pcr引物设计反思报告

《中华人民共和国刑法》pcr引物设计反思报告我的性
    一、关键词的提取在设计引物时,为了节省时间。大家经常把每种不同结构基因所包含的序列都写下来,这样非但没能够起到加快设计速度的目的反而浪费了大量时间,让人误以为设计方法不正确或者是引物本身存在问题。其实,用中心引物还可以避免这个错误。例如:3′-羟基-4′-甲氧基-5′-氟-1′-全-3′-羧酸和5′-氨基-3′-甲氧基-4′-全-3′-羧酸都是从 SABCHNAMONIAKIDENIALIBAYTE (SABCHNAMONIAKIDENIALIBAYTE)基因中产生的两条多肽链,它们分别由5′端到3′端再到2′端。通过比较可知,只要先设计3′端到5′端的引物,然后再根据5′端所连接的氨基酸出与之对应的 SABCHNAMONIAKIDENIALIBAYTE (SABCHNAMONIAKIDENIALIBAYTE)基因就行了。二、实际操作与理论的差距为什么要在这里强调实际操作与理论相符合呢?实际上这是实验过程中容易发生的错误。例如:有些同学把实际操作与理论相违背的情况归纳为以下几点(见表1):1.在不需进行荧光检测时仍按照原先的习惯,将长引物在最终末端一个接一个地放置;2.连续多次使用长引物(或超长引物);3.用一个特定的引物反复测试一组 DNA,未见突变,随又改换新的引物重复测试,并且继续增加引物浓度,甚至在每次突变都已显示出来的情况下依旧不断更换引物(或其他 DNA,例如做 Hindⅲ筛选时用 TaqDNA 作为探针分子时);4.对于非特异性引物,在引物引
导 RNA 聚合酶向某特定的位点切割时,切割方式极不规范,造成产物不均匀;5.对荧光标记的 RNA,使用荧光染料时顺序颠倒,致使检测错误。三、总体结论
    对于做实验的过程和结果我有很多感触。不管是引物的设计还是制备实验,实验步骤的前期准备工作以及中途操作环节都是非常必要的。当然这也包括了各个细小的环节。希望大家能尽自己的努力去完善,将会有意想不到的收获。另外,做 pcr 的注意事项很多,也要根据不同的试剂量掌握好适宜的温度,一般在60℃左右。除此之外,还有各种消毒药水的配置等等,我就不一一赘述。
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本文发布于:2024-09-21 15:47:20,感谢您对本站的认可!

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标签:引物   设计   实验   理论   切割
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