组培实验室是生命科学及相关学科实验室建设中必备的实验室。组培实验室的消毒是实验室日常管理工作的重要环节，直接关系着组培实验的成功与否和组培幼苗的质量高低。组培实验室的消毒一般又可分为环境消毒、培养基消毒和外植体的消毒。培养基的消毒主要是在高压灭菌锅中进行，在此不再赘述。环境消毒和外植体的消毒则有多种方法，这些方法各有优劣，使用不当时还会对人体产生伤害，为此，笔者特对这些典型方法进行分析比较，为组培实验室的科学管理提供一些参考。 1 组培实验室的环境消毒
保持组培实验室的空气清洁度是减少组培污染的重要条件，用于实验室消毒的常规消毒方法包括紫外线照射法、甲醛熏蒸法、新洁尔灭(苯扎溴铵溶液)法等，比较新的方法有中草药消毒法。
1.1 紫外线照射法
紫外线是波长在10-400 nm之间辐射光的总称，能引起细菌、病毒等微生物遗传物质的结构 发生变化，从而影响DNA复制、RNA转录和蛋白质的翻译，导致病菌或病毒死亡。此外，紫外线辐射所产生的臭氧和各种自由基可损伤蛋白质和酶分子，导致功能改变。紫外线消毒具有广谱性，可杀灭细菌、病毒、真菌、支原体等各种微生物。紫外消毒具有较高的杀菌效率，且由于未使用化学药剂，消毒过程中不会产生对人体和环境有害的副产物。该技术运行维护简单，费用较低。采用室内悬吊式紫外线消毒时，室内安装紫外消毒灯的数量为每平方不少于1. 5 W，照射时间不少于30 min。但需要指出的是，过量的紫外线照射对人体有一定的危害乃至致癌作用。紫外线作用于中枢神经系统，可出现头痛、头晕、体温升高等症状。过量辐射会诱发皮肤癌。紫外辐射对眼睛的损伤特别明显，严重时可能诱发白内障。因此，当组培实验室在用紫外消毒期间，工作人员不要呆在正消毒的空间内，切忌用眼睛注视紫外灯。特别的，如超净工作台内的紫外灯打开消毒时，应避免将手长时间暴漏于紫外灯下。
一般在接种室用紫外线消毒后，不要立即进入接种室，此时室内充满高浓度的臭氧，会对人体，尤其是呼吸系统造成伤害。应在关闭紫外线灯15-20 min后再进入室内。
1.2 甲醛熏蒸法
甲醛是一种无且具有强烈刺激性的气体，可与蛋白中的氨基结合使其变性或使蛋白质分子烷基化，对细菌、真菌、病毒等均有效，可广谱杀菌，且效率较高。在实际操作中，经常采用甲醛溶液和高锰酸钾按2∶1的比例进行薰蒸消毒， 即甲醛(40%)10ml / m3， 高锰酸钾5g / m3。KMnO4具有强氧化性，与甲醛发生反应，产生大量热量，使甲醛以气体形式挥发，扩散于空气和物体表面，消毒时间一般为20-30 min。但甲醛本身对人体来说，也是一种有害物质。皮肤直接接触甲醛可引起过敏性皮炎，产生斑。吸入高浓度甲醛，可诱发过敏性哮喘。高浓度甲醛还是一种基因毒性物质，实验动物在实验室高浓度吸入的情况下，可引起鼻咽肿瘤。长期呼吸含有高浓度甲醛的空气还会使妇女月经紊乱，影响生育，并引起新生儿体质下降与染体异常。特别地，当室内甲醛严重超标时还会引发白血病，导致死亡。为此，用该法消毒时，应注意：消毒时，工作人员须佩戴口罩、手套；消毒容器离门的距离要近一些，以便消毒人员迅速撤离；熏蒸前要密闭空间，一经开始，所有人员必须马上离开；消毒容器应选用耐腐蚀的陶瓷容器，容器容积比药液量至少大4倍，以免药液沸腾时溢出；消毒期间，不可进入消毒空间；消毒后通风换气，等气味散尽后再出入；药液次序要正确，先将水倒入容器内，然后加入高锰酸钾，均匀搅拌，再加入福尔马林，切忌将福尔马林中加入高锰酸钾，以免福尔马林溅出，造成危险。
1.3 新洁尔灭(苯扎溴铵溶液)
