PBS缓冲液的配制方法

PBS缓冲液配方
不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。
我们实验室的配方:
A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:
磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。亲戚聚会发言图
B液:0.1mol/L磷酸氢二钠:
酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。
pH -- A液 (ml) -- B液(ml)
5.60 -- 9.50 -- 0.25
5.91 -- 9.00 -- 1.00
6.24 -- 8.00 -- 2.00
6.47 -- 7.00 -- 3.00
6.64 -- 6.00 -- 4.00
6.81 -- 5.00 -- 5.00
svd
6.98 -- 4.00 -- 6.00
7.17 -- 3.00 -- 7.00
7.38 -- 2.00 -- 8.00
7.73 -- 1.00 -- 9.00
8.04 -- 0.50 -- 9.50
一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)
NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl
用于细胞培养的PBS需含有氯化钾
称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可0.01M
PBS缓冲液
称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。以下是我的总结: 
母液的配制: 
0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水
0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水
各种浓度PB(pH=7.4)的配制:
先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
顺势疗法
然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可,如:
0.1M PB(PH=7.4) :取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。 
若需要 NaCL 的话,加入 NaCL 至0.9%(g/100ml)即可。 
另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方 :
pH       0.2M NaH2PO4(ml)   0.2M Na2HPO4(ml)
5.7             93.5                          6.5
5.8             92                             8           
5.9             90                             10
6.0             87.7                          12.3
6.1             85                             15
6.2             81.5                          18.5
6.3             77.5                          22.5
载体构建6.4             73.5                          26.5
6.5             68.5                          31.5
6.6             62.5                          37.5
6.7             56.5                          43.5
6.8             51                            49
西湖的绿
6.9              45                           55
7.0              38                           62
7.1              33                           67
7.2             28                            72
7.3              23                           77
7.4              19ml                         81ml
7.5              16                           84
7.6              13                           87
7.7             10.5                          0.5
7.8              8.5                          91.5
7.9             7                              93
8.0             5.3                           94.7 
磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB),磷酸氢二钠和磷酸二氢钠缓冲液配方
磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB)
十二烷基磺酸钠
试剂: NaH2PO4·2H2O    Na2HPO4·12H2O
配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
(1)0.2mol/L的 Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(2)0.2mol/L的 Na2HPO4:称取NaHPO4.·12H2O 71.632g(或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。若pH偏高或偏低,
可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。
0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)
pH  0.2mol/L NaH2PO4(ml)  0.2mol/L Na2HPO4(ml)
5.7          93.5                      6.5
5.8          92.0                      8.0
5.9          90.0                    10.0
6.0          87.7                    12.3
6.1          85.0                    15.0
6.2          81.5                    18.5

本文发布于:2024-09-21 18:38:54,感谢您对本站的认可!

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