过氧化物酶染标准操作程序

太原空气源热泵设计过氧化物酶染标准操作程序
1.检验目的
通过对血细胞内过氧化物酶的染测定,可用于白血病细胞的鉴别与分型。
2.检测原理
血细胞内过氧化物酶(POX)能将无的二氨基联苯胺的氢原子转移给过氧化氢,使前者变为有染料沉积在细胞质酶所在部位。
1.标本
新鲜的骨髓细胞涂片及血液细胞涂片。
2.试剂
弹性蛋白酶联苯胺液(A液)、H2O2(B液) 、瑞姬氏染液(C液) 、磷酸盐缓冲液(D液)
3.环境和安全
5.1环境温度要求:2~8℃保存,有效期12个月。
5.2安全控制:工作中所有与病人的样本接触或有潜在性接触可能的样本都视为污染物。在操作时有必要穿戴保护性的工作服、外套和手套。
在处理废弃样本时不可触摸废弃物,一定戴手套和护目镜以避免直接接触。如果操作人员不小心接触血液、试剂、废弃物/皮肤或衣物上沾到了样本、试剂及废液,用大量清水冲洗并适当考虑必要的医疗措施。
4.操作步骤
6.1新鲜的涂片滴加A染液数滴(以覆盖涂片为宜),再滴加B染液数滴(A液:B液=1:1),混合后室温染5~10分钟,流水冲洗2分钟,待干。
6.2然后用瑞姬氏染(C液)与磷酸盐缓冲液(D液)1:2比例混合,对其染3~5分钟,流水冲洗,干后镜检。
7.检验结果解释
阴性------胞质内无沉淀物(无)
阳性------胞质内出现棕黄或蓝黑沉淀物
8.实验室临床解释
8.1粒细胞系统呈集中状颗粒强阳性反应,单核细胞系统呈弥散状颗粒弱阳性反应,部分原始单核细胞可呈阴性反应。
8.2淋巴细胞系、红细胞系、巨核细胞系、浆细胞系等均为阴性反应。
8.3在白血病细胞的鉴别与分型中的应用:
强阳性提示:FAB中的M1,M2,M3;
部分强阳性与弥散状弱阳性提示:FAB中的M4;
小丑快递>goagent ios弥散状弱阳性提示:FAB中的M5;
阴性提示:FAB中的M0,M5,M6,M7,ALL等。
9.变异潜在来源中耳炎散
若样本采集后不能及时测定,可采用95%乙醇固定2分钟后,可保存数天。宜可使用某些抗凝血(肝素、EDTA),样本在未染前切勿沾有甲醇和氧化剂类试剂,以免细胞内的过氧化物酶被抑制或破坏。无敌推销员
溶血样本不宜使用,因涂片中大量游离血红蛋白易使背景产生难以去除的杂质颗粒。
每次操作时均应设阴,阳性对照,若遇结果有疑问,应重复检测。
10.参考文献
10.1 陆永绥,张伟民主编.临床检验管理与技术规术规程.杭州:浙江大学出版社,2004.
10.2尚红.申子瑜.王毓三. 全国临床检验操作规程[M]. 第4版. 人民卫生出版社.
10.3 过氧化物酶染液使用说明书.

本文发布于:2024-09-20 23:19:16,感谢您对本站的认可!

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