子D N A损伤影响D N A碱基对的复制与转录，直接导致了遗传信息的缺失并影响生物转化功能，从而阻碍胚胎形成[10]㊂李清琴等[11]研究表明精子D F I与精子活力呈负相关，且升高水平与精子活力的下降程度有关，提示精子D N A 损伤可能存在与精子活力下降相同的影响机制㊂前者研究的是D F I与精液常规参数相关分析，而本文在其基础上，旨在研究的是D F I和H D S与受检者的正常形态精子百分比及年龄的关系,D F I反映的是精子D N A完整性好或差，是作为检测精子D N A损伤的一个重要指标，而H D S反映精子成熟染质含量正常与否，是对精子D N A损伤的重要补充依据㊂本研究结果显示，正常形态精子百分比ȡ4.00%与<4.00%这两组间的D F I和H D S差异有统计学意义(P< 0.05)㊂精子D F I和H D S与正常形态精子百分比呈负相关，表明精子碎片率高且其成熟染质含量异常可能会导致精子形态的异常，或者精子形态缺陷可伴有D N A碎片的增加和成熟染质含量异常㊂而精子畸形会导致受精能力降低㊂
本研究各年龄组之间的D F I比较，差异有统计学意义(P<0.05)，并且年龄与精子D F I呈正相关，即年龄越大,D F I越高，精子D N A的完整性越差㊂但是患者年龄与精子H D S无相关，说明年龄可能对于精子染质的成熟影响不大㊂C R O S N O E L等[12]研究表明随着父方年龄的增大，单基因突变会每年增加两个，这对精子与受精卵的成功结合及胚胎的正常发育有着重要的作用㊂同时也有相关研究表
明年龄增长，男性生育力下降，精液参数变差包括精子活动力㊁精子活率等降低[13]㊂因此，年龄增长导致精子D N A损伤概率增大和精子形态异常率升高㊂
精子D N A的损伤水平能显著性的预测宫颈内授精㊁宫腔内授精和体外授精等助孕手段的成功率，而且精子D N A损伤与卵细胞胞质内单精子注射及体外授精助孕后的妊娠风险增加显著相关[14-15]㊂
精子D F I㊁H D S与精子形态均呈负相关，精子D F I与患者年龄呈正相关，故年龄是影响精子D N A 完整性的因素之一，并且精子D N A损伤会导致精子形态的异常，因此精子D F I和H D S应与常规精液参数等综合分析，这在男性的不育原因诊断㊁精子生殖能力评估和人工辅助生殖结局的预测上有着非常重要的作用，同时需清楚精子D N A损伤的内在机制，有
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待后续进一步研究㊂
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解子征e i s a s s o c i a t e d w i t h a n i n c r e a s e d r i s k o
f p r e
工夫在诗外g n a n c y l o s s a f t e r I V F a n d I C S I:S y s t e m a t i c r e v i e w a n d m e t a-a-n a l y s i s[J].H u m R e p r o d,2008,23(12):2663-2668.
(收稿日期:2020-04-10修回日期:2021-01-12)
㊃短篇论著㊃
脑脊液寡克隆区带分析中镜像对称条带的临床意义*
王金玲，王培昌ә
首都医科大学宣武医院检验科，北京100053
摘要：目的探讨寡克隆区带(O C B)电泳分析中镜像对称条带类型的临床意义㊂方法选取2015年1月至2018年12月以各类神经系统疾病入住该院神经内科并且腰椎穿刺送检的脑脊液与血液样本O C B分析呈现镜像对称模式的12例患者作为研究对象，每例患者均行血清免疫固定电泳分析M蛋白情况㊂结果12例覆盖3种不同类型的镜像对称条带㊂所有类型的镜像对称模式均与M蛋白密切相关㊂12例最初以神经系统疾病收入院的患者中有7例被确诊为血液系统相关疾病，且12例患者中无一人被诊断为多发性硬化㊂结论无论何种类型的镜像对称条带的出现均提示患者血清中存在M蛋白的可能，且基本可排除多发性硬化的诊断㊂
关键词：寡克隆区带电泳；免疫固定电泳; M蛋白；镜像对称条带
D O I:10.3969/j.i s s n.1673-4130.2021.05.025中图法分类号:R744.52
文章编号:1673-4130(2021)05-0623-05文献标志码:A
脑脊液寡克隆区带(O C B)是神经系统脱髓鞘性疾病，是多发性硬化最具特征的诊断指标之一,90%的多发性硬化患者脑脊液可检测到O C B的合成[1-2]㊂O C B在神经系统脱髓鞘性疾病的诊断㊁鉴别诊断及其
㊃326㊃
国际检验医学杂志2021年3月第42卷第5期I n t J L a b M e d,M a r c h2021,V o l.42,N o.5
*基金项目：北京市医管局人才培养计划 登峰 项目(D F L20180803)㊂
ә通信作者,E-m a i l:p c w1905@126.c o m㊂
本文引用格式：王金玲，王培昌.脑脊液寡克隆区带分析中镜像对称条带的临床意义[J].国际检验医学杂志,2021,42(5):623-627.
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