质粒转染流程

形成性>舌下腺囊肿口外型那么首先要有质粒,然后才能转染
所以第一步就是做质粒:
然后继续分解:
1.要对质粒有了解,简单的说质粒是一个载体,可以携带目的基因进入细胞
2.你要携带什么基因,根据你的描述,你要携带的是干扰基因,该基因能翻译成RNA流动儿童后,可以干扰你的目的蛋白翻译,从而起到基因沉默的作用;大白鲨光驱
3.干扰基因的序列是什么,这需要你自己查资料自己设计或者公司设计;
3.一般的质粒是我们成为空载,即没有携带目的基因。那么问题就来了,如何让空载带上干扰基因,也就是所谓的做干扰质粒。可以公司,也可以自己做。
4.如何让做好的质粒进入细胞发挥作用:这个过程叫做转染。转染的方法很多,常用的是脂质体转染,多用Life公司的Lipo 2000置换贴图(现在已经有lipo3000了,据说效果比2000提高了快10倍),这个最方便,属于瞬时转染,,具体方法有说明书;也有用电转的,这个需要特殊的电转设备,比较麻烦,但是转染率高,相应的转染条件也高。
4.转染之后第一步要确定干扰效果,可以问你师如何解决。
5.摸索好条件以后,就可以进行你后续的什么看细胞形态,相关分子表达情况,细胞侵袭等
试验了。
6.从楼主的语言描述,感觉对质粒构建不是很熟悉,推荐直接公司构建,当然,如果作为学习,自己也可以构建,但是要有多次失败,时间超长的心理准备。
7.如果转染效率不好,推荐病毒包装即用病毒作为载体,楼主可以看一下载体的一些知识。
黄梁木
对于:质粒转染需要做好哪些前期准备,如何建立细胞系,在质粒的选择和转染试剂的选择上.
细胞系也要根据自己的实验需要,楼主已经选好细胞系了。
至于质粒选择,也是要根据你的实验设计,比如你需要这个质粒具有抗某些药物的特点,以便于后期细胞筛选等等,这些都可以和公司商量。

本文发布于:2024-09-24 20:22:22,感谢您对本站的认可!

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标签:质粒   转染   基因   细胞   干扰   需要   携带
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