不同菌种保藏储存⽅法优缺点的介绍
⼀、菌种斜⾯低温保藏储存⽅法
1、将细菌接种在合适的固态斜⾯培养基上。细菌充分⽣长后，⽤油纸包裹棉塞，将其移⾄⼆⾄⼋摄⽒度的冰箱中进⾏保存。 2、中海微⽣物霉菌，放线菌和带有孢⼦的细菌要保存⼆到四个⽉，然后移植⼀次。酵母菌有两个⽉⼤，最好每个⽉移植⼀次细菌。
此⽅法是实验室和⼯⼚菌株房中常⽤的保存⽅法。它具有操作简单，使⽤⽅便，不需要专⽤设备的优点，中'海并且可以随时检查保存的菌株是否死亡，变异和污染。缺点是易于突变，因为培养基物理和化学性质不是严格恒定的。重复传代会改变微⽣物的新陈代谢，从⽽影响微⽣物的特性；有更多机会污染细菌。 ⼆、菌种滤纸保藏储存⽅法
1、将滤纸裁切成0.5*1.2厘⽶规格的⼩条，放⼊⼀两张0.6*8厘⽶的安瓿管中，塞满1.05kg / cm2的棉塞，在121.3°C下灭菌三⼗分钟。
2、培养需要保存在合适的倾斜培养基上以使其完全⽣长的菌株。
3、取1-2ml⽆菌脱脂⽜奶并将其放⼊⽆菌陪替⽒培养⽫或试管中，然后将其与⽜奶混合制成浓缩悬浮液。
4、使⽤⽆菌镊⼦从安瓿管中取出滤纸条，并将其浸⼊细菌悬浮液中使其充满，然后将其放回安瓿管中，并在其上放⼀个棉塞。
5、将安瓿瓶管放⼊含有五氧化⼆磷作为吸⽔剂的⼲燥器中，并使⽤真空泵将其抽⼲。 6、将棉布放⼊试管中并⽤⽕焰密封，中海⽣物技术。
7、需要使⽤菌株。恢复培养时，在⽕焰上加热安瓿的嘴，在被加热的部分上滴⼀滴冷⽔以打破玻璃杯，然后⽤镊⼦敲打玻璃杯。打开安瓿瓶后，将其取出。
将滤纸放⼊中海液体培养基中，然后在培养箱中培养，细菌，酵母和丝状真菌可以通过这种⽅式保存。前两个可以保存⼤约两年，有些丝状真菌甚⾄可以保存⼗四⾄⼗七年。此⽅法⽐液氮和冷冻⼲燥⽅法简单，不需要特殊设备。
三、菌种液体⽯蜡保藏储存⽅法中南集团企业管理信息系统
1、将液体⽯蜡分配到锥形瓶中，⽤棉塞塞好并⽤⽜⽪纸包裹，然后⽤1.05kg / cm2，在121.3°C消毒加热30分钟，然后将其置于40°C的培养箱中以蒸发⽔蒸⽓，然后放置。
2、在最合适的斜⾯培养基中培养需要保存的细菌。
3、使⽤⽆菌吸管吸取⽆菌液体⽯蜡，然后将其注⼊细菌⽣长的斜坡。该量应在斜坡顶部上⽅1厘⽶处，以使细菌与空⽓隔离。
4、垂直放置试管，并将其存放在低温或室温下。在室温下储存的微⽣物寿命将⽐在冰箱中更长。
此⽅法实⽤有效。霉菌，放线菌和孢⼦细菌可以保存两年以上⽽不会死亡，酵母可以保存1-2年，⼀般⾮孢⼦细菌也可以保存壹年左右，即使是脑膜炎球菌也很难按常规⽅法保存，在37℃下也可以在培养箱中保存三个⽉。
此⽅法的优点是⽣产简单，⽆需专⽤设备且⽆需频繁移植。缺点是在存储过程中必须将其垂直放置，这会占⽤很⼤的空间并且不便于携带。从液体⽯蜡下⾯取下培养物并移植后，当接种环在⽕焰上燃烧时，中.海培养物很可能会与剩余的液体⽯蜡飞溅，因此应特别注意。
四、菌种沙⼟保藏储存⽅法质子衰变
四、菌种沙⼟保藏储存⽅法
