一、实验目的
1、掌握湿消化法―敞口消化的操作要领。
2、了解湿消化法的优缺点。
二、实验内容
1、试样的制备。
2、样品的消化。
三、实验方法
1 原理
试样加入强氧化性的酸(如浓硫酸、浓硝酸、高氯酸等)，结合加热来破坏有机质，使包含在有机物中的待测成分释放出来，并形成各种步挥发的无机化合物供测定。
2.1 天平，消煮炉等。
2.2 浓硝酸、浓硫酸。
3 分析步骤
称取5.00g样品，置于消化管中，先加水少许使湿润，加数粒玻璃珠、30mL硝酸，混匀，放置片刻，小火缓缓加热，待作用缓和，放冷。沿瓶壁加入5mL硫酸，再加热，至瓶中液体开始变成棕时，不断沿瓶壁滴加硝酸至有机质分解完全。加大火力，至产生白烟，待管口白烟冒净后，管内液体再产生白烟为消化完全，该溶液应澄明无或微带黄，放冷。 加20mL水煮沸，除去残余的硝酸至产生白烟为止，如此处理两次，放冷。将冷后的溶液移入50mL容量瓶中，用水洗涤消化管，洗液并入容量瓶中，放冷，加水至刻度，混匀。定容后的溶液每10mL相当于1g样品，相当加入硫酸量1mL。
取与消化样品相同量的硝酸和硫酸，按同一方法做试剂空白试验。
四、注意事项
1、加酸进行消化时，应控制好火候。
2、为了减少消化时产生大量泡沫，可在消化前于室温下浸泡过夜。
3、在消化过程中加酸，必须取下烧瓶冷却后缓缓加入。
实验二 动物性食品中总砷的测定―银盐法
一、实验目的
掌握银盐分光光度法（DDC-Ag）的原理，了解本法的操作程序与实验要点。
二、实验内容
样品消化（硝酸—硫酸法）、测定、标准曲线的绘制及结果计算。 三、实验方法
1 原理
样品经消化后，以碘化钾、氯化亚锡将高价砷还原为三价砷，然后与锌粒和酸产生的新生态氢生成，经银盐溶液吸收后，形成红胶态物，与标准系列比较定量。
2 试剂
除特别注明外，所用试剂为分析纯，水为去离子水。
2.1 浓硝酸、浓硫酸、浓盐酸。
2.2 无砷锌粒。
2.3 碘化钾溶液(150g/L)：贮存于棕瓶中。
2.4 酸性氯化亚锡溶液：称取40g氯化亚锡(SnCL2·2H2O)，加盐酸溶解并稀释至100mL，加入数颗金属锡粒。
2.5 乙酸铅溶液(100g/L)。效益最大化
2.6 乙酸铅棉花：用乙酸铅溶液(100g/L)浸透脱脂棉后，压除多余溶液，并使疏松，在100℃以下干燥后，贮存于玻璃瓶中。
2.7 氢氧化钠溶液(200g/L)。
2.8 硫酸词源学(6+94)：量取6.0mL硫酸，加于80mL水中，冷后再加水稀释至100mL。
2.9 二乙基二硫代氨基甲酸银—三乙醇胺—溶液：称取0.25g二乙基二硫代氨基甲酸银［(C2H5)2NCS2Ag］，置于乳钵中，加少量研磨，移入100mL量筒中，加入1.8mL三乙醇胺，再用分次洗涤乳钵，洗液一并移入量筒中，再用稀释至100mL，放置过夜。滤入棕瓶中贮存。
wap模拟器
2.10 砷标准溶液：准确称取0.1320g在硫酸干燥器中干燥过的或在100℃干燥2h的，加5mL氢氧化钠溶液(200g/L)，溶解后加25mL硫酸(6+94)，移入1000mL容量瓶中，加新煮沸冷却的水稀释至刻度，贮存于棕玻塞瓶中。此溶液每毫升相当于0.10mg砷。
2.11 砷标准使用液：吸取1.0mL砷标准溶液，置于100mL容量瓶中，加1mL硫酸(6+94)，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1.0μg砷。
3 仪器
3.1 752型分光光度计。
3.2 测砷装置（发生器）。
注意：所用玻璃仪器均需以硝酸(1+5)浸泡过夜，用水反复冲洗，最后用去离子水冲冼干净。
教师培训的意义
4 测定方法
4.1 样品消化（硝酸—硫酸法） 见实验一的3部分。
4.2 测定
