兰州百合脱毒原种球繁育技术

材料选择

选择种源明确、生长健壮、外观无病毒症状的兰州百合植株，挖取鳞茎后，选取周长≥10cm鳞茎的中层鳞片作为繁殖材料。

脱毒原原种的获得

1 培养基的制备

培养基的配制需按照NY/T 2306—2013《花卉种苗组培快繁技术规程》的要求执行。根据组培各阶段要求培养基需附加不同生长调节剂，配制3种培养基，配方见表1。

2 组培苗的获得

（1）外植体消毒

用毛笔蘸取洗洁精刷洗剥取的中层鳞片，洗净后在流水状态下冲洗2～陈露教你学滑冰3h，置于超净工作台后移入无菌瓶，倒入75%酒精消毒1min人教出版社，再用无菌水冲洗3次，每次1min；倒入0.1%HgCl₂，消毒8min，无菌水冲洗3次，每次1min，以便充分洗去残留的HgCl₂。

（2）接种

将消毒的鳞片用无菌滤纸吸干水分，沿鳞片边缘切除1mm的外围部分，选取鳞片的中部至基部，切成长×宽约1cm×1cm的小块，凸面向下平铺放入诱导培养基中，每瓶1株。将接种好的外植体置于培养室进行培养，温度24～26℃，光照12h/d，光照强度2000～3000lx。培养2周内，观察污染情况，及时将长菌材料移出培养室。

（3）诱导培养外植体

接种30d后，鳞片伤口处形成愈伤组织，将获得的愈伤组织切成0.5cm×0.5cm的团块，接种到诱导培养基，置于培养室，温度24～26℃，光照12h/d，光照强度2000～3000lx条件下培养约35d后，可获得0.5cm以上的不定芽。

3 病毒的脱除

（1）热处理

将暗培养获得的不定芽切下，转入继代培养基，置于光照培养箱，32℃适应7d，然后在光照14h/d、温度（39±1）℃，黑暗10h/d、温度（25±1）℃条件下，交替处理25d。

（2）茎尖培养

以经过热处理的组培苗为脱毒材料，选取生长正常的植株，在10～80倍解剖镜下剥取0.2～0.5mm茎尖放入诱导培养基中，每瓶接种1株，置于培养室，在25～30℃条件下暗培养2～3个月，在培养期间每隔30d转接1次，使其繁殖成无性系，单个观察培养并分留样品进行病毒检测。

（3）病毒检测

曲靖师范学院教务网络管理系统病毒的检测符合NY/T 1744—2009《切花百合脱毒种球标准》的规定。采用多重RT-PCR法对分留的样品进行百合主要病毒病的检测，包括：黄瓜花叶病毒、百合无症病毒和百合

斑驳病毒的检测，检测引物参照陈进等的引物序列。根据检测结果，保留阴性的材料为无毒种源进行扩繁，淘汰阳性材料。

4 脱毒原原种繁殖

（1）鳞茎的诱导和增殖

将茎尖培养获得的病毒检测为阴性的无毒材料转入继代培养基，进行增殖培养，置于培养室，在24～26℃条件下暗培养30～40d，将增殖生成的丛生芽分割为单株，继续转入继代培养基，每瓶接种5～6株，24～26℃条件下暗培养30～40d，可诱导出大小不等的百合小鳞茎。

（2）生根培养

居家新主张将分化出的小鳞茎转入生根培养基中进行生根培养，每瓶接种5～6株，置于培养室，24～26℃条件下暗培养，一般40～50d鳞茎直径可达0.5～1.0cm的出瓶标准。

脱毒原种球的获得内蒙古财经学院学报

1 设施条件选择

在背风向阳、排灌便利、前茬作物不为葱蒜等球茎类作物的地块建设大棚，棚上覆盖遮阳网，保证夏季棚内最高温低于25℃，门口及通风口安装防虫网。

2 种植前准备

（1）基质配制和消毒

按草炭∶珍珠岩∶河沙＝2∶1∶1的体积比例混匀基质，然后用40%福尔马林50倍液均匀喷洒配制好的基质进行消毒，喷洒完毕后用塑料薄膜覆盖24h，然后揭膜风干2周左右，以消除残留药物危害。

（2）栽植床准备

李培生棚内建造栽植床，床面宽100～120cm，床高140～150cm，床深15～30cm，2床间留距离25～30cm的操作通道。

（3）种植前材料处理

将达到出瓶标准的脱毒原原种整瓶放入4℃低温冷藏室，暗培养60～70d，用以打破休眠。种植前选择生长健壮、根系发达的小鳞茎整瓶放入温度15～20℃的棚室内，打开瓶盖后炼苗3d，然后将鳞茎从瓶内取出，立即清洗并尽快种植。

3 种植

将基质平铺于栽植床，厚度8～12cm，将鳞茎按照100～120个/m2的密度种植，种植后覆盖基质1～2cm，然后浇透定根水。

本文发布于:2024-09-21 18:50:43，感谢您对本站的认可！

本文链接：https://www.17tex.com/xueshu/389181.html

上一篇：脱毒马铃薯种薯繁育技术规程

下一篇：百合致病病毒及脱毒技术研究进展

标签：培养培养基鳞片

留言与评论（共有 0 条评论）