占领运动
目的：构建DEC1真核表达载体pEGFP-N1-DEC1，探讨DEC1基因对乳腺癌细胞增殖的影响及可能机制。方法：提取人乳腺癌癌细胞MCF-7总RNA，扩增获得DEEl基因，将DEC1基因插入真核表达质粒pEGFP-N1，将成功构建的pEGFP-NI-DEC1及pEGFP-N1质粒利用PEI转染MCF-7细胞，并通过G418筛选得到稳定转染细胞系。通过Western hlot检测转染前后细胞DEE1、CyclinD1蛋白表达水平；MTT法检测转染前后MCF-7细胞增殖的变化。结果：成功构建DECl真核表达载体pEGFP-NI-DtR21；与pEGFP-N1组和空白对照组相比，pEGFP-N1-DEC1组DEC1表达明显增高（P＜0.05）；cyclin D1的表达明显降低（P＜0.05）；pEGFP-N1-DEC1组细胞增殖能力明显受到抑制。结论：过表达DEC1可抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖，DEC1可能通过下调cyclin D1基因的表达从而阻止细胞周期及TGF-β信号通路而发挥作用。
标签：DEC1；乳腺癌；细胞增殖
分化型胚胎软骨发育基因1（DEC1），是一类含碱性螺旋-环-螺旋结构域的转录因子，广泛表达于多种正常组织。近年来研究发现，DEC1在很多肿瘤如结肠癌、食管癌、肺腺癌、神
经胶质瘤、肾癌中高表达，可调控肿瘤生长、凋亡相关因子的表达等。本研究即探究DEC1基因过表达对乳腺癌细胞增殖的影响及可能机制。
李博祥1材料与方法
1.1材料
大肠杆菌DH5α菌株、真核表达质粒pEGFP-N1均由本实验室保存；限制性核酸内切酶Hind湖北高职学校Ⅲ日本截尾猫及EcoR Ⅰ、DNA T4连接酶购自大连Takara公司；质粒提取试剂盒，胶回收试剂盒购自上海生物工程有限公司；乳腺癌细胞MCF-7细胞株、HRP标记的羊抗兔IgG购自北京鼎国生物技术有限公司；兔抗人cyclinD1单克隆抗体购自CST公司；兔抗人DEC1单克隆抗体购自Abcam公司；ac-tin抗体购自Santa cruz公司。
沙棘真假怎样鉴别
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