常用试剂配方
常用试剂
：储存于阴凉、通风的地方；远离火种、热源。避免光照。室温不超过30℃，相对湿度不超过80％。包装必须密封，切勿受潮。应与易（可）燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放，切忌混储，储区应备有合适的材料收容泄漏物。
操作注意事项：尽量在通风橱操作，加强通风，避免粉尘扩散。远离易异丙基丙烯酰胺
燃、可燃物，避免与还原剂、碱类、醇类接触，防止包装
及容器损坏。使用后应留意剩余量，注意及时订购。
8M Urea（尿素）
组份浓度： 8mol/L Urea（MW：60.07）
配制量： 1L
配制方法： 1.称取尿素480g，置于1L的蓝盖瓶中。 2. 加水至1L，置于磁力搅拌器上充分搅拌。
3. 于棕瓶中，4℃保存。
0.25％AgNO3 （硝酸银）
组份浓度：0.25％（W/V）AgNO3（MW：169.87）
配制量： 500ml
配制方法: 1.准确称取硝酸银1.25g。
3.于棕瓶中，常温保存。
0.5M EDTA（PH 8.0）
组分浓度: 0.5 mol/L EDTA（MW：372.24）
配制量: 500ml
配制方法: 1．称取93g Na2EDTA·2H2O置于500ml蓝盖瓶中。
2．加入400ml的去离子水，置于磁力搅拌器上充分搅拌。
3．用NaOH调节调节pH值至8.0（约需加入20g固体NaOH），当pH接近8.0时， EDTA方可完全溶解，加入去离子水定容至
1L。
5M NaCl
组份浓度： 5mol/L NaCl (MW：58.5)
配制量： 1L
配制方法： 1.准确称取氯化钠292.5g，置于1L的蓝盖瓶中。
2.用去离子水溶解并稀释至1L。专用小学生校车安全技术条件
3.高温高压灭菌后，常温保存。
50% 甘油
组分浓度： 50%(V/V) glycerol
配制量： 100ml
配制方法: 1. 量取下列试剂，置于250ml蓝盖瓶 中：
100% glycerol 50ml糖水不等式
2.加入50ml去离子水，充分搅拌溶解。
3.高温高压灭菌，4℃保存。
4.使用时，到超净台分装。
2M CaCl2
组份浓度：2mol/L CaCl2 (MW：110.98)
配制量： 50ml
配制方法: 1.准确称取氯化钙4.4g于50ml的conical tube中。
2.用去离子水溶解并稀释至500ml，用0.22μm滤膜过滤除菌滤
膜过滤除菌到进口的conical tube。
3.贮存于4℃。
2M MgSO4
组份浓度： 2mol/L MgSO4 (MW：120.37)
配制量： 50ml
配制方法： 1.准确称取硫酸镁4.8g于50ml的conical tube中。
2.用去离子水溶解并稀释至50ml，用0.22μm滤膜过滤除菌到进口的conical tube。
炼焦学3.贮存于4℃
3 M NaOAc （pH5.2）
组份浓度: 3mol/L CH3COONa（MW:136）
配制量: 100mL
配制方法： 1.称取40.8g NaOAc•3H2O置于200mL蓝盖瓶中，
2.加入约40mL 的去离子水搅拌溶解
3.加入冰乙酸调节pH值至5.2。
4.加入去离子水将溶液定容至100mL。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
3 M KOAc
组份浓度: 3mol/L CH3COOK（MW:98）
配制量: 100mL
配制方法：在60ml 5mol/L乙酸钾溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml；水，即成钾浓度为3mol/L而乙酸根浓度为5mol/L的溶液。
1M Na2SO4
组份浓度: 1mol/L （MW: 142.04）
配制量: 500mL
配制方法： 1.称取71.02g置于500mL蓝盖瓶中，
2.加入去离子水将溶液定容至500mL。
3.室温保存。
HEPES
1M HEPES：
配制量: 100mL
