利描
饮用天然矿泉水中糞链球菌检测的能力验证
□李娟张诗惫陈科苏嘉妮广东省食品检验所摘要：本文主要考查本实验室检测人员对矿泉水中粪链球菌的检测能力。方法：用本实验室标准工作菌株粪链球菌 制成合适麦氏浊度的菌悬液，污染待检包装矿泉水，后续按照国标GB 8538-2016 56部分进行检测和鉴定，检测过程设 置阴性对照大肠埃希氏菌。结果：两名检测人员检测结果分别为33CFU/250mL、21CFU/250mL，其对数值之差的绝 对值为0.20，小于0.45。结论：本次人员比对考核结果为满意。 关键词：矿泉水；能力验证；人员比对；粪链球菌
电子病历系统检测人员能力验证是实验室微生物检测质量控制的关键环节，其结果 直接关系到检验报告的准确性和可靠 性。通过能力验证，可以综合判断检测 人员的检测水平，进而体现该实验室 的检测水平。能力验证作为评价实验 室能力的一个重要手段，一直以来受 到国内外实验室管理者的广泛重视[1]。它对于实验室而言是重要的外部质量 保证手段，能增加客户及相关方对实 验室出具可靠数据的信心。
(/S tre p to c o c c u s f aecalis)，又名类肠球菌（£nterococcu^eca&)，
在水、土壤和人畜的体内及粪便中广 泛存在[2]，属于条件致病菌，当机体 抵抗力下降或有其他因素影响时，进 入人体血液或其他部位，可引起尿路 感染、败血症、脑膜炎、化脓性腹部 感染、心内膜炎和腹泻发烧等[3]。该 菌耐热、耐盐，对不利环境的适应性强、抵抗力强，甚至可以抵抗多种抗生素，因此存活力持久、感染性强[4]，与大 肠菌相比，该菌更适合作为水质粪 便污染情况的指标菌，更能客观地反 映水质的卫生状况[5]。本文就包装矿 泉水中粪链球菌的定量检测对本实验 室两名检测人员进行能力验证。
1材料与方法
1.1实验菌株
类链球菌（Sireptococcus
ATCC29212，购自广东省食品微生物安
全工程技术研究开发中心，工作菌株为 3代，大肠埃希氏菌C&cAertc/iia co/〇ATCC25922 购自 Microbiologies，工作 菌株为2代〇
1.2主要试剂与仪器
KF链球菌琼脂培养基(北京陆桥)、脑-心浸萃液态培养基（北京陆桥）、 脑-心浸萃琼脂培养基（北京陆桥），
抽滤设备（Millipore)、无菌滤膜
(Millipore)、恒温培养箱（上海一恒）、
旋涡混合器（IKA)。
1.3检验方法
1.3.1制备菌悬液
用无菌棉签沾取粪链球菌阳性菌
株至3 m L生理盐水管中，测定麦氏浊
度，并进行稀释.
1.3.2阳性污染
博司捷各吸取1 m L菌悬液至250 m L矿
泉水中，混旬。
1.3.3过滤
用无菌镊子夹取0.45 |i m无菌
滤膜至滤床上，固定好无菌滤器，将
250 m L污染样品倒入无菌滤器中，启
动抽滤装置，完成后将滤膜转移到KF
链球菌琼脂培养基上，注意放置时要
避免在滤膜和培养基之间夹留有气泡,
36°C倒置培养48h。
1.3.4计数
记录典型菌落数，粪链球菌在KF
链球菌琼脂培养基上呈红或粉红
菌落。
1.3.5镜检
desire for survival
分别挑取不少于5个典型菌落进
行革兰染，首先挑取菌落涂薄片，
用酒精灯灼烧片刻固定，后用结晶紫
染1 min，自来水冲洗，碘液媒染
1 min，自来水冲洗，95%酒精脱
30 s，自来水冲洗，沙黄复染1 min。
粪链球菌为革兰氏阳性球菌，常排列
成短链状。
1.3.6确证试验
同时接种到脑-心浸萃琼脂培养
基，36 X培养48 h，若有菌生长，进
行3%过氧化氢酶试验，若无气泡产
生，则转接到脑-心浸萃液态培养基
及胆汁液态培养基中，分别于45 X、
36 X培养48 h、3d，观察是否能生
长繁殖。粪链球菌为过氧化氢酶阴性，
在上述培养基中均能生长。
2结果
2.1样品污染
菌悬液麦氏油度为0.51，稀释6倍，
唐县理想中学
各吸取0.7 m L至250 m L待测矿泉
水中。
2.2计数
生命中不能承受之轻电影检测人员A所做的KF平板上典型
菌落数为33个，检测人员B所做的
KF平板上典型菌落数为21个。
2.3镜检
检测人员A挑取的5个典型菌落
均为革兰氐阳性球菌，并排列成短链状
检测人员B挑取的5个典型菌落均为
革兰氐阳性球菌，并排列成短链状。
2.4确证试验
检测人员A挑取的5个典型菌落
在脑-心浸萃琼脂培养基上有生长，
3%过氧化氢酶试验阴性，在脑-心浸
萃液态培养基及胆汁液态培养基中均
能生长繁殖；检测人员B挑取的5个
典型菌落在脑-心浸萃琼脂培养基上有
生长，3%过氧化氢酶试验阴性，在脑-
心浸萃液态培养基及胆汁液态培养基
中均能生长繁殖。
2.5结果与报告
检测人员A的检测结果为33 C FU/
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250mL，检测人员B的检测结果为
21C FU/250mU
3结论
两次独立试验的对数值之差的绝
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56食品安全导刊2018年5月
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