［文章编号］1006-2440（2012）01-0025-04
涎腺腺样囊性癌（salivary adenoid cystic carci－noma,SACC）特征性生长方式是广泛浸润周围组织，包括神经和血管，并经血管向远处转移。尽管其生长速度缓慢，近期预后效果好，5年生存率达70%，但远期效果不尽人意，10年和25年生存率不足40%和15%[1]。如何提高疗效和改善预后一直是研究的热点。本文收集1990年1月—2009年6月南通大学附属医院收治SACC患者48例，分析研究ADAM-17（a disintegrin and metalloproteinase，解聚素金属蛋白酶）和表皮生长因子受体（epidermal growth factor 解聚素金属蛋白酶和表皮生长因子受体在
章建国1，陆锦标2，施公胜1，张弘3
（1南通大学附属医院病理科，江苏226001；2南通大学病理解剖学教研室；3南通大学附属医院消化内科）
[摘要]目的：探讨解聚素金属蛋白酶（ADAM-17）和表皮生长因子受体（EGFR）在涎腺腺样囊性癌中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学法，检测ADAM-17蛋白和EGFR在涎腺腺样囊性癌48例和正常涎腺20例中的表达，并分析其与临床病理因素的相关性。结果：涎腺腺样囊性癌和正常涎腺中ADA
M-17的表达分别为35例（72.9%）和1例（5.0%）；EGFR表达分别为36例（75.0%)和2例（10.0%），两者比较差异有统计学意义（P<0.001）。
ADAM-17和EGFR阳性表达与肿块的大小、TNM分期和患者生存状况呈正相关，ADAM-17和EGFR阳性表达具有一致性和正相关性。结论：ADAM-17和EGFR蛋白可能协同参与涎腺腺样囊性癌发生、发展，并可作为预后判断指标，也可望成为新的靶点。 [关键词]涎腺腺样囊性癌；解聚素金属蛋白酶；表皮生长因子受体；免疫组织化学法工业用地
[中图分类号]R739.8[文献标志码]A
Expressions and their clinicopathological significance of ADAM-17and EGFR
in human tissues of Salivary adenoid cystic carcinoma
Zhang Jianguo1,Lu Jinbiao2,Shi Gongsheng1,Zhang Hong3
(1Department of Pathology,Affliated Hospital of Nantong Univesity,Jiangsu226001;2Department of Pathological Anatomy, Nantong University;3Department of Gastroenterology,Affliated Hospital of Nantong Uninvesity) [Abstract]Objective:To investigate the expressions of ADAM-17and EGFR in hu
单细胞生物man tissues of Salivary adenoid cystic carcinoma(SACC)，and the relationship between their expressions and clinicopathological features.Methods:48cases of SACC tissues and20cases of normal tissues were collected from Department of Pathology,the expressions of ADAM-17 and EGFR were detected in all these tissues by ENVISION immunohistochemistry method,and the expressions of ADAM-17and EGFR and clinical pathology were analyzed withχ2test or exact probabilities method and spearman’s non-para－metric analysis.Results:The expression levels of ADAM-17and EGFR in HCC were72.9%%（35/48）and75.0%(36/48) respectively,while5.00%(1/20)and10.00%(2/20)in normal tissues,which showed that the expressions of ADAM-17and EGFR in SACC were significantly higher than those in the normal salivary tissues.It also showed that ADAM-17and EGFR score were correlated with tumor size,and that TNM staging and the survival index were in coincidence.Conclu-sions:The over-expressions of ADAM-17and EGFR were closely related with SACC development.Combined detection of ADAM-17and EGFR in SACC may be used to judge the prognosis of SACC,and ADAM-17may be a target for the treat－ment of SACC in future.
