常用pH缓冲溶液的配制和pH值

（一）溶液配制注意事项

1．药品要有较好的质量试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteedreagent，G．R．）、分析试剂（Antalyticalreagent，A．R．）化学纯（Chemicalpure，C．P．）和实验试剂（Laboratoryreagent，L．R．）等等。工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。

2．药品称量要精确。

3．配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH在~之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。

４．配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。

（二）（1/15）Mol/L磷酸缓冲液

1．1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A．R．）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1000ml）。

2．１/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，.）9.47g（或者Na2HPO4·2H2O11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1000ml）。3．按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液。

附表1磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升）

pH1/15Mol/LNa2HPO41/15Mol/LKH2PO4pH1/15Mol/LNa2HPO41/15Mol/

LKH2PO4

（三）LPB液

附表2LPB液配制法

pHLNa2HPO4（ml）LNaH2PO4（ml）

Na2HPO4·2H2O分子量=L溶液含26.7g/L。Na2HPO4·12H2O分子量=L溶液含53.7g/L。NaH2PO4·H2O分子量=L溶液含20.7g/L。NaH2PO4·2H2O分子量=L溶液含23.4g/L。（四）LPB缓冲液

附表3LPB缓冲液配制法

pHMol/LNa2HPO4（ml）LNaH2PO4（ml）

LNa2HPO4·2H2O溶液35.61g/L

Na2HPO4·12H2O溶液含71.64g/L

LNaH2PO4·H2O溶液含27.60g/L

NaH2PO4·2H2O溶液含31.21g/L

欲配LPB缓冲液则在LPB缓冲液的基础上加H2O稀释1倍即可。欲配制PBS液时，则在溶液中加％的NaCl溶液即可。

（五）无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）

（LPH）

NaCl8.0g

KCl0.2g

Na2HPO41.15g

（如为Na2HPO4·12H2O，则为2.89g）

KH2PO40.2g

将上述试剂依次溶于1000ml去离子水中，完全溶解后，115℃高压灭菌10min~15min，存在4℃冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。谋杀章鱼保罗

（六）硼酸盐缓冲液（Boratesalinebuffer）文章来自：医药园整理：zfg

1．硼酸（Ｈ3BO3）

L硼酸：硼酸12.37g加水至1000ml。

2．硼砂（Na2B4O7）

L硼砂：硼砂19.07g加水至1000ml。

附表4不同pH的L硼酸缓冲液配制法

pHL硼砂（ml）L硼酸（ml）pHL硼砂（ml）L硼酸（ml）

（七）缓冲液

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1．离子强度L缓冲液

钠47.6g

蒸馏水3000ml

HCl

（NHCl=193ml浓HCl加1807ml蒸馏水）

⑴将4.76g钠溶于3000ml蒸馏水。

⑵加NHCl55ml。

⑶用HCl调节pH到，并加蒸馏水至4265ml。

2．L缓冲液

1.84g

钠10.30g

加蒸馏水至1

3．L缓冲液

1.66g

钠12.76g

加蒸馏水1

（八）L醋酸盐缓冲液见表附表5

炎症因子附表5L醋酸盐缓冲液配制法

pHL

Tris（ml）L

HCl（ml）pHL

Tris（ml）L

HCl（ml）

23℃37℃23℃37℃

25525

2525

（九）三羟甲基甲烷—盐酸缓冲液（Tris—HCl缓冲液）

不同pH，L

L三羟甲基氨基甲烷加х，加水稀释至100ml（见下表）附表6Tris—HCl缓冲液配制法

pHL

Tris(ml)

(ml)pHL

Tris(ml)

(ml)

23℃37℃23℃37℃

25525

2525

三羟甲基氨基甲烷（Tris）

分子量=

L三羟甲基氨基甲烷：Tris24.23g，加水至1000ml。

：取，加水至1000ml。

（十）L碳酸盐缓冲液

NaHCO33.70g

Na2CO30.60g

溶于蒸馏水中即得。

不用时塞紧瓶塞，以免吸收空气中二氧化碳使PH下降。最好小量配制。

（十一）甘油磷酸缓冲液

1．配制磷酸缓冲液

LNa2HPO4

NaH2PO4

混合即可

2．9份甘油与1份磷酸缓冲液混合，即为甘油磷酸缓冲液。

用途：用于免疫荧光试验。

（十二）Hank’s液

1．贮存液

NaCl80.00g

KCl4.00g

Na2HPO4·12H2O1.52g

KH2PO40.60g

葡萄糖4.00g

％酚红液

中国免疫学杂志双馏水加至

115℃高压灭菌15min，冰冻保存。

2．工作液

as if 用法贮存液1份

双馏水9份

abei115℃高压灭菌15min。临用时用灭菌的％NaHCO3液调pH值至左右（溶液呈橙红）。

（十三）萘（钠）氏试剂（Nessler’sreagent）

配方1：6.0g

碘化钾12.4g

20％NaOH30ml

加蒸馏水至100ml

配方2：11.5g

碘化钾8g

蒸馏水50ml

（完全溶解后）过滤，加20％NaOH50ml。

用途：检测溶液中氨离子。

（十四）阿氏（Alsever’s）液

葡萄糖2.05g

柠檬酸钠0.80g

氯化钠0.42g

蒸馏水100ml

溶解后，以10%柠檬酸调节pH至，过滤，分装，10磅10min灭菌，4℃保存。

（十五）青、链霉素混合液（简称S．P．液或双抗液）

青霉素（40万U）5支

链霉素（200万μg）1支

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