1、取河砂，加⼊10稀盐酸，加热煮沸30分钟以除去有机物。
2、倒出酸性⽔，⽤⾃来⽔冲洗⾄中性。
3、⼲燥并⽤40⽬筛⼦过筛，以除去粗颗粒并放在⼀旁。
4、从⾮耕作层中取出不含腐殖质的瘦黄⼟或红⾊⼟壤，⽤⾃来⽔浸泡并清洗⼏次，直到呈中性。
5、⼲燥粉碎后通过100⽬筛⼦进⾏筛分，以除去粗糙的颗粒。
江西省煤矿设计院6、根据黄⼟的⽐例与砂⼦的⽐例为三分之三或根据需要以其他⽐例混合，甚⾄可以将所有沙⼦或所有⼟壤均匀混合，放⼊10×100毫⽶的⼩试管或安瓿瓶试管中，每⽀试管中约装1g，放在棉塞上，消毒并⼲燥。
7、取样进⾏⽆菌检查，每⼗根沙⼟管抽⼀次，将沙⼟倒⼊中海⾁汤培养基，并在37°C孵育四⼗⼋⼩时。如果仍然存在细菌，则都需要重新消毒，然后可以使⽤⽆菌测试，它可以被使⽤直到被证明是⽆菌的。
8、成熟孢⼦层的选择通常是指孢⼦层的完全⽣长，⽽营养细胞对该⽅法⽆效。好的菌株⽤⽆菌⽔洗涤以制备孢⼦悬浮液。
9、向每个沙质⼟壤管中加⼊约0.5ml孢⼦悬浮液，通常只是为了润湿沙质⼟壤。
10、将其放在真空⼲燥器中，并使⽤真空泵排⽔。排⽔时间越短越好。确保在12⼩时内将其排⼲。
11、从10中取出⼀个，使⽤接种环取出⼀些沙粒，将其接种在倾斜的培养基上，然后培育成观察⽣长情况以及是否有细菌⽣长。如果细菌存在或菌落数量很少或根本不长，则表明⽣产的沙⼦和⼟壤管道存在问题，需要进⼀步抽样检查。
12、如果检查后没有问题，请⽤⽕焰密封喷嘴并将其存放在冰箱或室内⼲燥的地⽅。每六个⽉检查⼀次活⼒和细菌状况。
13、需要使⽤细菌。恢复培养物时，取少许沙⼦，将其转移到中海液体培养基中，然后放⼊培养箱中进⾏培养。
此⽅法主要⽤于可产⽣孢⼦的微⽣物，例如霉菌和放线菌。因此，它是⼯业⽣产中使⽤最⼴泛的抗⽣素，效果良好。它可以保存⼤约两年，但是将其应⽤于植物细胞时⽆效。
五、菌种冷冻⼲燥保藏储存⽅法
1、准备安瓿瓶试管。⽤于冷冻⼲燥细菌保存的安瓿管应由中性玻璃制成。形状可以是长颈和球形底部，也称为泪滴型安瓿管。该尺⼨需要6-7.5mm的外径，105mm的长度和球形部分。直径为9-11mm，壁厚为0.6-1.2mm。也可以使⽤不带球形部件的管状安瓿瓶管。放⼊1.05kg / cm2的棉塞，在
121.3°C下灭菌30分钟，然后放置。
2、准备菌株并冷冻⼲燥保存的菌株菌株，保存期可以达到⼏年到⼗年以上。为了避免多年后出现错误，应特别注意所⽤菌株的纯度，即应没有杂菌。污染，然后在最佳温度下的中海培养基中进⾏培养，从⽽可以培养出良好的培养物。
细菌和酵母菌的年龄要求超过对数⽣长期。如果使⽤对数⽣长期的细菌进⾏保存，则它们的存活率将会降低。通常，细菌需要24-48⼩时的培养；酵母需要培养3天；应当将形成孢⼦的微⽣物保存为孢⼦；将放线菌和丝状真菌培养7-10天。
3、细菌悬液的制备和分配以细菌坡度为例，在倾斜管中加⼊约2ml脱脂⽜奶制成浓缩细菌溶液，并向每个安瓿管中分配0.2ml。