[Key words]Salivary adenoid cystic carcinoma;a disintegrin and metalloproteinase;Epidermal Growth Factor Re－ceptor;Immunohistochemistry
*[基金项目]南通市社会发展项目（项目编号K2009059）。
**[作者简介]章建国，男，汉族，江苏如皋人，生于1968年3月，硕士学位，副主任医师。E-mail：zangjg125@163
·论著与基础研究·
receptor，EGFR）在SACC中的表达与临床预后参数间相关性，旨在探讨ADAM-17和EGFR在SACC 发生、发展中的作用，为临床和预后判断提供一种新的思路。
1资料与方法
1.1一般资料SACC患者48例，男28例，女20例，年龄25～77岁，中位年龄44岁，并按年龄分为中青年组（23～55岁）27例，老年组（56～73岁）21例。对照组为正常涎腺组织20例。均行手术切除，术后放疗5例，随访52～160个月，中位随访时间106个月。病变部位：大涎腺（腮腺、颌下腺和舌下腺）19例，小涎腺（腭腺、唇腺及其他）29例；肿瘤大小：≥2cm32例，＜2cm16例；TNM分期：Ⅰ期15例，Ⅱ期22例，Ⅲ期或Ⅳ期11例；复发组24例，未复发组24例；死亡组10例，生存组38例。所有病例按照2005年WHO涎腺肿瘤组织学分类标准，由2名副主任医师以上医师共同诊断分类，将SACC患者分为腺样型、管状型32例，实体型（实体成份大于或等于30%）16例。
1.2实验方法一抗ADAM-17和EGFR均购于福建迈新生物试剂公司，组织为石蜡标本，4μm厚石蜡切片，
运用ELIVISION法通过LABVISION免疫组化自动染机完成，抗原修复采用微波加热法，采用已知阳性染的乳腺癌切片作阳性对照，PBS液代替一抗作阴性对照。
1.3方法采用光镜观察，先在低倍镜（10×10）下选择阳性细胞较密集几个区域，在高倍镜（40×40）观察计算1000个肿瘤细胞，统计阳性细胞所占百分比。统计计分评价：（1）染阳性细胞数：＜4%为0分，5%～24%为1分，25%～49%为2分，≥50%为3分。（2）染强度：无细胞阳性或＜5%细胞呈淡黄阳性计0分，≥5%细胞呈淡黄细颗粒状阳性计1分，弥漫强棕黄颗粒状阳性计3分，介于两者之间者计2分。然后将每1例两项得分相加即为该肿瘤阳性表达得分，最小得分为0分，最高得分为7分，≤2分为阴性或弱表达，≥3分为阳性表达。
1.3统计学处理数据统计采用SPSS13.0软件进行分析，率的比较采用χ2检验或确切概率法；相关性检验采用Spearman等级相关分析，P＜0.05表示差异有统计学意义。2结果
2.1ADAM-17蛋白和EGFR蛋白在SACC和正常涎腺组织中表达ADAM-17蛋白阳性部分主要定位于细胞膜和细胞质中，呈棕黄（图1）。ADAM-17在48例SACC组织中阳性表达35例（72.9%）；在对照组20例中表达多以阴性或弱阳性表达，其中呈中度阳性表达1例（5.0%），两者表达比较差异有显著统计学意义（P＜0.001），见表1。EGFR蛋白在48例SACC组织中阳性表达（图2）36例（75.0%)，而对照组20例中阳性表达2例（10.0%），两者表达比较差异有统计学意义（P＜0.001），见表1。
2.2SACC中ADAM-17蛋白和EGFR蛋白表达与临床病理关系ADAM-17蛋白和EGFR蛋白在SACC中的阳性表达与肿块的大小、TNM分期和患者的生存状况均呈正相关，与年龄、部位、组织学类型和是否复发转移等均呈无相关。见表2。
表1ADAM-17和EGFR在SACC组和对照组表达比较
n
计分
P
(－)(＋)
ADAM-17SACC组481335
对照组201910.000（26.38）EGFR SACC组481236
对照组201820.000（24.194
）图1SACC中ADAM-17蛋白呈胞浆胞膜棕
黄颗粒状阳性（EnVision法，200×
）
图2SACC中EGFR蛋白呈棕黄呈胞浆胞膜
棕黄颗粒状阳性（EnVision法，200×）
表2ADAM-17蛋白和EGFR蛋白表达与SACC临床病理因数关系
2.3SACC中ADAM-17蛋白和EGFR蛋白表达相关性Spearman等级分析示ADAM-17蛋白和EGFR蛋白在SACC中的表达具有正相关性（r= 0.745，P<0.001）
3讨论