4.2.1 吸取一定量的消化后的定容溶液(相当于5g样品)及同量的试剂空白液，分别置于150mL锥形瓶中，补加硫酸至总量为5mL，加水至50mL。各加3mL碘化钾溶液(150g/L)，0.5mL酸性氯化亚锡溶液，混匀，静置15min。各加入3g锌粒，立即分别塞上装有乙酸铅棉花的导气管，并使管尖端插入盛有4mL银盐溶液的离心管中的液面下，在常温下反应45min后，取下离心管，加补足4mL。用1cm比杯，以零管调节零点，于波长520nm处测吸光度，绘制标准曲线。
4.2.2 标准曲线的绘制
吸取0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0mL砷标准使用液(相当0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0μg)，分别置于150mL锥形瓶中，加水至40mL，再加10mL硫酸(1＋1)。
5 计算
式中：X ——样品中砷的含量，mg/kg或mg/L；
m1——样液吸光度查标准曲线对应As的含量，μg；
m ——样品质量，g；
V1——样品消化液定容体积，mL；
V2——检测用样液体积。
四、试剂作用
1、硝酸、硫酸为试样消化液，试样中的砷消化后全部变为五价砷。
2、碘化钾、氯化亚锡溶液为还原剂，在酸性环境中将五价砷还原为三价砷。
3、锌粒在酸的作用下生成氢气，继而试样中的三价砷与氢反应生成气体，通过乙酸铅棉花滤去干扰气体硫化氢后导入吸收液中。
4、二乙基二硫代氨基甲酸银为吸收液。将银离子还原为元素银，元素银在氯仿中呈
5、三乙醇胺为强碱性高价离子的掩蔽剂，并具有对DDC-Ag冶金标样吸收液促使胶状银的生成，具有显稳定作用，达到提高检测的灵敏度。
五、实验要点
1、无砷锌粒规格应严格控制。锌粒大要适当多加和延长时间；绝不能用锌粉代替锌粒，因锌粉反应猛烈，致使吸收不全。
2、乙酸铅棉花应干燥，棉花装填不宜太松或太紧。
3、配制DDC-Ag吸收液如有不溶物，应过滤。本试剂显后可稳定2小时。但整个操作过程应避光。
4、氯化亚锡溶液应保持一定酸度，试剂无酸雾时，应重新配制。否则还原作用减弱。
5、消化试样时要防止因高氯酸干涸而发生爆炸等事故的发生。
实验三 鲜乳中抗生素残留的检验
一、实验目的
掌握鲜乳中抗生素残留检验程序、原理和判定方法。
二、实验内容
指示菌的活化、菌液制备、样品检测与结果判定。
三、实验方法
1 原理
将嗜热乳酸链球菌接种在乳汁中培养，所产生的代谢产物可使TTC还原变成红。
如果样品乳中残留的抗生素的量足以抑制嗜热乳酸链球菌的生长，则乳样颜不变。
如果样品乳中无抗生素残留，或残留量不足以抑制嗜热乳酸链球菌的生长繁殖，则乳样变为红或微红。
2 仪器与试剂
2.1 水浴锅、恒温箱、100℃温度计、试管架。
2.2 灭菌吸管：1mL、10mL。
2.3 灭菌试管：15mm×150mm。
2.4 菌种：嗜热乳酸链球菌。
2.5 脱脂乳：经113℃灭菌20min。
2.6 4% 2，3，5－氯化三苯四氮唑(TTC)水溶液：称取1gTTC，溶于5mL灭菌蒸馏水中，
装褐瓶内于7℃冰箱保存，临用时用灭菌蒸馏水稀释至5倍。如遇溶液变为玉或淡褐，则不能再用。
3 检验程序
鲜乳中抗生素残留检验程序如下：
4 操作步骤
4.1 菌液制备：将菌种移种脱脂乳，经36±1℃培养15h后，以灭菌脱脂乳1:1稀释待用。
4.2 检测：取检样9mL，置15mm×150mm试管内，80℃水浴加热5min冷却37℃以下，加菌液1mL，36±1℃水浴培养2h，加TTC 0.3mL，36±1℃水浴培养30min，观察如为阳性，再于水浴中培养30min作第二次观察，每份检样作二份，另外再作阴性和阳性对照各一份，阳性对照管用无抗生素的乳8mL加抗生素及菌液和TTC。阴性对照管用无抗生素乳9mL加菌液和TTC。
