肠道沙门氏志贺氏菌检验方法探讨

肠道沙门氏志贺氏菌检验方法探讨
【搞要】目的:了解本地区沙门氏菌和志贺氏菌的分布。方法:对本地区1990年至2008年食品从业人员健康体检肠道门诊及肠道检测点患者检出的沙门氏菌、志贺氏菌进行分类统计。结果:沙门氏菌977,B57.22%;D113.72%;E111.88%。志贺氏菌2522,B80.53%;D15.82%;B中以F2a1a1b为主。结论:该区两菌分布情况与国内有关文献报道基本一致。
【关键词】沙门氏菌;志贺氏菌;分布
沙门氏菌属广泛分布于自然界,通常寄居在人或动物肠道内。本菌属中有的除引起肠道感染外,还能引起其它脏器或全身性感染,例如肠热症、败血症等。志贺氏菌属亦称痢疾杆菌属,引起细菌性痢疾。人对志贺氏菌易感,只需少量细菌进入肠道即可引起感染。沙门氏菌属和志贺氏菌属也是引起食物中毒的重要病原菌。
19902008年本区疾控中心共检出沙门氏菌1138株、志贺氏菌2522,分别作了鉴定。
1 对象与方法
北留中学1.1 检测对象:本区食品从业人员健康体检、肠道门诊及肠道监测点患者。
1.2 检测依据:《标准操作规程》(上海市疾控中心);《卫生防疫细菌检验》;《沙门氏菌属诊断抗原表》(成都生物制成研究所);GB17012-1997感染性腹泻诊断标准及处理原则;GB16002-1995细菌性痢疾、阿米巴痢疾诊断标准及处理原则。
1.3 培养基:所用培养基均由上属市疾控中心提供,均在有效期内使用。
1.4 诊断血清:沙门氏菌属诊断血清和志贺氏菌属诊断血清均由成都生物制品研究所提供,均在有效期内使用。
2 病原学检验
2.1 采样:调查中采集粪便(肛拭)标本,粪便标本保存于亚硒酸盐胱氨酸增菌液(每份10mL),血液标本分离血清后备用。
2.2 标本处理:粪便标本先转种SSHE琼脂后,(37±1)恒温箱21h,直接进行一次分离培养;同时再将增菌管继续放置于(37±1)恒温箱,增菌培养18h后再次转种上述鉴别培养基。
2.3 标本鉴定:培养21h左右,将直接分离的培养皿中出现的可疑菌落与沙门氏AF-O多价血清进行一次玻片凝集,在此基础上,进一步用重要的分“O”单价血清凝集,发出初步报告。同时挑取可疑菌落接种三糖铁半固体琼脂。
三糖铁半固体琼脂中符合沙门氏菌属反应的做革兰氏染,染形态符合沙门氏菌属的做系统生化反应,生化反应符合者做抗原分析,确定血清型别。最后用患者恢复期混合血清筛选出抗原性较强的代表株,分别与患者血清做特异性抗体测定。
3 结果
3.1 沙门氏菌检出情况:1138株沙门氏菌中,A-F1135,99.74%。其中未分型的有武士道精神161:A17株、B31株、C54株、D3株、E52株、F4株。其余977株。977株沙门氏菌分属11个血清,其中B为首位,57.22%;其次为D113.72%;E111.88%。共有54个血清型。
tcg3.2 志贺氏菌检出情况:2522株志贺氏菌分布于4个菌,其中B为首位,80.53%;其次为湮灭反应D15.82%,见表1
B亚型分布F2a为首位,51.90%;其次为F1a1.62%;F1b10.98%,见表2
4 讨论
4.1 因为细菌性食物中毒病原学的鉴定过程较长。为了争取报告时间,15h左右对现场接种(
或不经增菌直接接种)的平皿中出现的可疑菌落,直接进行玻片凝集鉴定,可以提前2d作出初步诊断,为临床诊断及疫情处理提供技术支持。中毒患者双份血清的抗体测定,可以充分证实病因和食物中毒的关系。在条件较差的基层疾病预防控制中心,这一检测手段显得更是不容忽视。
4.2 恢复期10份血清中有3份无抗体增长现象,可能与及时抗菌等综合、疗程短、细菌繁殖数量少、抗原攻击不强有关。确切原因有待进一步探讨。
4.3 由于沙门氏菌在20以上肉类组织中能大量繁殖。又因沙门氏菌不分解蛋白和产生吲哚,污染肉类食品后,其感官性状仍然良好,人们进食污染的食物后,往往不被察觉。此外,农村宴席加工方法不符合卫生要求,容易交叉污染等原因,引起食物中毒的比例大。所以加强这方面的宣传教育,提高众自我保健意识,实属非常重要。
4.4 沙门氏菌含菌体抗原、鞭毛抗原、表面抗原氘气,由于表面抗原的存在,可阻碍菌体抗原与抗体的凝集。表面抗原是一种不耐热的、不稳定的抗原,其化学成分为糖脂,经加热60100即被破坏。因此,把细菌制成浓混悬液后,加热破坏表面抗原,露出菌体抗原与相应的免疫血清发生凝集,故沙门氏志贺氏菌阳性检出率,有明显的提高。
参考文献
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作者单位:200082 上海市虹口区疾病预防控制中心

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