泌尿生殖
胫骨前肌 新洁尔灭(苯扎溴铵溶液)为十二烷基二甲基苄基溴化铵，是一种阳离子表面活性剂。这类消毒剂可吸咐在细菌的表面，从而改变细菌细胞壁和细胞膜的透性，使菌体内的酶、辅酶和代谢产物漏出，妨碍细菌的呼吸及糖酵解过程，并使菌体蛋白变性。此类消毒剂具有杀菌力强，无腐蚀性及漂白性，易溶于水等特点。新洁尔灭消毒时一般按照1∶1 000进行稀释，如果瓶装的新洁尔灭已稀释，按1∶500配置即可。具体使用时，可参照使用配比参数正确使用，但不能在使用时与肥皂液混合，以防失去药效。新洁尔灭在酸性、中性介质中杀菌力强。对结核杆菌、绿脓杆菌、芽胞、真菌和病毒效用差，甚至无效。基本而言，新洁尔灭对人体的毒害较低，目前还没有致癌和致畸的报道。但应注意，重复或长期接触本品，有可能对心血管系统、消化系统、特别是生殖系统造成伤害。此外，过敏体质接触可能发生过敏反应。因此，在用新洁尔灭进行喷洒消毒时，依然要注意戴好手套和口罩。
1.4 艾叶和苍术熏蒸
高数笔谈 艾叶为菊科植物艾的干燥叶，是临床常用中药之一。药理研究表明，艾叶水煎液和艾叶油有抗细菌和真菌作用。苍术亦为菊科植物，中药学上认为其有抗溃疡、抗炎、抗腹泻等作
用。艾叶和苍术混用，对组培室进行熏蒸，是一种新型的空气灭菌方式。艾叶用量为0. 5 g/ m3，苍术用量为2. 0 g/ m3 。干燥艾叶可直接点燃，苍术要先用95%酒精浸泡24 h，用时再用酒精为助燃剂点燃，每间培养室分3-5个点均匀点燃，熏蒸30 min。艾叶和苍术为我国常见中草药，资源丰富，价格低廉，消毒操作简单易行，效果持续时间较长，且使用时对人体无毒害作用，但应注意防火。
王丹凤近况2 用于外植体表面消毒的消毒剂
用于外植体表面消毒的消毒剂次氯酸盐、过氧化氢、溴水、、酒精等。其中次氯酸盐和更为常用，且在使用过程中容易出事故，现仅对此进行阐述。
2.1 次氯酸盐
次氯酸盐主要有次氯酸钠和次氯酸钙(又名漂白粉)2种。但次氯酸钙在空气中容易吸水潮解，影响灭菌效果，所以在外植体的消毒中，次氯酸钠更为多见。次氯酸钠为含氯消毒剂，高效广谱，为国内外广泛使用[8]。次氯酸钠合适的消毒浓度为2%，消毒时间约为20 min左右，不易残留，但次氯酸钠溶液碱性很强，对植物材料有一定的破坏作用。含氯消
毒剂的杀菌作用主要包括次氯酸的作用、新生氧作用和氯化作用。次氯酸的氧化作用是含氯消毒剂的最主要的杀菌机理，含氯消毒剂在水中形成次氯酸，作用于菌体蛋白质，次氯酸不仅可与细胞壁发生作用，且因分子小，不带电荷，故侵入细胞内与蛋白质发生氧化作用或破坏其磷酸脱氢酶，使糖代谢失调而致细胞死亡。该消毒剂高效广谱，对细菌、真菌、芽胞及病毒都有效。虽然次氯酸钠最后分解为和氧气而散逸，因而易于除去，不留残毒，但产生的刺激性气体如和氯化氢却对人体有毒害作用。这些气体强烈刺激眼角膜、上呼吸道粘膜等，可引起喉痉孪、喉水肿、支气管炎和急性脑炎等。
利用次氯酸钠对外植体进行表面消毒时，应注意：采用封闭的容器对外植体进行消毒；消毒结束后应将消毒废液及时倒掉，防止有害气体挥发；消毒操作时须戴好口罩，不宜用手揉眼摸脸等动作，以免对眼睛或皮肤造成伤害。
2.2
(HgCl2)是一种重金属盐类，Hg2+可与带负电的细菌蛋白质结合，使蛋白变性，酶蛋白失活。是一种极强的杀菌剂，实验室常用浓度为0. 1%～0. 2%，消毒时间为15min左右，消毒效果极佳，但其主要对细菌和真菌有效，对芽胞、病毒的效力差，甚至
