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8 化学发光免疫技术：
1 化学发光剂
【酶促反应发光剂：辣根过氧化物酶HRP发光剂（常用底物为鲁米诺及其衍生物和对-羟基）；碱性磷酸酶ALP发光剂（AMPPD：有2~30min的分解半衰期，发出波长为470nm的持续光，在15min达到高峰；4-MUP：在360nm激发光的作用下，发出448nm荧光） 【直接化学发光剂：改变溶液pH就能发光。口丫口定酯AE在含过氧化氢的稀碱溶液中能发光。
【电化学发光剂：通过点击表面进行电化学反应而发出光的物质。
化学发光剂三联吡啶[Ru(bpy)3]3+和电子共同三丙胺TPA在阳性点击表面课同时失去一个电子而发生氧化反应。二级的三联吡啶聊被氧化成三家，成为强氧化剂，TPA失去电子后被氧化成阳离子自由基，课自发失去一个侄子，形成自由基，是一种很强的还原剂，课将一个高能量电子递给三家的三联吡啶聊，使其形成激发态二价。发射场620nm的广州，恢复基态。
【电化学发光剂特点：分子小，空间位阻小。衍生物与免疫球蛋白结合不印象起可溶性与免疫性。水溶性好，稳定性高。
9 补体检测及应用:
0 基本概念
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【补体：存在于人或动物血清中的一组具有酶样活性的不耐热和功能上连续反应的蛋白质，是抗体发挥溶细胞作用的必要补充条件。 【溶血素：抗绵羊红细胞抗体。实验前56摄氏度30分钟灭活补体，预先用免疫溶血实验滴定溶血素效价（将不同稀释度的溶血素和等量的补体与SRBC混合于试管中，37摄氏度30 分钟水浴。完全溶血的试管中液体红透明，离心后无细胞沉降；完全不溶血的试管中液体浑浊，离心后红细胞完全沉降，上清液无透明。一产生完全溶血的溶血素的最高稀释度作为其效价，确定为1单位。补体结合使用一般采用2U溶血素）
【经典激活途径：机体体液免疫反应的主要效应机制。抗原抗体复合物依次激活C1q、C1r、C1s、C4、C2、C3形成C3转哈酶（C4b2b）与C5转化酶（C4b2b3b）。 【MBL途径：病原微生物表面糖结构与甘露聚糖结合凝集素结合，进而依次激活MBL相关丝氨酸蛋白酶MASP、C4、C2、C3形成和经典激活途径相同的C3和C5转化酶。激活过程无须抗体参与。
【旁路激活途径：不经过C1、C4、C2途径，而由C3、B因子、D因子参与的激活过程。
1 补体结合试验CFT原理、技术要点和评价
【原理：（反应系统，指示系统，补体系统）一直抗原与待测抗体；绵羊红细胞与相应溶血素结合，成为致敏绵羊红细胞；反应系统与补体系统先发生反应，然后再加入指示系统，根据致敏绵羊红细胞有无溶血来判断。（有相应抗原或抗体存在，不发生溶血，试验
阳性）
【评价：（不需要特殊仪器，对实验室条件要求低。补体活化过程的放大作用，使灵敏度高0,05ug/ml抗体。可用于定性或半定量检测，多种类型的抗原或抗体。）（影响因素复杂，操作步骤繁琐且要求严格，补体不稳定。）
2 血清总补体溶血活性（CH50）测定原理和应用杀气三时作阵云
【原理：血清中补体经典活化途径的溶血活性。补体C1-C9被抗体（溶血素）致敏的绵羊红细胞活化并使后者溶解。当红细胞与溶血素的量一定时，补体的量及活性与溶血程度正相关，。在50%溶血附件，S形曲线最都，补体活性稍有变化，溶血程度就有明显变化，以50%溶血为反应终点比100%更敏感。
空客开发飞行出租3 补体旁路途径溶血活性（APH50）测定和评价
【涎酸课抑制B因子的活性，家兔红细胞中的较低，课激活血清中的B因子，导致补体旁路途经激活，兔细胞溶解。在红细胞量一定时，在规定反应条件下，溶血程度与血清中参与旁路活化的补体量及活性呈正相关，50&溶血为重点。
【反映C旁路途经的溶血功能，
4 C4溶血活性的测定和评价
【将豚鼠血清用氨水处理去除其中的C4，这种C4缺乏血清R4不能使溶血素致敏的SRBC溶解，当加入含有C4的受检血清后，补体连锁反应恢复，即可到账致敏的SRBC溶解。溶血程度与待测血清中的C4活性相关。50%溶血为反应终点。
互补偿值。
M蛋白:单克隆免疫球蛋白，是B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆免疫球蛋白；
冷球蛋白: 一组低温下发生沉淀，加温后又复溶的Ig。
本-周蛋白（bence-Jones）:尿中游离的免疫球蛋白轻连。
免疫增殖病（immunoproliferative disease）：LC异常增殖引起的疾病.
