摘大庆教育论坛 要：以金鱼受精卵为材料，通过胚胎培养探讨反义寡核苷酸显微注射剂量、受精卵质量、胰酶消化浓度等对受精卵反义寡核苷酸显微注射的影响，研究表明，反义寡核苷酸注射剂量在4.6nL、胰酶消化浓度在0.4％的情况下，选用质量较好的受精卵注射，显微注射效果较好，可为之后的基因功能研究提供材料保障，利用显微注射法导入反义寡核苷酸来研究基因的功能，是研究基因功能的有效途径。 关键词：金鱼；反义寡核苷酸技术；显微注射；胚胎培养
反义寡核苷酸技术(Antisense olizonuclcoti-des华硕m5000，ASON)是用一段人工合成的能与RNA或DNA互补结合的寡核苷酸链抑制基因的表达，其原理通过阻抑从DNA至mRNA的转录过程或从mRNA到蛋白质的翻译过程，而阻断细胞中的蛋白质合成，反义寡核苷酸技术具有高特异性、无毒性等特有的优点，近年来在抗病毒、抗肿瘤、细胞凋亡、信号传导及在遗传育种、胚胎发育的研究中有愈来愈广泛的应用，将反义核酸导人体内是反义核酸技术中的重要环节，林州地震
目前主要方法有：直接微注射、血管壁外聚合药物转运系统、气囊导管定位腔内转移、改良电穿孔法等，因金鱼体外受精体外发育，且个体产卵数量大，胚胎透明，用显微注射法将反义寡核苷酸(ATc，SCON)直接注入受精卵，可在活体上观察金鱼器官发育，因此该研究方法在研究鱼类胚胎发育调控机制有突出的优越性，本实验室在前期研究工作中发现，Vsxl杨武事件基因是与金鱼眼睛空间模式形成相关的调控基因和分析二倍体依赖型机制的候选目标基因，为了研究候选目标基因Vsxl在金鱼发育过程的具体功能及对其下游基因的调控机制，我们采用反义寡核苷酸技术和显微注射的方法，将反义寡核苷酸(ATG，SCON)直接注入金鱼的受精卵，使Vsxl的mRNA不能翻译成相应的蛋白质，以此探究Vsxl复合酶在金鱼胚胎发育过程中的功能及其调控方式，显微注射反义寡核苷酸是该项研究的前提条件，本文探讨了影响金鱼受精卵反义寡核苷酸显微注射的客观因素，为提高反义寡核苷酸显微注射成功率提供依据。
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议