木糖醇的鼠伤寒沙门氏菌诱变性试验研究

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木糖醇在自然界中广泛的存在于玉米芯、甘蔗、柑橘等蔬菜水果中,在开发之初是作为甘油的代用品[1],后来人们发现,木糖醇甜度高,能预防龋齿,而且机体对其具有极高的耐受性,所以木糖醇越来越多地被应用在食品、药品、医疗等产品中。本文对木糖醇进行了鼠伤寒沙门氏菌诱变性试验
1 试验材料
1.1 药物V给
木糖醇,批号XCP13090501(含量100.3%),由浙江华康药业股份有限公司生产。试验时溶于灭菌注射用水。
1.2 对照品
阴性对照:灭菌注射用水,批号:140712 上海信宜金朱药业有限公司生产。
阳性对照:甲磺酸甲酯(MMS),批号:P1085020 Acros公司(U S A )生产,2,4,7-三硝基-9-芴酮,批号:210081273AccuStandard公司(USA)生产,二氨基芴(2-AF),批号:021547Aldrich公司(USA)生产,阳性对照品均用二甲基亚砜(DMSO)配制。罗尔中值定理
1.3 菌株
菌株TA97、TA98、TA100、TA102均由购自美国Moltox 公司。储存于-196℃液氮罐,试验前对各菌株进行了组氨酸缺陷鉴定(his )、脂多糖屏障缺陷鉴定(rfa)、紫外线修复缺陷鉴定(uvrB)、氨苄青霉素抗性鉴定(pKM101)、四环素抗性鉴定(PAQ1)、自发回变数鉴定以及对阳性突变剂的敏感性鉴定,经鉴定符合生物学特性要求。
1.4 代谢活化系统大鼠肝微粒体酶S9,本实验室自制,采用多氯联苯诱导,无菌检性和代谢活化特性检测符合实验要求。2 方法和结果
2.1 按标准Ames 试验[2-3]
采用预培养平板掺入法,每个组别应用TA97、TA98、TA100、TA102四种菌株在加或不加S9代谢活化系统下,各做3个平皿,进行两次独立试验。取保温在45 ℃、含2 ml融化的顶层培养基的试管,加入菌液0.1 ml,每个组别设四个剂量组,最高剂量为5000μg/皿,最低剂量为40μg/皿。需代谢活化的放弃是成功的第一步
耿文清再加入0.5 ml S9混合液,混匀后倒入底层培养基上,铺平,标记组别、剂量、活化和非活化,另设阴性对照组和阳性对照组。试验平皿经37℃培养48小时后,计数回复突变菌落数(以x±s表示)。根据“二倍法则”,如果供试品组回变菌落数增加一倍以上,并有剂量反应关系或至少某一测试点有可重复的并有统计学意义的阳性反应,即可认为该供试品诱变试验阳性,反之为阴性。云南盘鮈
2.2 试验结果
由表1试验结果可以看出,木糖醇对四种菌株的回变突变菌落数与阴性组比较未超过两倍;且木糖醇各剂量组在加或不加S9代谢活化系统试验中,均不引起回变菌落数的明显增加,表明木糖醇在本试验条件下对四种菌株未产生致突变作用。
3 讨论
Ames 试验是一种快速检测化合物致突变性和潜在致癌性的方法[4-6],目前已成为世界范围内基因突变检测中应用最为广泛的一种方法[7],也是我国食品、保健食品及药品遗传毒性标准试验组合中必选的一项。木糖醇既可作矫味剂,也可作表面活性剂,另外由于它化学性质稳定,其注射液可与多种注射剂配伍使用,甚至有研究表明其在肝病和呼吸道感染中也有用武之地[8],因而木糖醇在食品和医药行业中的使用日益广泛,人们对木糖醇的安全性关注也越
木糖醇的鼠伤寒沙门氏菌诱变性试验研究
陈怡  张婷  刘洋  汪岱迪  宗卫峰*
(江苏省食品药品监督检验研究院  江苏南京  210008)
摘要:应用鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验)研究了木糖醇的诱变作用。试验选用鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102四株试验菌株。当木糖醇的浓度分别为5000、1000、200和40μg/皿,无论是在加或不加S9活化系统条件下进行试验,其对四株试验菌株的回复突变作用均为阴性。结果表明,木糖醇在体外对原核细胞无诱变作用。
关键词:木糖醇  诱变性  鼠伤寒沙门氏菌  Ames试验中图分类号:Q5文献标识码:A 文章编号:1674-2060(2015)11-0019-01
表1 木糖醇对Ames 试验菌株回变菌落数的影响(x ±s,n =6)
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通讯作者:宗卫峰
>苏霍姆林斯基的教育思想

本文发布于:2024-09-21 00:43:59,感谢您对本站的认可!

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