实验十 污染物的定量分析 ——分光光度计的使用（二） 高强钢
小演奏家一、目的要求
1、掌握Beer —Lambert 定律的原理和应用方法。
2、练习分光光度计的使用方法。
1、Beer—Lambert 定律
（1）一束平行光照射至溶液时、一部分光被吸收、一部分光可透过该溶液、不同物质光的吸收程度是不同的。物质对单光吸收的强弱以及溶液浓度与也曾厚度的关系，服从物质对光吸收的定量定律，即Beer —Lambert 定律，其表达式为： A ＝KCL 或Lg I 0/I ＝KCL A 为吸光度，T 为透光度，即I/I0，A 和T 是负对数的关系。吸收系数K 实际上式物质在单位浓度和单位厚度下对入射光的吸光度，在一定波长下，K 越大，表示物质对光的吸收越强。
（2）Beer —Lambert 定律的含义为一束单光通过溶液解质后，光能被吸收的程度与溶液的浓度和厚度成正比。如果实验中的厚度不变，则A ＝KC 。 2、标准曲线法
配制一系列已知不同浓度的测定物溶液，按一定方法显后，分别用分光光度计测得吸光度。以吸光度为纵座标、浓度为横座标，绘制A —C 曲线，即标准曲线。在相同条件下，测定被测溶液得吸光度，从标准曲线上可出相应的浓度。标准曲线制作与测定管的测定应在同一仪器上进行。
x
天弩无人机
A
A x
标准曲线
3、分光光度法测定铁含量
苯丙氨酸
国榷在 pH=9～11.5 的 NH3.H2O-NH4Cl 溶液中，Fe3+与磺基水杨酸反应生成组成比1:3的黄稳定配合物。通过标准曲线法，可以求出待测液中铁的含量。
三、实验仪器药品
1、721分光光度计、移液管、容量瓶、比皿
2、铁标准液100mg/L、10%NH4Cl 、2%磺基水杨酸、氨水（1+10）
四、实验步骤
取50mL容量瓶，按下表配制系列溶液。以试剂空白作参比溶液，在420 nm波长下测定各溶液的吸光度，铁标准溶液浓度为100mg/l。
哭泣的圆明园表10-1 数据记录表
序号1(参比)23456待测液
铁标准液体积/m L0.002.004.006.008.0010.0010.00 10%N H4C l/m L4.00
2%磺基水杨酸/m L2.00
氨水（1+10）/m L滴加至溶液变黄后再多加4.00m L 定容至/m L50505050505050
吸光度A
C（m g·L-1）
五、数据处理
1、以吸光度为纵坐标, 铁含量为横坐标, 绘制工作曲线。由工作曲线确定待测溶液的含量。
六、创新思考
1、吸光度曲线和标准曲线的含义分别是什么？有何不同？
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