涎腺腺样囊性癌（SACC）是涎腺常见恶性肿瘤之一，约占涎腺全部肿瘤的10.0%，占涎腺恶性肿瘤的21.9%。SACC呈现局部组织的广泛浸润和神经侵犯，尽管行大范围手术切除仍具有较高复发率。并具有缓慢惰性生长、远处转移和远期复发的独特的生物学的过程[2，3]。不少研究一直在探索与SACC相关的预后因子和方法，最近研究提示EGFR和ADAM-17表达的增强和活性的增加将缩短患者的生存、复发时间[1，4]。
ADAMs属于基质金属蛋白酶（MMP）锌结合超家族成员之一。典型的ADAM蛋白是由许多保守区域所构成，其包括一个信号肽，一个前肽，一个基质金属蛋白酶域，一个去整合序列，一个半胱氨酸富集区域，一个EGF类似域，一个跨膜序列和一个胞质尾区。其释放的肿瘤坏死因子α，表皮生长因子，转化生长因子α和双调蛋白等生物学上的重要配体，参与多种生物学功能，如粘附，迁移和蛋白水解，并参与多种病理生理学过程。ADAM-17以非活化120kDa酶原形式产生，在生理条件下经G蛋白偶联受体刺激而活化，产生100kDa活化酶，介导许多跨膜蛋白脱落，其中包括一些EGFR配体脱落，如肿瘤坏死因子α、转化生长因子Α，HB-EGF等，从而介导EGFR活化，促进癌症发生和转移。
同义词词林文献中发现胃、肝脏、胰腺、直肠及乳腺等癌中均存在着ADAM-17的过度表达，并与肿瘤大小、转移和复发等临床病理学参数相关[5-8]。
本文就ADAM-17及EGFR在SACC中的表达及意义进行了研究，发现ADAM-17和EGFR在SACC中呈高表达，并均与SACC的大小、TNM分期和患者的生存状况相关，与年龄、部位、组织学类型和是否复发转移等无关提示ADAM-17和EGFR 的表达与SACC的生物侵袭力，癌组织的生长和患者的生存等密切相关。其主要机制可能是：（1）ADAM-17介导了活化EGFR配体的脱落，ADAM-17过表达导致EGFR的过表达，促进了SACC的生长和侵袭；（2）ADAM-17是G-耦联蛋白受体介导信号的影响因子之一，而后者过表达也是肿瘤发生因素之一。（3）ADAM-17介导肿瘤坏死因子受体的脱落，其可溶解的形式可以与肿瘤坏死因子相结合，并阻止免疫系统对肿瘤的攻击。（4）有文献报道
例数（n）
ADAM-17
P值hsk成绩
EGFR
P值(－)(＋)(－)(＋)
年龄<55271017720
>55213180.078（3.096）5160.867（0.028）部位大涎腺19811415
小涎腺295240.058（3.594）8210.609（0.261）组织大小≥2cm32329428
＜2cm161060.000（15.244）880.005（8.000）组织学类型筛状-腺管型3211211022
实性型162140.108（2.585）2140.157（2.000）TNM分期Ⅰ期1510596
Ⅱ期22319319
Ⅲ或Ⅳ期110110.000（18.001）0110.01（14.982）复发转移组13112112
未复发转移组3512230.065（3.395）11240.139（（2.848）生存组3813251226
死亡组100100.030（4.692）0100.040（4.211）
（上接第19页）
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[收稿日期]2011-12-30
关于构建和谐劳动关系的意见
ADAM-17可以激活破骨细胞，促进了癌组织向骨等部位转移[9]。
文献显示SACC中存在EGFR过表达，并与患者预后和复发等密切相关[10]。本文研究ADAM-17和EGFR在SACC中表达，两者具有明显正相关性（r> 1）。证实ADAM-17在介导EGFR活化过程中的作用，促进EGFR的活化，从而促进癌症发生发展，并促使癌组织复发和转移，恶化患者预后。
与以往研究不同的是，本文研究均显示ADAM-17和EGFR的表达与SACC转移与复发无相关性。可能与ADAM-17两种形式活化型和非活化型在SACC中的数量和比率存在着不同。本研究中标本数量偏小，或蛋白检测与基因检测间差别所造成，是否存在联系值得进一步研究。
本文研究显示ADAM-17和EGFR在SACC中存在着高表达，并与多个预后因素相关。提示该指标检测有利在SACC还处于原发状态下，对其预后进行准确判断，指导临床进行合理选择。同时可作为一个靶点，选择性抑制ADAM-17可阻止多种促进肿瘤生长配体释放，如EGFR配体等释放，抑制肿瘤的生长，从而为SACC的提供一个新的途径。
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