作详解
文稿归稿存档编号：[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-
高效液相谱
the scarlet letter我国药典收载高效液相谱法项目和数量比较表：
鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多，因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。
I．概论
一、液相谱理论发展简况
谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为层法、层析法。 待业青年
谱法最早是由俄国植物学家茨维特（Tswett）在1906年研究用碳酸钙分离植物素时发现的，谱法(Chromatography)因之得名。后来在此基础上发展出纸谱法、薄层谱法、气相谱法、液相谱法。
花儿为什么这样香
rbw液相谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为经典液相谱法，此方法柱效低、时间长（常有几个小时）。高效液相谱法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在经典液相谱法的基础上，于60年代后期引入了气相谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相谱法(High Pressure Liquid Chromatography，HPLC)。又因分析速度快而称为高速液相谱法(High Speed Liquid Chromatography，HSLP)。也称现代液相谱。
二、HPLC的特点和优点
HPLC有以下特点：
高压——压力可达150~300 Kg/cm2。谱柱每米降压为75 Kg/cm2以上。
高速——流速为0.1~10.0 ml/min。
高效——可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。
高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。
HPLC与经典液相谱相比有以下优点：
速度快——通常分析一个样品在15~30 min，有些样品甚至在5 min内即可完成。
分辨率高——可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。
灵敏度高——紫外检测器可达0.01ng，荧光和电化学检测器可达0.1pg。
柱子可反复使用——用一根谱柱可分离不同的化合物。
样品量少，容易回收——样品经过谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。
三、谱法分类
按两相的物理状态可分为：气相谱法(GC)和液相谱法(LC)。气相谱法适用于分离挥发性化合物。GC根据固定相不同又可分为气固谱法(GSC)和气液谱法(GLC)，其中以GLC应用最广。液相谱法适用于分离低挥发性或非挥发性、热稳定性差的物质。LC同样可分为液固谱法(LSC)和液液谱法(LLC)。此外还有超临界流体谱法(SFC)，它以
），超临界流体（界于气体和液体之间的一种物相）为流动相（常用CO
2赣语
因其扩散系数大，能很快达到平衡，故分析时间短，特别适用于手性化合物的拆分。
按原理分为吸附谱法(AC)、分配谱法(DC)、离子交换谱法(IEC)、排阻谱法(EC，又称分子筛、凝胶过滤(GFC)、凝胶渗透谱法(GPC）和亲和谱法。（此外还有电泳。）
按操作形式可分为纸谱法(PC)、薄层谱法(TLC)、柱谱法。
四、谱分离原理
小麻豆
高效液相谱法按分离机制的不同分为液固吸附谱法、液液分配谱法（正相与反相）、离子交换谱法、离子对谱法及分子排阻谱法。
1．液固谱法使用固体吸附剂，被分离组分在谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附－解吸附的平衡过程。常用的吸附剂为硅胶或氧化铝，粒度5~10μm。适用于分离分子量200~1000的组分，大多数用于非离子型化合物，离子型化合物易产生拖尾。常用于分离同分异构体。
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议