基金项目：国家自然科学基金(３１５７０１５２
)通信作者：吴锐，潘兹书C o r r e s p o n d e n c e t o :WU R u i ㊀E Ｇm a i l :w r u i １１２０＠１６３．c o m ;P A N Z i s h u ㊀E Ｇm a i l :z s p a n ＠w h u ．e d u ．c n d o i :１０．３９６９/j ．i s s n ．１６７３Ｇ６１８４．２０１９．０５．００３ 论著 猪瘟病毒C o r e 蛋白核仁定位序列鉴定 吴锐１,２，潘兹书２
１．贵州省人民医院生殖中心，贵阳５５０００２;２．武汉大学生命科学学院/病毒学国家重点实验室，武汉４３００７２
摘㊀要：黄病毒科病毒核衣壳蛋白的核仁定位在病毒颗粒包装与病毒复制中发挥重要作用.为鉴定黄病毒科的猪瘟病毒C o r e 蛋白核仁定位序列，本研究构建了将C o r e 蛋白㊁
截短突变体和氨基酸位点突变体分别与增强型绿荧光蛋白(e n h a n c e d g r e e n f l u o r e s c e n t p r o t e i n ,E G F P )融合的真核表达质粒，转染至P K １５细胞
科技创新与应用后进行表达和定位分析，结果显示C o r e 蛋白核仁定位序列为P E S R K K L ，其关键氨基酸为R ７６K ７７，对理解猪瘟病毒C o r e 蛋白结构与功能和为后续研究C o r e 蛋白在病毒复制及颗粒包装中的作用有重要意义.关键词：猪瘟病毒;C o r e 蛋白;
linbo3
核仁定位I d e n t i f i c a t i o no fn u c l e o l u sl o c a l i z a t i o ns e q u e n c ei nt h e C o r e p
r o t e i no f c l a s s i c a l s w i n e f e v e r v i r u s WU R u i １,２,P A N Z i s h u ２１．R e p r o d u c t i v eC e n t e r ,G u i z h o u p r o v i n c i a l p e o p l e sh o s p i t a l ,G u i y a n g ５５０００２,C h i n a ;２．S t a t e K e y L a b o r a t o r y o f V i r o l o g y ,C o l l e g e o f l i f e s c i e n c e ,W u h a nU n i v e r s i t y ,W u
h a n４３０７２,C h i n a A b s t r a c t :T h ec o r e p r o t e i no fc l a s s i c a l s w i n ef e v e rv i r u s (C S F V )i san u c l e o c a p s i d p r o t e i nl o c a l i z e di nt h e i n n e r p a r t o f v i r i o n ．T h en u c l e o l u s l o c a l i z a t i o no fn u c l e o c a p s i d p r o t e i no f v i r u s i nf a m i l y F l a v i v i r i d a e p l a y
s a n i m p o r t a n t r o l e i nv i r i o n p a c k a g i n g a n dv i r u s r e p l i c a t i o n ．I nt h i s s t u d y ,r e c o m b i n a n t e u k a r y o t i c p l a s m i d s e x p r e s s i n g C
信息化建设
S F V C o r e p r o t e i n ,i t s t r u n c a t e da n da m i n oa c i d sm u t a n t s f u s e dw i t hE G F P w e r ec o n s t r u c t e d ,r e s p e c t i v e l y
稀疏化．S u b c e l l u l a rl o c a l i z a t i o no fc o r e p r o t e i na n di t s m u t a n t si nt h et r a n s f e c t
e d P K １５c e l l s w e r e o b s e r v e d u n d e r c o n f o c a l m i c r o s c o p y ．W e s u c c e s s f u l l y i d e n t i f i e d t h e n u c l e o l u s l o c a l i z a t i o n s e q u e n c e P E S R K K La n d i t s c r i t i c a l a m i n oa c i d sR ７６K ７７i nC o r e p r o t e i n ．O u rw o r kw i l l f u r t h e r o u r u n d e r s t a n d i n g o f t h e s t r u c t u r ea n d f u n c t i o no fC S F V C o r e p r o t e i na n d i t s r o l e s i nv i r i o n p a c k a g i n g a n dv i r u s r e p对羟基联苯
l i c a t i o n ．K e y w o r d s :C l a s s i c a l s w i n e f e v e r v i r u s ;C o r e p r o t e i n ;N u c l e o l u s l o c a l i z a t i o n ㊀㊀猪瘟病毒(c l a s s i c a l s w i n e f e v e rv i r u s ,C S F V )为黄病毒科瘟病毒属成员，是引起猪急性㊁发热性与
接触性传染病 猪瘟的病原体.C S F V 基因组为
１条长约１２ ３k b 的单股正链R N A ，包括位于两端的非编码区和中间编码多聚蛋白的开放读码框.多
食品价格连续上涨聚蛋白经过细胞与病毒的蛋白酶加工后形成４个结
构蛋白和８个非结构蛋白.C S F V４种结构蛋白分别是核衣壳C o r e 蛋白㊁包膜蛋白E r n s ㊁E １和E ２[１].C o r e 蛋白在基因组编码的多聚蛋白上位于N 端蛋白酶N p r o 与糖蛋白E r n s 之间.C o r e 蛋白的成熟包括N p r o 蛋白酶水解多聚蛋白，形成C o r e 蛋白的N 端及细胞信号肽酶加工
７７２ 微生物与感染㊀J o u r n a l o f M i c r o b e s a n d I n f e c t i o n s ,O c t o b e r ２５,２０１９,１４(５):２７７Ｇ２８１㊀h t t p :ʊj m i ．f u d a n ．e d u ．c n
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