配制方法：1、将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。
2、如不想加入OH- ，可以配200ml HEPES和200ml HEPES sodium salt ，将HEPES sodium salt加入200ml HEPES调至所需PH。
注意：一般长晶体用的HEPES需用后一种方法配制，配一般buffer则可用第一种方法配。50% PEG（聚乙二醇）
有分子量400，1000，2000，4000，6000，10000
药品不良反应监测系统
配制量: 500mL
配制方法：
称取250g PEG加入500ml蓝盖瓶，加水至500ml，置于磁力搅拌器上充分搅拌，完全溶解后，用NALGENE过滤器抽滤，抽滤后用50ml灭菌离心管分装，存放在-20℃底层。
20% Glucose（葡萄糖）
组份浓度：20% (W/V) Glucose
配制量：100 ml
配制方法：
1. 称取20g Glucose置于150ml的广口试剂杯中，加入去离子水到100ml 后，搅拌溶解。
2. 高温高压灭菌后，4C保存。
100 mM ATP
组份浓度：100 mM ATP
配制量：20 ml
配制方法：
1. 称取121 mg Na2ATP·3H2O，加入到50 ml塑料离心管内。
2. 加20 ml的25 mM Tris-HCl（pH8.0)，搅拌溶解。
3. 适量分成小份后，-20℃保存。
2YT 液体培养基
放置：NaCl、蛋白胨、酵母粉置于放电子天平的实验桌上层或在试剂柜底层
配方及配法：
500ml 1L 2L
NaCl 2.5g 5g 10g
蛋白胨（TRYPTONE） 8g 16g 32g
酵母粉（YEAST EXTRACT） 5g 10g 20g平果铝
注意：在通风橱内称量，防止粉末飞起
一般用2L三角瓶配2L培养基摇匀溶解后分装成每瓶500ml。
装好瓶的液体培养基加塞并用锡箔纸包好，121°C高温高压灭菌。
配50ml或100ml 2YT 液体培养基时，先用2L瓶配好所需总量，完全溶解后分装。
2YT 固体培养基
放置：Agar置于放电子天平的实验桌上层
配方及配法：
取三个500ml 三角瓶，各加5g Agar（鹭隆），将配好的1L 2YT 液体培养基均分成三分加到三个500ml 三角瓶中，用锡箔纸包好，121°C高
温高压灭菌。（不需加塞，因为加塞后放不进微波炉）
抗生素
Amp-氨苄青霉素（钠盐）
放置：置于4°C冰箱
配方及配法：
配成200mg/ml的1000*溶液储存(40g溶于200ml蒸馏水中)，
溶解后在超净台用注射器过滤灭菌分装，置于-20°C冰箱第二层，以1*的终浓度（200ug/ml）加入培养基。
Kan-卡那霉素（硫酸根）
放置：置于试剂柜
配方及配法：
配成20mg/ml的1000*溶液储存(4g溶于200ml蒸馏水中)，
溶解后在超净台用注射器过滤灭菌分装，置于-20°C冰箱第二层，以1*的终浓度（20ug/ml）加入培养基。
Chl-氯霉素
放置：置于试剂柜
配方及配法：
配成34mg/ml的1000*溶液储存(6.8g溶于200ml 100%乙醇中)，
溶解后在超净台用注射器过滤灭菌分装，置于-20°C冰箱第二层，以1*的终浓度（34ug/ml）加入培养基,
注意：如接种到5ml培养基摇不起来，可将Chl用量减半
蛋白表达纯化相关：
IPTG（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷）
放置：置于-20°C冰箱顶层
配方及配法：
1M IPTG的配制：溶解23.8g IPTG 溶于水中，定容至100 mL
溶解后在超净台用注射器过滤灭菌分装，置于-20°C冰箱第二层，一般使用浓度为0.25uM，即500ml培养基加125ul，
注意：个别蛋白表达提高IPTG浓度能提高表达量
DTT（二硫苏糖醇）
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