要证明某种疾病是由某一感染性病毒所引起，则必须满足以下原则：
①从患病者体内分离出病毒;
③证明这种培养物具有滤过性；火灾自动报警系统组成
④在原始宿主或相关种属内能产生同样的病症；
⑤能重新分离出病毒。
1.病毒的分离
1.1。1标本的收集
a)粪便标本：将5g粪便标本和50ml PBS放入盛有20—25颗玻璃小珠的100ml无菌瓶中,搅拌成悬液，倒出上清,3000×g，4℃离心6min.
b)拭子和生物体液:拭子浸在2—3ml运载培养基中，将棉拭子中的液体尽量挤出以获得标本,如果液体被污染,应3000×g 4℃离心30min。
c)组织标本：用无菌乳钵或匀浆器研磨组织标本，同时加入足量的PBS制备成20％的悬液，3000×g 4模糊数学模型℃离心30min。
1。1.2 除菌处理
a)粪便可加青链霉素使最终浓度为10000单位/毫升,置4℃过夜。
b)鼻咽拭子一般加抗生素最终浓度为2000单位/毫升，置4℃作用4小时。
c)对乙醚有抵抗的病毒如鼻病毒、肠道病毒、呼肠孤病毒、腺病毒、痘病毒等，则可加入等量的乙醚4℃过夜除菌。
1.2 病毒的分离培养同济大学图书馆
病毒是严格的细胞内寄生微生物,培养病毒必须使用细胞.根据病毒的不同选用敏感动物（动物接种）、鸡胚（鸡胚接种）或离体细胞进行分离培养(细胞培养)。
1。2。1 鸡胚接种
a)鸡卵的选择：一般都选新鲜、10天以内的受精卵以保证规格质量上的一致 。
b)孵育：孵育时可将鸡卵放入卵箱内进行,气室向上，孵育的最适温度为38-—39℃，相对湿度为40—70%,孵育8日后，鸡卵应每天翻动1—2次，以帮助鸡胚发育匀称和防止鸡胚膜粘连.
c)检卵:鸡卵孵育4～5天后，即可用检卵器检查鸡胚发育情况（二天一次)。①未受精鸡卵：在检卵器上仅见到模糊的阴影。②活鸡卵：鸡胚发育4天后，在检卵器上就可见到清晰的血管，鸡卵内有一小黑点(鸡胚），有明显的自然转动。③死胎:如果发现鸡卵血管模糊、扩张、胚胎活动呆滞或不能自主地转动，则可判断胚胎频死或已经死亡,应将其挑捡出来。鸡胚孵育完毕后，用铅笔划出气室边缘和胚胎的位置待用。 d)接种：
e)
d-木糖
f)剖检及收获
收获前鸡胚应置国家安全委员会4℃冰箱过夜,使鸡胚内血液凝固.收获时，用碘酒将气室部卵壳消毒,将气室处卵壳剥去（不要将碎片落入壳膜）。然后用无菌手术刀柄从胚胎背部轻轻下压，（切勿压破卵黄囊）再用吸管吸取尿囊液,置青霉素小瓶内，于低温保存。
g)优缺点
优点：技术简单、来源充沛、价格低廉、数量可大、不需特殊设备。缺点：很多病毒不能适应，主要是哺乳动物的病毒.
1。2.2 细胞培养
我们想去的地方
细胞培养（cell culture）是指利用机械、酶或化学方法使动物组织或传代细胞分散成单个乃至2～4个细胞团悬液进行培养.根据细胞的类型和培养细胞代数的不同，可将其分为两种：原代细胞培养；传代细胞培养。
组织细胞培养的病毒，当出现稳定的细胞病变后,就可取培养液或培养液与细胞培养物混和物，细胞培养物中的病毒可采用冻融、超声波等方法使其释放出来。 优点：
a)每个细胞生理特性基本一致，对病毒易感性相等；
b)无个体差异，准确性和重复性好;
c)可严格执行无菌操作;
d)细胞培养本身就能显示病毒的生长特征；
e)应用空斑技术可进行病毒的克隆化.
2.病毒的鉴定
2.1形态学鉴定
细胞病变效应(cytopathic effect，CPE）：病毒在细胞内增殖后，可引起细胞的不同变化。常见的形态学改变如细胞圆缩、聚合、溶解或脱落。CPE出现的时间是鉴定病毒的标志之一。
某些病毒感染细胞产生的特征性的形态变化,在普通光学显微镜下可见胞浆或胞核内出现的呈嗜酸性或嗜碱性染、大小数量不等的圆形或不规则形的团块状结构，病毒学上称为包涵体.
多见于以出芽方式释放的病毒.血吸附指感染细胞具有吸附红细胞的能力；血凝作用指感染细胞的培养液中有许多游离病毒存在,具有凝集红细胞的作用。
2.2.1血吸附实验
具有血凝能力的病毒能使感染的细胞吸附红细胞，这种现象被称作吸附作用。大多数粘液病毒能引起吸附.具体检验步骤如下：
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