草莓种植技术|草莓组培脱毒技术

草莓种植技术|草莓组培脱毒技术
伯克草莓极易感染病毒,草莓种苗⽣产系⽆性繁殖,感染病毒的母株会将病毒直接通过匍匐茎传递给⼦苗;蚜⾍、蓟马、粉虱等刺吸式害⾍也能传播病毒,导致病毒在草莓植株上不断地积累和蔓延。⽬前还没有防治病毒病发⽣的有效药剂,实现草莓⽆病毒栽培的唯⼀有效途径就是脱除草莓植株中的病毒,获得⽆病毒原种,⽽后以此⼤量繁育⽆病毒苗,不断满⾜⽣产的需要。
草莓感染病毒后通常不会死亡,但会造成⽣长势减弱,茎叶黄化,开花、结果数量减少,果实变⼩,成熟期推迟;严重时叶⽚皱缩、果实畸形、植株矮化,产量和品质⼤幅度下降。据调查,国内草莓产区病毒病⾮常普遍,带病毒株率达80%以上。
⼀、草莓脱毒⽅法
草莓脱毒通常有热处理、茎尖培养和花药培养3种⽅法。
1、热处理脱毒
在特定的⾼温条件下热处理草莓植株,使其体内的病毒被钝化,长出的新枝叶或新植株则可能不带有病毒。
2、茎尖培养脱毒
病毒在植株的各器官和组织中分布并不均匀,茎尖分⽣组织⼀般都不会感染或很少感染病毒。采⽤茎尖组织离体培养可以获得⽆病毒苗是⽬前草莓脱毒中应⽤最⼴的⽅法。
3、花药培养脱毒
在草莓现蕾期采集处于单核期的花药,经过诱导培养形成愈伤组织,再经过分化、增殖、⽣根培养,可以脱除病毒,获得⽆病毒苗。
评估指标体系⼆、草莓茎尖脱毒苗⽣产的基本程序
草莓茎尖脱毒苗⽣产的基本程序如上图。
三、茎尖培养技术
1、接种材料准备
(1)母株选择取样的母株可在⽣产⽥中挑选,选择结果性状好、品种种性纯正的植株作为母株,⼊选的植株要挂牌标记或单独种植,防⽌品种混杂。
(2)匍匐茎选取选取时间为5~6⽉,接种前选择母株发⽣的健壮匍匐茎,剪取长度为10~15cm,取样后要⽴即将匍匐茎基部插在盛⽔容器中,防⽌失⽔。
(3)匍匐茎前处理将⽥间匍匐茎除去不需要的部分,将所需部分切割⾄长度为5~8cm,置于⾃来⽔龙头下流⽔冲洗15分钟,⽤洗⾐粉⽔(每5g洗⾐粉兑100mL⽔)浸泡10分钟,再⽤⾃来⽔冲洗30分钟。
(4)匍匐茎消毒处理将经上述预处理、沥⼲⽔的匍匐茎放⼊⼴⼝瓶或烧杯,移⾄超净⼯作台,⽤70%⼄醇灭菌10~30秒,再⽤0.1%溶液灭菌10~15分钟或20%次氯酸钠溶液中8~10分钟,然后⽤⽆菌⽔清洗3~5遍,倒出、沥去最后⼀次清洗⽤⽔后备⽤。
2、培养基
草莓培养通常采⽤MS培养基,如上图。
(1)母液的配置
(2)培养基配置
以配置1000mL培养基为例,具体操作步骤如下:电动比例调节阀
大数据下的精准营销①在1000mL的烧杯中先加⼊少量蒸馏⽔,分别添加母液Ⅰ20mL,母液Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各10mL,母液Ⅴ5mL.
②加⼊蔗糖30g.
③根据⽤途培养基分为初代培养基、增殖培养基和⽣根培养基,要根据其不同⽤途、不同草莓品种对应添加不同种类的⽣长调节剂。
④⽤玻璃杯充分搅拌后,再⽤蒸馏⽔定容到1000mL.
⑤调节pH值⾄5.7~5.8.
⑥添加琼脂粉7~8g.
⑦加热⾄琼脂粉溶解后分装到试管或培养瓶中。
(3)培养基灭菌
