ELISA(双抗体夹心法)—检测HBsAg

ELISA(双抗体夹心法)—检测HBsAg
摘要:
以已知抗体(抗HBs)包被载体,然后将含有抗原的待检标本加入,共同孵育后,抗原结合于包被抗体上,再加入酶标记特异抗体(酶标抗HBs),酶标抗体连接到抗原上,最后加入底物溶液,根据颜反应来判定抗原含量。 【材料】HBsAg试剂盒,本试剂盒含: 1、包被抗-HBs反应条 1瓶 2、酶结合物 1瓶 3、HBsAg阳性对照 1瓶 4、HBsAg阴性对照 1瓶 5、洗涤液:用前每瓶作1:20稀释 1瓶 6、显剂(
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以已知抗体(抗HBs)包被载体,然后将含有抗原的待检标本加入,共同孵育后,抗原结合于包被抗体上,再加入酶标记特异抗体(酶标抗HBs),酶标抗体连接到抗原上,最后加入底物溶液氢能,根据颜反应来判定抗原含量。
【材料】HBsAg试剂盒,本试剂盒含:
1、包被抗-HBs反应条
1瓶课程教育研究
2、酶结合物
1瓶
3、HBsAg阳性对照轨道根数
1瓶
4、HBsAg阴性对照
1瓶
5、洗涤液:用前每瓶作1:20稀释
1瓶
6、显剂(TMB)A
1瓶
7、显剂(TMB)B
1瓶
8、终止液
菲律宾国旗1瓶
【方法】
1、加入待测标本每孔0。05ml,并设HBsAg阳性对照2孔,HBsAg阴性对照2孔,空白对照1孔,然后加入酶结合物每孔1滴(0。05ml、空白对照孔不加),充分混匀后置37℃孵育30分钟.
2、洗板:弃去反应条孔内液体、拍干、用洗涤液注满每孔,弃去拍干,反复五次后拍干。
3、显剂:先加显剂A每孔1滴(0.05ml),然后再加显剂B每孔1滴(0。05ml),混匀,37℃孵育10分钟。
4、每孔加终止液1滴(0.05ml),混匀。
【结果】
比法:波长450nm,先用空白孔校零点,然后读取各孔光密度值.
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样品OD值/阴性对照平均OD值≥ 2.1判断为阳性,否则为阴性.
备注:阴性对照平均OD值低于0。05作0。05计算,高于0。05按实际OD值计算。阳性对照OD值≥0。8,实验结果有效.
【注意事项】
1、试剂盒置2℃~8℃保存。
2、使用前试剂应摇匀,并弃去1~2滴后垂直滴加。
3、从冷藏环境中取出试剂盒内全部瓶装试剂及待测标本所需微孔条,置室温平衡30分钟后再行测试,余者应及时封存于冰箱中以备后用。
4、待测标本不可用NaN3防腐。
5、不同批号试剂请勿通用。
6、结果判断须在10分钟内完成。
7、若浓缩洗涤液出现结晶时,请置37℃至溶解。
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本文发布于:2024-09-23 04:24:58,感谢您对本站的认可!

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