【摘要】目的探讨survivin基因在中耳胆脂瘤中的表达及其意义。方法选取我院2009年1月——2012年12月30例中耳胆脂瘤患者，设定为研究组，并选取30例健康者作为对照组，以免疫组织化学（envision system）染技术和rt-pcr法，分析对比survivin基因在两组患者中的表达。结果研究组患者中20例（66.67%）survivin基因蛋白染呈现阳性，对照组未呈现阳性表达，只有极少数分散状阳性细胞，两组存在较明显统计学差异（p<0.05）。研究组中survivinmrna有一定表达，对照组未出现表达。结论中耳胆脂瘤患者组织能够显著呈现survivin表达，健康者不会有表达现象。 【关键词】中耳胆脂瘤；survivin基因；免疫组织化学
本文选取了30例中耳胆脂瘤患者，探讨survivin基因表达，现报告如下。
1资料与方法
1.1一般资料选取我院2009年1月——2012年12月30例中耳胆脂瘤患者，设定为研究组，其中男16例，女14例，并选取30例健康者作为对照组，其中男15例，女15例；年龄21-68，平
均（35.8±3.5）岁。研究组病程2-10年，平均（5.6±1.6）年。选取已知阳性切片为阳性对照，pbs液作为阴性对照。
1.2方法两组均应用免疫组化方法进行测定。采选组织以4%甲醛固定液保持24h固定，常规法应用石蜡进行包埋，并切片，烘干。然后以常规法脱蜡。予以抗原修复后，滴入一抗，4℃环境下孵育过夜，后滴入二抗。以dab显试剂显，在光镜下保持显时间。选取苏木素进行复染，后以中性树胶实施封片，应用光镜予以观察。 半定量逆转录-聚合酶链式反应（rt-pcr）检测方法[1]：所选取组织标本从液氮取出然后研磨为粉状，加进适宜rnaiso reagent对总rna广西壮族自治区人口和计划生育管理办法进行提取，以核酸/蛋白分析仪对mrna进行测定，rna od值保持在1.6-1.8。rt-pcr：将存品总田间持水量rna（5-10ug测控技术期刊），加入到标准反转录反应体系当中，46℃状态下保持60min，99℃状态下保持5min，5℃状态下保持5minsr2m。扩增pcr，以4.0ul cdna作为模板，50ul标准化pcr反应体系，94℃4min变性；94℃30sec，59.3℃50sec，72℃50sec，实施30LG KG90N>农村经济与科技个循环态；于72℃10min进行延伸。内参照选取β-actin，退火温度设定59.8℃，然后将其扩增30循环。将5ulpcr产物放置在1.0%琼脂糖凝胶上保持电泳30min，应用溴乙锭进行染。
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