4.3 判断方法：准确培养30min观察结果，如为阳性，再继续培养30min作第二次观察。乳中有抗生素存在，则检样中虽加入菌液培养物，但因细菌的繁殖受到抑制，因此指示剂TTC不还原，不显。与此相反，如果没有抗生素存在，则加入菌液即行增殖，TTC被还原而显红，也就是说检样呈乳的原时为阳性，呈红为阴性。
四、实验要点
观察结果时要迅速，避免光照过久发生干扰。
实验四 动物性食品中亚硝酸盐含量的测定
一、实验目的
掌握测定动物性食品中亚硝酸盐的原理与试剂作用；掌握分光光度法操作程序与实验要点。
二、实验内容
用分光光度法测定动物性食品中亚硝酸盐含量。
三、实验方法
1 原理
样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红染料，与标准比较定量。
2 试剂
实验用水为蒸馏水，试剂不加说明者，均为分析纯试剂。
2.1 亚铁溶液：称取106.0g亚铁，用水溶解，并稀释至1000mL。
2.2 乙酸锌溶液：称取220.0g乙酸锌，加30mL冰乙酸溶于水，并稀释至1000 mL。
2.3 饱和硼砂溶液：称取5.0g硼砂钠，溶于100mL热水中，冷却后备用。
2.4 对氨基苯磺酸溶液(4g/L)：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100mL 20%的盐酸中，置棕瓶中混匀，避光保存。
2.5 盐酸萘乙二胺溶液(2g/L)：称取0.2g盐酸萘乙二胺，溶于100mL水中，置棕瓶中，避光保存。
2.6 亚硝酸钠标准溶液：准确称取100.0mg于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入500mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，在4℃避光保存。此溶液每毫升相当于200μg的亚硝酸钠。
2.7 亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液2.500mL，置于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5.0μg亚硝酸钠。
3 仪器
小型粉碎机，分光光度计。
4 操作步骤
4.1 样品处理
称取约2g经绞碎混匀样品，置于50mL烧杯中，加饱和硼砂溶液5mL，混匀，以70℃左右的水约100mL，将样品全部洗入200mL容量瓶内，置沸水浴中加热15min混匀，取出后冷至室温，然后一面转动，一面加入2mL亚铁溶液，摇匀，再加入2mL 乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。加水至刻度，摇匀，放置0.5h，除去上层脂肪，用滤纸过滤，弃去初滤液10mL，收集滤液备用。
4.2 测定
4.2.1 亚硝酸盐标准曲线的制备：吸取0，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0mL亚硝酸钠标准使用液(相当于0，2.0，4.0，6.0，8.0，10μg亚硝酸钠)，分别置于50mL带塞比管中。于标准
职教通讯
管中分别加入2mL对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3～5min后加入盐酸萘乙二胺溶液1mL，加水至刻度，混匀，在暗处静置15min，用2cm比杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线。
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议