1.打开含基因ID的原始⽂件——引物设计原始DNA信息 2.选中Gene id中的所有基因名称,复制
朋友网广州市积分制入户管理办法3.打开Tbtools,依次选择Sequence Toolkits;Fasta tools;Fasta Extractor
4.将gene id粘贴到对应位置,并按上图所⽰将“⼩麦cDNA库”拖到第⼀个框,在第⼆个框设置输出⽂件(例⼦中的输出⽂件名为out.fa)
5.点开始提取序列
6.打开primer6软件,点⽂件夹+导⼊输出⽂件out.fa,拖拽选中前10个⽂件进⾏引物设计(软件最多可同时设计10个引
中国思维物)7.点 红蓝箭头设计引物,修改PrimerParameters如图,点Search,选取6图左侧框中的任⼀引物,接第8步
8.点All Primers… ,会出现上图,选取其中Rating(看综合评分即⿊⾊评分)较⾼,且Lenth bp中蓝红数字在10以
上,30以内(最好是10-20之间),⿊⾊数字在100-200之间(最⾼不超过300)的引物。9.选完以后,单机该引物⼀
钱超尘栏,待该栏变蓝⾊后,点Replace即可将该引物设置为最佳引物
10.设计完引物后即可将结果输出,输出可分两种,⼀种是只要最佳引物序列(给公司发邮件时可以⽤),另⼀种是输出因特网的应用
土婆婆pk洋媳妇
所有引物的信息,点击File出现10图所⽰界⾯,点Export Primer Result,出现10-1图,安照10-1图所⽰设置参数(可
⾃⾏设置输出⽂件名)即得到最佳引物序列,安照10-2图所⽰设置参数即得到所有引物的信息(作业所需为两个表格)因为⽹站显⽰不全,所以我把详细教程做了⼀个PPT,还把对应的软件放在了⼀个压缩包⾥,⼤家可以⾃⾏下载查阅
提取码:g0q8
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