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免疫共沉淀-转染

尺度效应转染
一、种细胞
60mm 100%融合 
传100mm 24hr
传 100mm：60mm  1：9/12  24hr  80%融合
可以转染
二、转染 
          1）A: 配 vigofect 转染试剂：      （vigofect 4度 细胞间）
  （100ul 9%生理盐水  +  2ug vigo） *  5（4-5） 
  混匀    RT  5min 
          2）B: 转染质粒
oli100ul（9%生理盐水）  +  plasmid  （如 Table 1  Plasmid）
边混匀边加入    混匀
　
    转染管1
  转染管2
  转染管3
  转染管4
PCDNA3.1  1λ Mouse
可见异物
  +  8ul
藏羌锅庄
  +  4ul
  +  4ul
    -
Myc-GENE1 1λ Mouse
      -
  +  4ul
矛盾农村三部曲
    -
  +  4ul
GENE2  1.34λ Mouse
      -
    - 
+  3ul(4ug)
-  3ul(4ug)
        4/1.34=3.1 
神曲1 2
A加入B中边混匀边加入  (200ul)
RT静置15min 后加入细胞中   
均匀滴入培养基中
培养3-4hr后换新培养基 
24hr 后 收细胞 做IP

本文发布于:2024-09-22 05:39:02，感谢您对本站的认可！

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标签：转染   异物   细胞
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