4、冻⼲机作为成套设备出售，价格昂贵。这⾥是可以达到相同⽬的的简单⽅法和设备。将等分的安瓿瓶管放⼊低温冰箱中并冷冻。没有冷冻剂，如⼲冰固态CO2醇液或⼲冰丙酮液，温度可达-70℃。将安瓿瓶管插⼊制冷剂中，冷冻4-5分钟以冻结悬浮液。天宝系
5、真空⼲燥是在真空⼲燥过程中保持样品冷冻。有必要准备⼀个冷冻罐，在其中放置碎碎的冰块和盐，混合均匀，并
5、真空⼲燥是在真空⼲燥过程中保持样品冷冻。有必要准备⼀个冷冻罐，在其中放置碎碎的冰块和盐，混合均匀，并可以冷却到-15°C。通常，如果真空在30分钟内可以达到93.3Pa0.7mmHg，则⼲燥的物料将不会融化，然后继续泵送空⽓。在⼏个⼩时内，⾁眼可以看到⼲燥的材料已经变⼲，通常将真空泵抽⾄真空⽔平 26.7Pa0.2mmHg，保持压⼒6-8⼩时。
6、抽真空密封并⼲燥后，取出安瓿瓶管并将其连接到⽤于密封的玻璃管。使⽤L形五通管继续抽⽓，它将在⼤约⼗分钟内达到26.7Pa0.2mmHg。在真空状态下，安瓿的颈部被薄薄的喷⽕焰密封。密封后，在室温下存放在冰箱或⿊暗的地⽅。
六、菌种液氮冷冻保藏储存⽅法
金斯伯格1、准备⽤于保存液氮的安瓿瓶试管。安瓿瓶管必须能够承受温度的突然变化⽽不会破裂。需使⽤硼硅酸盐玻璃制造⼯艺⽣产的安瓿瓶，安瓿瓶的尺⼨通常为75×10毫⽶，或者可以容纳1.2毫⽶液体的安瓿瓶。
2、在添加保护剂并进⾏灭菌以存储细菌时，酵母或霉菌孢⼦和其他易于分散的细胞，⽤1.05kg / cm2的棉塞塞住空的安瓿瓶管，并在121.3°C灭菌15分钟：如果⽤于保存霉菌菌丝，需要在安瓿瓶管中加⼊保护剂，例如10蒸馏⽢油或10％⼆甲基亚砜蒸馏⽔。添加量限于以后可以添加的菌落圆，然后在1.05kg / cm2和121.3℃灭菌⼗五分钟。
3、⽤10％⽢油蒸馏⽔溶液制成菌株，放⼊⽆菌安瓿瓶中。对于霉菌菌丝，使⽤⽆菌冲头从平板上切下菌落。将其放⼊装有保护剂的安瓿瓶中，然后⽤⽕焰密封。浸⼊⽔中以检查是否泄漏。
4、然后将密封的安瓿瓶试管以每分钟下降1°C的慢速冷冻⾄-30°C。如果将细胞剧烈冷冻，则细胞内部会形成冰晶，从⽽降低存活率。f-22p
5、保存后，将安瓿瓶冷冻⾄-30°⽴即将C放⼊液氮冷冻机的⼩圆筒中，然后将⼩圆筒放⼊液氮保存器中。液氮存储中的⽓相温度为-150°C，液氮为-196°C。
6、需要恢复培养液时并保存菌株，取出安瓿瓶管，⽴即将其置于38-40°C的⽔浴中以快速融化，直到所有融化。然后打开安瓿瓶管，将内容物转移到合适的培养基中进⾏培养。
此⽅法不仅适⽤于⼀般微⽣物的保存，还适⽤于某些难处理的中海微⽣物的保存。通过诸如⽀原体，⾐原体，氢细菌等冷冻⼲燥⽅法进⾏保存，可以将难以形成孢⼦的霉菌，噬菌体和动物细胞保存很长时间，⽽不会改变其性质。缺点是需要特殊设备。
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