无效。此外，用该药品消毒后，须用无菌水对外植体反复多次冲洗。无机汞中毒后，Hg2+可与体液中的阴离子结合，形成可扩散的分子，造成内脏器官组织细胞受损，表现出各种中毒症状如腹泻、便血、肾脏水肿，严重时导致死亡。
是一种极为有效的杀菌剂，但也是一种剧毒药品，因而在实验室管理中应采取以下严格的方法：实行“双人双锁”管理制度，即药品由至少2名实验管理人员负责；依据实验要求，精确计算药品用量，按需供给，定量领取，并严格执行药品领用制度，每次进货入库及使用时要登记详细，防止私人带出实验室；采用专门的药匙、烧杯、量简来配制，称量后的垫在天平盘上的纸应及时清除，配制完后要清洗干净玻璃器皿和手；在消毒操作过程中应小心谨慎，避免接触皮肤，更不能在搅拌或振荡消毒液时溅入五官；消毒完成后，切不可将废液随意倾倒，应统一回收，然后交由专门的环保公司处理(该公司须具备由国家环保部门认定的资质)。
3 结语
针对组培实验室的污染源进行消毒是植物组织培养的重要环节，高效安全、低毒无害、环境友好是组培实验室消毒的本质要求和发展趋势。结上所述，我们可以看出，用中草药及
新洁尔灭进行环境消毒更为低毒友好，对外植体进行消毒时，综合考量，次氯酸钠比更为合适。
培养基的种类与区别
迄今为止，已研制出许多基本培养基配方，就我所知道的，有32种，或者更多，这些配方既有共性、又有特异性。依据培养基的成分、元素的浓度含量等特点分为4类。
(1)高盐成分培养基 这类培养基包括MS培养基、LS培养基、BL培养基、BM培养基、ER培养基等，其特点是：
①无机盐浓度高，元素间的比例较适合、缓冲性能好，某些元素略有损失不会影响离子平衡；
②营养丰富，不需再加入水解蛋白等有机成分；
锐意进取 开拓创新 努力提高服务能力和水平 ③微量元素种类较全，浓度较高。应用比较广泛，钾盐、铵盐和硝酸盐含量均较高，故又称富集元素平衡培养基。其中的MS培养基应用最广泛，其营养成分和比例均比较合适，广泛用于植物的器官 、细胞、组织和原生质体培养，也常用在植物脱毒和快繁等方面。
(2)硝酸盐含量较高的培养基 有B5、N6、LH、GS等培养基。这类培养基的特点是：
a.硝酸钾的含量高；b.氨态氮的含量低（高铵对有些植物有抵制作用）；c.含有较高的盐酸硫胺素。
①B5培养基。除含有较高的钾盐外，还含有较高的氨态氮和较高的盐酸硫胺素，较适合南洋杉、葡萄、豆科及十字花科等植物的培养。
②N6培养基。适用于单子叶植物的花药培养，柑橘类花药培养也较好，在揪树、铁叶树等植物的组织培养中使用较多。
③SH培养基。这是盐类浓度较高的一咱培养基，其中铵与磷酸是由磷酸二氢铵提供的。
(3)中等无机盐含量的培养基 其特点是：
a.大量元素无机盐约为MS培养基的一半；b. 微量元素种类减少而含量增高；c.维生素种类比MS培养基多，如增加生物素、叶酸等。
①H培养基。该培养基大量元素约为MS培养基一半，仅磷酸二氢钾及氯化钙稍低，微
量元素种类少，而含量较MS培养基高，维生素种类也比MS培养基的多，适用于花药培养和枣类的培养。
②尼厅培养基。与H培养基基本相同，俊生物素比H培养基高10倍，也适合于花药培养。
③米勒培养基。适合于大豆食不果愈伤组织培养和花药培养等。
④Rlaydes培养基。
薛晓峰(4)低无机盐类培养基 此类培养基大多数情况下用于生根培养，其特点为：a.无机盐含量很低，一般为MS培养基的1/4左右；b.有机成分含量也很低：c.多数情况用作生根培养基。包括以下几种。
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