傅建敏;梁晋军;周道顺
【摘 要】渔趣网
柿叶为我国传统中药材.为满足现代生物医药发展需求,对柿叶有效成分种类及其提取、分离和检测方法,以及药理作用研究进展进行了综述.柿叶的主要成分包含机酸类、黄酮类、三萜类、多酚类、挥发性成分、脂肪酸、香豆素类、植物甾醇、多糖以及胡萝卜素等,其医疗保健作用主要有心脑血管疾病、抗氧化、抗癌、活血止血、抗菌、解热、抗老化、防晒等.综合上述内容,认为今后应加强不同种类柿资源叶片有效成分含量的遗传变异和时空变化等应用基础研究,并在此基础上培育有效成分含量高的叶用柿良种及原料林,从而为相关产业的可持续发展提供技术支撑和资源保障. 【期刊名称】《中南林业科技大学学报》
【年(卷),期】2013(033)011
【总页数】7页(P66-72)
【关键词】柿叶;有效成分;药理作用;提取分离技术;良种
【作 者】脚误傅建敏;梁晋军;周道顺
【作者单位】国家林业局泡桐研究开发中心,河南郑州450003;中国林业科学研究院经济林研究开发中心,河南郑州450003;国家林业局泡桐研究开发中心,河南郑州450003;中国林业科学研究院经济林研究开发中心,河南郑州450003;国家林业局泡桐研究开发中心,河南郑州450003;中国林业科学研究院经济林研究开发中心,河南郑州450003
【正文语种】中 文
【中图分类】汽轮机技术S794.9;S718.43
柿Diospyros kaki 属柿科Ebenaceae柿属Diospyros植物，广泛分布在热带、亚热带和温带地区[1]。中国、日本、韩国、西班牙、美国等为主要栽培国家，其中中国在柿栽培面积和产量上均居世界第一位。柿树的果实既可食用又可药用，并且所含单宁有许多工业用途，而柿叶、柿蒂、柿花则是我国传统中药，因而柿为具有很高价值的著名经济林树种[2]。
柿叶入药最早见于明《滇南本草》，其中记载“经霜叶敷臃疮”，《本草再新》中记载，柿果可以“治咳嗽吐血，止渴生津”。古代典籍及本文所述柿叶可扩展至柿及其近缘种君迁子
、油柿、美洲柿等柿属资源的叶片。自古以来，柿叶多以自然风干的原始状态陈列在中药市场，尤以中、日、韩三国最为普遍，鲜见有柿叶加工产品，这是由于受化学成分提取技术所限。随着现代生物和制药技术的飞速发展，对柿叶药用和食用价值得到进一步开发。20世纪30年代，日本开发制作了柿叶茶等以柿叶为材料的多种功能性饮品，畅销至今；2011年，由单味药柿叶的提取物制成的处方药“脑心清片” 在中国得到大力推广，并获得澳大利亚TGA成功列册，它是由广州白云山和记黄埔中药有限公司经多年临床研究而开发的新药。伊格尔顿
柿叶有效成分主要包括维生素C等有机酸类、黄酮类、齐墩果酸和熊果酸等三萜类、多酚类、挥发性成分、多糖、植物甾醇、脂肪酸、香豆素类以及胡萝卜素等化学成分（见表1）。常见的有效成分提取纯化方法主要有溶剂提取技术、大孔树脂吸附技术、超临界萃取技术、超声提取技术和高速逆流谱法（HSCCC）；成分检测方法主要采用滴定法、紫外-可见吸光光谱法（UV-VIS）、高效液相谱法（HPLC）、Folin-Ciocalte法和气相谱法（GC）等。
1.1.1 维生素C
维生素C即L-抗坏血酸，是人类和其他高等灵长类动物必需但又不能在体内合成的营养素，是植物维生素类营养评价的标志性成分。柿叶是几乎所有植物叶片中维生素C含量是最高的。1942年，C.G.Vinaon等[3]首次测定新鲜柿叶中VC的含量为2 723.75 mg/100 g，是柿果含量约10倍；苹果的65倍，柑橘的52倍，猕猴桃的49倍；1987年，佘祥威等[5]测定了不同柿品种的叶片VC含量高达2 500 mg/100 g；2004年费学谦[6]等从15个柿栽培品种和5个柿属野生种叶中发现VC含量最高的是野生种类，达1 503 mg/100 g；2008年，卢涛等[7]从75份柿资源叶片中发现，VC含量最高的是美洲柿2 554.03 mg/g，最低的是野生种类704.56 mg/g。从以上检测中，可以看出柿叶VC含量虽高，但具体测定结果有明显差异，甚至互相矛盾，这可能是由于试验材料、取材时间及部位以及和检测方法的不同所致。但有关不同试验材料和取材时间及部位对含量的影响未见更多详细的研究报道。