重链病(heavy chain disease):突变的浆细胞产生异常增多的重链或质量不能与L链装配的 Ig重链，血清和尿中H链过剩导致的疾病。
轻链病：异常的LC产生大量的Ig的L链在肾脏和内脏组织，导致肾损伤和淀粉样病变的疾病。
自身免疫机体免疫系统对自身成分发生免疫应答的现象，为生理性免疫应答的一部分。
自身免疫病（ AID）因机体免疫系统对自身成分发生免疫应答而导致的组织损伤或功能紊乱，属于病理性免疫应答。
抗核抗体（ ANA）：抗核酸抗原抗体，是一组将自身真核细胞的各种成分[脱氧核糖核蛋白（DNP）、DNA、可提取的核抗原（ENA）和RNA等]作为靶抗原的自身抗体的总称。
类风湿因子（ RF）：自身免疫病人体内表达的抗自身变性IgG的IgM类抗体。
bbc 隐蔽抗原：指体内在解剖位置上某些与免疫系统隔绝的成分，如眼组织、精子等。当外伤、手术和感染等情况下，释放并与机体免疫系统接触可以引起免疫应答，导致自身免疫病。
超敏反应：又称为变态反应，是指机体对某些抗原初次应答后，再次接受相同抗原刺激时，发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。
变应原：是指能够选择性地激活CD4＋Th2细胞及B细胞，诱导产生特异性IgE抗体应答，引起变态反应的抗原性物质。
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皮试：用少量抗原注射、挑刺或划痕等方法注入到受试者皮肤，用于变应原的检测。
1.免疫防御功能异常可导致(感染)和(免疫缺陷)疾病。
2.抗原抗体反应的特点有 特异性、比例性 、可逆性
3.抗原抗体反应的温度一般以15～40℃为宜，最适温度37℃
3．影响抗原抗体反应的环境因素主要有电解质、pH、温度
4．某些特殊的抗原抗体反应对温度有一些特殊的要求，如冷凝集素在4℃左右与红细胞结合最好20％ 以上反而解离。
5．抗原抗体的结合分子间的引力包括静电引力、 范德华引力、氢键引力和疏水作用力
2.间接凝集反应的类型包括正向间接凝集、反应反向间接凝集反应、间接凝集抑制反应和协同凝集反应四种类型。
3参与凝集反应中的抗原称为（凝集原）抗体称为(凝集素)试验有(玻片法)(试管法)(玻片法)常用的直接凝集
4．在间接凝集反应中正向凝集反应是用(抗原)致敏载体以检测标本中相应的(抗体)而反向间接凝集反应是用(抗体)致敏载体以检测标本中相应(抗原)
5．间接抗球蛋白试验可用已知抗原型红细胞检测血清中的(不完全抗体)可用于输血前的(交叉配血)试验。
1．免疫沉淀反应是（可溶性抗原）与（相应抗体）特异性结合
2．棋盘格法（抗原 ）和（抗体）同时稀释，可一次完成（抗原）和（抗体）的滴定
3．单向琼脂扩散是待测抗原从含有定量（抗体）的（凝胶）内自由向周围扩散，抗原抗体特异性结合，在两者比例合适的部位，形成（沉淀环）。
4．Maneini曲线适用于大分子抗原的测定，在一定范围内，沉淀环随时间延长而扩大，抗原浓度与（扩散环直径的平方）呈线性关系，常用（普通）坐标纸作图。
5．Fahey曲线适用于小分子抗原的测定，在一定范围内，沉淀环随时间延长而扩大，沉淀环直径与（抗原浓度的对数）呈线性关系，常用（半对数）坐标纸作图。
6.双向琼脂扩散试验可对抗原或抗体的存在、含量和相对分子量进行分析，沉淀线靠近抗原孔指示（抗体含量）较大；靠近抗体孔则指示（抗原含量较高）；不出现沉淀线则表明（无对应的抗原和抗体）
7.免疫电泳是将（电泳）与（双向免疫扩散）相结合的一种免疫化学分析技术。
8.火箭电泳是（电泳）与（单向免疫扩散）相结合的免疫技术。
9.对流免疫电泳是（电泳）与（双向免疫扩散）相结合的免疫技术。
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