1、器官培养包括离体的根、茎、叶、花器和果实的培养。以器官作为外植体进行离体培养。器官培养的意义:
陈垣全集
研究器官生长、营养代谢、生理生化、组织分化和形态建成 供应链库存管理论文
在生产实践上具有重要的应用价值,可在短期内提高繁殖速率,进行名贵品种的快速繁殖;利用茎尖培养可得到脱毒试管苗,解决品种的退化问题,提高产量和质量;
将植物器官作诱变处理,用器官培养可得到突变株,进行细胞突变育种等。 第一节营养器官的培养
一、茎尖的培养
茎尖培养是切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分,进行无菌培养。这是组织培养中用得最多的一个取材部位。
茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为微茎尖培养和普通茎尖培养。
微茎尖指带有1-2个叶原基的生长锥,其长度不超过0.5mm。
普通茎尖指较大的茎尖(如几mm到几十mm)、芽尖及侧芽。
普通茎尖培养
(1)取材: 挑选杂菌污染少,生长不久的茎尖。
(2)消毒接种: 将茎尖切成0.5-1.Ocm长
将茎尖置于流水冲洗2-4h
在75%的酒精中处理30s
在稀释20倍的次氯酸钠中浸5-8min
无菌水冲洗数次
接种
(3)接种: 为了减少污染,可在接种前再剥掉一些叶片,使茎尖为0.5cm左右大小。
(4)培养的方法和程序
①培养基多数茎尖培养采用MS作为基本培养基,常用的其他培养基有White,Heller.
培养基中生长素:2,4-D,IAA,NAA,浓度一般用0.1mg/L左右,高于此浓度,往往产生畸变芽或形成愈伤组织。
西北大学学报茎尖在培养过程中会出现生长太慢、生长太快和生长正常等三种类型。
非结构化数据管理
生长太慢:接种后茎尖不增大,只是茎尖逐渐变绿,出现绿小点,细胞逐渐老化而进人休眠状态,或者逐渐变褐死亡。
引起的原因:生长素浓度太低,或是温度过低或过高;
生长太快型是接种后茎尖迅速增大,在茎尖基部产生愈伤组织,并迅速增殖,而茎尖不伸长,久之茎尖也形成愈伤组织,从而丧失发育成苗的能力。
引起的原因:一是生长素浓度过高,引起细胞疯狂分裂而导致愈伤组织的形成。
二是光照太弱或温度太高。
生长正常型是接种后茎尖基部稍增大并形成少量愈伤组织,茎尖颜逐渐变绿,并逐渐伸长,叶原基发育成可见的小叶,进而形成小苗。
②培养条件:接种到培养基上的茎尖,置于培养室中培养,每天照光16h,照度1500-30001x,温度通常在25±2℃。
③继代培养:继代培养可用MS培养基。
④诱导生根:诱导生根通常采用1/2MS培养基。MS培养基的各种组成成分用量均减半的培养基。并加入一定的生长素类调节物质,如NAA、IBA等。
(5)移栽入土在生根培养1个月左右,新梢基部生有较浓密的不定根,长度在l0-15cm左右,就可移栽人土。
热处理脱毒
四川康定地震1、热处理法又称温法(theomtherapy)
(1)温汤浸渍处理:适用于休眠器官、剪下的接穗或种植的材料,在50C左右的温水中浸渍10min至数小时,方法简便易行,但易使材料受伤。
(2)热空气处理:热空气处理对活跃生长的茎尖效果较好,将生长的盆栽植株移人温热室(箱)内,一般在35-40℃。处理时间因植物而异,短则几十分钟,长可达数月。
三、茎尖培养脱毒
1、茎尖培养脱毒原理
感染病毒植株的体内病毒的分布并不均匀,病毒的数量随植株部位及年龄而异,越靠近茎顶端区域的病毒的感染深度越低,生长点(约0.1-1.0mm区域)则几乎不含或含病毒很少。这是因为生长点、分生组织细胞是活跃分裂的细胞,其区域内无维管束,病毒只能通过胞间连丝传递,赶不上细胞不断分裂和活跃的生长速度。
季正雄在切取茎尖时越小越好,但太小则不易成活,过大又不能保证完全除去病毒。
2、培养基
以White、Morel和MS培养基作为基本培养基,尤其是提高钾盐和铵盐的含量会有利于茎尖的生长。
提高适当浓度的生长素(0.1-0.5 mg/L)与细胞分裂素
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议