血氧探头VC含量的常用检测方法有滴定法(GB/T 5009.86)、光度法、高效液相谱法[6]等。目前国内维生素C含量测定仍以光度法为主流,但近年来谱法,特别是HPLC法上升趋势尤为明显。这是由于滴定法主要检测还原型抗坏血酸；光度法和谱法检测总抗坏血酸含量，且更为准确快速。柿叶VC提取方法主要采用溶剂提取技术和超声提取技术。
1.1.2 其它有机酸成分
柿叶中的有机酸包括琥珀酸、苯甲酸、水杨酸等[8]。张吉祥等[9]利用单柱阴离子交换谱法，检测出柿叶琥珀酸和苹果酸含量分别为4.14 mg/g和4.29 mg/g。
黄酮类化合物是柿叶的主要有效成分之一，是一类广泛存在于自然界的、具有2-苯基原酮（flavone）基本结构母核结构的化合物，因其结构上常带有羟基，故黄酮类化合物也属于酚类化合物。王婧杰等[10]采用响应面法优化超声波辅助提取黄酮。陈学泽等[11]通过大孔吸附树脂对总黄酮进行分离纯化。在柿叶中，目前已发现的黄酮类化合物有槲皮素(quercetin)、山萘酚(Kaemferol)等[12]。2008年，王丽峰等[13]测定黄酮类物质均值为芦丁：0.255 mg/g；金丝桃苷：1.074 mg/g；槲皮素：0.428 mg/g，柿叶与连翘相比，柿叶中槲皮素和金丝桃苷含量分别是0.428 mg/g和1.074 mg/g，是连翘的2.97倍和3.31倍。
柿叶黄酮提取方法主要采用溶剂提取法、超声波[14]、大孔树脂[15]和超临界萃取[16]。总黄酮含量的测定主要采用紫外-可见吸光光谱法（UVVis）和高效液相谱法（HPLC），严铸云等[17]和刘绍雄等[18]都采用测定黄酮的吸光度来测定黄酮的含量；而孙化鹏等[19]利用高速逆流谱法和制备型高效液相谱法分离制备柿叶黄酮化合物并进行初步结构鉴定。目前，测定总黄酮含量仍以紫外-可见吸光光谱法为主流，但随着谱技术的改良提升，谱技术的应用更趋广泛。
三萜类化合物是由数个异戊二烯单位首尾相连构成的化合物。柿叶中的三萜类化合物有齐墩果酸、乌苏醇、等[20-21]。1989年，张登科等[22]从35种不同植物样品中检测出柿叶齐墩果酸含量为0.22%，为人参（0.44%）含量的1/2，与西洋参（0.21%）相当。2008年，王丽峰等[13]检测出柿叶含齐墩果酸2.531 mg/g，熊果酸4.267 mg/g，分别是连翘的0.73倍和1.97倍。
柿叶中三萜类提取方法主要采用溶剂提取法和超声提取法[14]。三萜类的测定方法主要采用薄层层析和HPLC，张登科等[22]以薄层层析测35种不同植物样品，Jie-Ping Fan等[23]通过HPLC评估出三种具有生物活性的三萜酸类。随着谱技术的发展，研究者们已经很少使用薄层层析，以HPLC为代表的谱技术成为测定三萜类的主流方法。
柿子中富含多酚类化合物，其中导致柿涩味的单宁也属于多酚类化合物。费学谦等[6]研究表明浙江柿叶中含有没食子酸、肉桂酸、咖啡酸、香豆酸、绿原酸、原儿茶酸、阿魏酸、丁香，其含量（FW）分别为1.31、0.57、0.28、0.27、0.11、0.08、0.03、0.03 mg/g。苏冬梅等[24]研究表明采用不同的光照和温度对叶片进行预处理可能导致其总酚含量的变化。