分装完成后,将试管或培养瓶放⼊⾼压灭菌锅中,在温度121℃时,⾼压灭菌15分钟,灭菌结束后及时取出,冷却后放⼊⽆菌接种室中待⽤。
3、⽆菌操作步骤
①接种3天前⽤甲醛熏蒸接种室,接种前3⼩时打开紫外线灯进⾏杀菌。
②在接种前20分钟,打开超净⼯作台的风机以及台上的紫外线灯。
③接种员先洗净双⼿,换好专⽤实验服。
④上⼯作台后,⽤酒精棉球搽拭双⼿,然后搽拭⼯作台⾯。
⑤先⽤酒精棉球搽拭接种⼯具,再将镊⼦和剪⼑从头⾄尾过⽕⼀遍,然后反复过⽕尖端处。
⑥接种时,接种⼈员双⼿不能离开⼯作台,不能说话、⾛动或咳嗽等。
⑦在接种过程中要经常灼烧接种器械,防⽌交叉污染。
⑧接种完毕后要清理⼲净⼯作台,⽤紫外线灯灭菌30分钟。
4、初代培养
在⽆菌条件下,取已消毒的匍匐茎⽣长点0.2~0.5mm,接种到已灭菌的培养基上,1周左右茎尖转绿并萌动,20~30天形成芽丛。
5、继代培养
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⽆菌条件下将已分化的芽丛切割,转⼊增殖培养基中进⾏增殖。45天后每个芽可获5~7个腋芽芽丛。
6、⽣根培养
当增殖芽数量达到⽣产要求时,转⼊⽣根培养基中进⾏⽣根培养。⽣根时间为20~30天。
7、驯化培养
当⽣根苗的根系长度达到1.5cm时,将瓶苗移到温室中,逐步开启培养瓶盖,驯化3~5天,然后将苗取出,清洗掉沾在根部的培养基,将苗定植于营养钵或⽳盘中驯化培养。驯化培养条件:温度18~25
℃,湿度85%~100%,遮阳⽹遮光50%,新根⽣出后去除遮阳⽹。待苗长出4~5⽚新叶时,就可以作为原种苗进⾏移栽种植。
四、病毒检测
对于每⼀个由茎尖组织产⽣的植株,必须经过检测⽆病毒,才能作为⽆病毒原原种繁殖。检验草莓苗
是否脱除病毒的⽅法有PCR分⼦检测法和指⽰植物检测法。
指⽰植物检测法需要⽤UC1、UC5等指⽰植物,具体⽅法为:将指⽰植物和待检植株栽在⼩花盆中,并不断去掉指⽰植物发出的匍匐茎,使叶柄加粗。当叶柄达到2mm以上的粗度时,先从待检植株上剪取成熟叶⽚,剪去两边⼩叶,仅取中间⼀⼩叶带叶柄1.0~1.5cm,⽤锐利⼑⽚把叶柄削成楔形作为接穗,然后选取健壮的指⽰植物,剪去中间⼩叶作为砧⽊,在两叶柄中间向下纵切1条长1.5~2cm的切⼝,再把待检接穗⼩叶⽚插⼊指⽰植物切⼝内。嫁接后为保证成活,⽤蜡质薄膜或塑料袋包扎嫁接⼝,每株指⽰植物可嫁接2个待检接穗。
2019最新国产理论嫁接后将整个指⽰植物的花盆套上塑料袋,以保证湿度。先在25℃的温度条件下⾮阳光直射处放置2~3天,然后移到25~28℃、光照充⾜的环境下,每隔2~3天换⼀次⽓,7~10天后去掉塑料袋,并开始分批去掉未嫁接叶⽚,促进幼叶发⽣,4~6周即可鉴定出有⽆病毒。⼀般每个待检植株要接种3株以上,根据指⽰植物症状表现,确定病毒种类和侵染程度。

本文发布于:2024-09-22 04:18:42,感谢您对本站的认可!

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标签:病毒   草莓   培养   植株   接种
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