简介:
本试剂盒采用异硫氰酸胍及表面活性剂联合裂解细胞技术,添加独特的病毒凝集剂,不需要进行酚氯仿抽提,可从细胞培养物、血浆、血清、分泌液、腹水、拭子等的样本中快速提取痕量的病毒或细胞的核酸(DNA和RNA)。有效去除酶抑制剂,提取的核酸可用于PCR、RT-PCR、定量PCR、杂交等各种分子生物学实验,对于临床基因诊断尤其适用。 特点:
1、经济实惠,使用耗材少,DNA和RNA都能提取;
2、快速,不需要进行酚氯仿抽提,有效去除各种酶抑制物,方便后续实验操作;
3、提取效率高,痕量病毒或细胞仍能有效提取到核酸。
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试剂盒组成(50次):
刘子蔚1、抽提A液(1瓶,10ml) 2、抽提B液(1瓶,12.5ml)
barkhausen3、抽提C液(1瓶,10ml) 4、样本稀释液(1支,1ml)
储存及有效期:
-20℃储存,开封后可放置于4℃,有效期两年。
操作步骤(以血清、分泌液和腹水为例):
1、取待抽提的血清50μl置于微型离心管中,加入200μl抽提A液,颠倒数次充分混匀;(混匀后室温放置5分钟可达到最佳效果)
2、加入250μl抽提B液,颠倒数次充分混匀(混匀后室温放置10min可达最佳效果),13000rpm离心10min,倒去上清;
3、加入200μl抽提C液,颠倒数次混匀,13000rpm离心5min,吸弃上清(尽量去掉上清);
4、室温放置或50℃加热5min晾干,加入25μl样本稀释液混悬沉淀物,短暂离心使液体落于管底部,上清液即为提取得到的核酸。
注:对于分泌物或棉拭子,先用适量无菌生理盐水把拭子上的分泌物洗入离心管中,或者把拭子泡在无菌生理盐水中,捻动使分泌物分散于液体中,然后高速离心5min后,去除大部分上清,余下的样本即应用上述步骤抽提核酸。
注意事项:网络神话
1、如果抽提的是病毒RNA,最好即提即用,保存请置于-80℃。
马克隆>葛宝丰2、抽提A液及抽提B液可根据所用的提取物的量等倍加大用量。
3、抽提A液低温保存会有絮状物析出或凝结是正常现象,使用前置于50℃使融化,颠倒混匀,不影响使用。
4、血浆样本尽管也能直接提取,但先用红细胞裂解液处理去掉红细胞,效果将更好。
5、加入样本稀释液后仍有部分沉淀不溶解是正常现象,不影响后续实验。