柿叶中多酚提取方法主要是溶剂提取技术和大孔树脂技术[25]。多酚类的测定方法主要采用UV-Vis和 HPLC，You-Lin Xue等 [26]采 用 Folin-Ciocalteu试剂法测定总多酚含量外，还通过反相HPLC获得了7种多酚成分。目前常见的测定总多酚的方法是UV-Vis，但HPLC法也被研究者们应用。
泡花碱柿叶挥发成分主要是一些醛和醇类物质，这些物质无毒，可作为香料和药材。柿叶挥发成分以(E)-2-己烯醛(42.22%)和3,7,11,15-四甲基-2-十六烯-1-醇(17.82%)等为主[27]。
柿叶挥发成分的提取方法主要采用溶剂提取法和CO2超临界萃取技术[28]。柿叶挥发成分的分离测定方法主要采用气相谱-质谱联用(GC-MS)方法，因为GC适用于分离分子量小，热稳定性好，沸点低的物质，所以柿叶挥发成分最适宜用GC-MS法测定。
脂肪酸多存在于食用油中，其中不饱和脂肪酸对人体益处很大。柿叶中的不饱和酸（油酸）含量占到柿叶总脂肪酸含量的五分之一。柿叶脂肪酸以棕榈酸(30.00%)、十八碳一烯酸（油酸）(22.22%)等为主[29]。脂肪酸先要用NaOH-CH3OH交换法处理，使其甲酯化，目的是使沸点降低，利于进行GC测定。
香豆素(cornn arin)是具有苯骈a-吡喃酮母核的一类天然化合物的总称。周法兴等[8]从广西产柿叶所含酚酸性部位中分离得到两种香豆素类化合物: 6-羟基-7-甲氧基香豆素和莨蓉亭(6-甲氧基-7-羟基香豆素)，并且它们是一对同分异构体。柿叶香豆素的提取、分离和检测方法几乎没有文献可以参考。
柿叶中提取分离出的植物甾醇主要有油菜甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇[30]。植物甾醇的理化性质主要表现为疏水性，但因其结构上带有羟基，因而又具有亲水性。
多糖（polysaccharide）是由糖苷键结合的糖链，至少要超过10个以上的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物。多糖具有免疫调节等功效，因此被广泛地用于医疗和保健行业。Jinyou Duan等[31]提取柿叶果胶多糖，得到它的结构包括鼠李糖，阿拉伯糖，半乳糖，木糖和半乳糖醛酸单位。柿叶多糖的提取方法主要采用水提醇沉法和超声波技术[32]。柿叶多糖含量的测定方法主要是苯酚-硫酸比法[18]。
β-胡萝卜素具有抗氧化活性，人体吸收后可转化成维生素A，是目前最安全补充维生素A的产品（单纯补充化学合成维生素A，过量会使人中毒）。柿叶β-胡萝卜素提取方法主要采用超声波提取技术[33]。柿叶β-胡萝卜素测定方法主要是分光光度法。
除了上述化学成分之外，柿叶中还含有隐黄素、纤维素、木质素、半纤维素等物质，其中纤维素含量高达68.28%、半纤维素含量是7.54%、木质素含量是11.70%[34]。此外，柿叶中粗蛋白含量为13.38%、粗纤维10.94%、粗脂肪含量为3.34%、含钙0.42%、含磷0.09%[35]。
柿叶能增加心脏冠状动脉血流量，增强血液循环，对急性心肌缺血具有保护作用[36]，由此可知，柿叶对心脑血管疾病有显著的作用。
柿叶黄酮对缺氧复氧和晚期糖基化终产物（AGEs）[37-38]和晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products，AOPP)[39-42]诱导的心肌细胞凋亡均有明显的抑制作用。此外，多酚也可促使血管通畅，并有效地防止高血压等心血管疾病[43]。鉴于柿叶的以上药理作用，其开发利用程度有待进一步加强[38]。
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