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叶绿体蛋白提取试剂盒使用说明

货号：R0060

规格：50T/100T

产品内容：

试剂盒组成50T100T

提取液A200ml400ml

提取液B25ml50ml

蛋白酶抑制剂混合物100ul200ul

注：蛋白提取液：含多种有效成分，可以充分释放蛋白，又可结合释放出的蛋白防止沉淀。提取液中已含有磷酸酶抑制剂混合物。

蛋白酶抑制剂混合物：包含6种独立的蛋白酶抑制剂，AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64。避免反复冻融，试剂盒不能短时间内用完，抑制剂混合物不可一次全部加入提取液。

保存：蛋白提取液2-8℃保存，蛋白酶抑制剂混合物于-20℃保存。有效期1年。

产品简介：

叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器，光合作用就是在叶绿体中进行的，由于具有这一重要功能，所以叶绿体一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。叶绿体蛋白提取试剂盒用简便快速的方法可以从各种植物样本中提取叶绿体蛋白，提取过程简单方便，可在1小时内提取得到高质量的叶绿体蛋白。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。该试剂盒提取的蛋白具有天然活性，提取的蛋白可用于Western Blotting、免疫共沉淀、酶活新英格兰医学杂志

测定等各种下游蛋白研究实验。

1．使用方便

国家节能中心

2．将蛋白提取的时间缩短至1小时。

3．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

5．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性。

绝操作步骤：

实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样本处于低温。

1．取新鲜植物样本叶片，洗净擦干后去除叶梗和粗脉。

2．每2g样本加入4ml提取液A。

3．用研钵快速研磨30-60秒，或者用组织搅碎机高速匀浆1分钟。

4．将匀浆用3层纱布或者400目滤网过滤。

上海市金汇实验学校5．将滤液200×g离心力(约1000rpm，不同离心机不一样，以实际为准)离心1分钟。将上清移入另一干净离心管。

6．将上清1000×g（约3000rpm）离心5分钟。

7．弃上清，收集沉淀。

8．在沉淀中加入200ul抽提液B和2ul蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后在冰上静置15分钟，中间每隔5分钟高速涡旋振荡10秒。

9．将提取液在4℃，12000×g离心5分钟，取上清。

10．即得叶绿体蛋白。

11．将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或调整相应的浓度后直接用于下游实验。

少阳病注意事项：

1.叶绿体蛋白提取试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或。

2.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

3.最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

4.避免皮肤或粘膜与试剂接触。