ghtt班级:生科09级03班 姓名:高山山 学号:200900140024
1)实验目的
了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细胞的速度。
2)实验原理
将红细胞放入数种等渗溶液中,由于红细胞对各种溶质的透性不同,有的溶质可以深入,有的溶质不能渗入,渗入的溶质能够提高红细胞的渗透性,所以促进水分进入细胞,引起溶血。由于溶质渗入速度互不相同,因此溶血时间也不相同。 3)实验用品
1、器材
50ml小烧杯、吸管、试管7支,试管架
2、试剂
0.0085% NaOH溶液、0.85%NaOH溶液、0.8mol/L甲醇溶液甘油、0.8mol/L甘油溶液、0.6%葡萄糖溶液、2%TritonX-100溶液
4)实验方法及现象
1、取鸡血2-3ml,加0.85%NaCl溶液4ml,在1000r/min条件下离心5min。
2、将上述离心的红细胞按沉淀配制成50%浓度。
3、在试管中依次加入低渗溶液3ml,鸡血溶液1滴,分别在阳光与电镜下观察结果。 表一 试管中所加试剂及编号
试管编号 | 所加试剂 |
1号 | 0.85%NaCl溶液 |
2号 | 0.0085%NaCl溶液 |
3号 | 0.8mol/L甲醇溶液 |
4号 | 0.8mol/L甘油溶液 |
5号 | 0.6%葡萄糖溶液 |
6号 | 2%TritonX-100溶液 |
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4)实验结果:
1)不同低渗溶液下的溶血情况及结果分析
表二 不同低渗溶液下的溶血现象
试管编号 | 是否溶血 | 时间 | 结果分析 |
0.85%NaCl溶液 | 否 | 1h | 与细胞内浓度相当,不发生溶血 |
0.0085%NaCl溶液 | 是 | 11min输油管线 | 低渗溶液,细胞吸水胀裂 |
0.8mol/L甲醇溶液 | 是 | 40s参与式教学 | 甲醇分子较小,且脂溶性强,进入细胞内速度较快 |
0.8mol/L甘油溶液 | 否 | 1h | 甘油脂溶性强,但分子较大,进入细胞较慢 |
0.6%葡萄糖溶液 | 否 | 1h | 分子较大,进入细胞速度较慢 |
2%TritonX-100溶液 | 是 | 6min | 使细胞通透性发生改变,使其进入细胞速度较快;可抽取膜质蛋白质,故溶液变浑浊 |
为了饮食安全 | | | |
2)在阳光及电镜下的不同低渗溶液溶血现象的观察结果图片。 0.85%NaCl 溶液,未发生溶血。 0.85%NaCl溶液未发生溶血,0.0085%NaCl发生溶血
skull-3>平南生活网2%TritonX-100
0.85%NaCl
甲醇
0.85%NaCl
甲醇易透过细胞膜,使细胞快速发生溶血。 2%TritonX-100溶液发生溶血,溶液混浊。 葡萄糖溶液未使细胞发生溶血。 甘油溶液未使细胞发生溶血
电镜下0.85%NaCl溶液中细胞,无溶血现象。 葡萄糖溶液中细胞,无溶血现象。
5)实验总结:
1)细胞膜对各种分子的透性不同。一般来说,脂溶性强,小分子易透过细胞膜;而水溶性强,大分子,离子等,不易通过细胞膜。
2)细胞的溶血时间与溶质分子渗入细胞的速度成正比例关系。
3)在做甲醇以及低渗浓度NaCl的电镜观察时,因对显微镜的操作不熟练,没有观察到其溶血细胞,以后应加强练习。
6)注意事项:
1)在做甲醇+鸡血溶液的电镜观察时,动作要快,否则会因细胞溶血过快,而无法观察到溶血细胞。
2)实验过程中,比如甲醇溶血过快,可多加入几滴的鸡血溶液,以延长起反应时间,以利于观察过程。
3)在做0.0085%NaCl溶液、2%TritonX-100溶液、0.8mol/L甲醇溶液+鸡血溶液的电镜观察时,应现做现配,以防细胞溶血观察不到溶血现象。