62株奇异变形杆菌的耐药性分析
卢雪明;曾翠兰
【摘 要】目的 检测从临床标本中分离的62株奇异变形杆菌对23种抗菌药物的体外活性以及这些杆菌产生超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶、金属β-内酰胺酶的情况,正确指导临床合理使用抗生素.方法 用API-20E对菌株进行鉴定,双纸片协同试验和确证试验筛选超广谱β-内酰胺酶,纸片扩散法检测AmpC酶,改良Hodge试验检测金属β-内酰胺酶,药敏试验采用标准的纸片扩散法.结果 奇异变形杆菌的产酶率为25.8%(16/62),其中超广谱β-内酰胺酶为16.1%(10/62),AmpC酶为9.7%(6/62)、金属β-内酰胺酶为0(0/62).头孢曲松钠、头孢他啶、头孢匹罗、头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、头孢噻肟钠、丁胺卡那霉素和左氧氟沙星的敏感率大于80%.结论 产β-内酰胺酶的奇异变形杆菌在临床中占较大的比例,实验室需加强检测.三代头孢菌素、四代头孢菌素、氨曲南、亚胺培南、丁胺卡那霉素和左氧氟沙星是奇异变形杆菌感染的首选药物. 【期刊名称】《青岛医药卫生》
【年(卷),期】2010(042)001
花儿为什么这样香
【总页数】3页(P7-9)
【关键词】奇异变形杆菌;药敏试验;β-内酰胺酶;AmpC酶;金属β-内酰胺酶
【作 者】卢雪明;曾翠兰
【作者单位】广州中山大学附属第六医院检验科,510660;广州中山大学附属第六医院检验科,510660
【正文语种】龙牡壮骨冲剂中 文
【中图分类】金瓶梅第一部R378
奇异变形杆菌是泌尿系感染主要病原菌,其尿素酶可分解尿素产氨,使尿液的pH值增高,以利于变形杆菌的生长,碱性环境亦可促进肾结石和膀胱结石的形成。同时高碱性环境对尿道上皮也有毒性作用[1]。所以这种感染具有持久性和难治性。作为机会致病菌的奇异变形杆菌还可以引起伤口、呼吸道、烧伤创面和其他部位的感染,而引起脑膜炎、腹膜炎、败血症和食物中毒等疾病,因此奇异变形杆菌的感染日益受到临床的重视。奇异变形杆菌至少可以产
古典诗词百科描写辞典生3种不同的β-内酰胺酶,分别为超广谱β-内酰胺酶（extended-spectrumβ-lactamases,ESBLs）、AmpC 酶（AmpC β-lactamases）、金属 β-内酰胺酶（metal β-lactamases,MBL）。而抗生素在临床上的广泛应用,导致奇异变形杆菌的耐药率逐渐上升,给带来较大的困难。为了解奇异变形杆菌对临床常用抗菌药物耐药发生频率和监测耐药发展,我们对临床分离的奇异变形杆菌进行了分析。
1 材料与方法
1.1 临床资料
ms-dos1.1.1 菌株来源及鉴定菌株 菌株为2006年3月至2008年2月从广州部分医院门诊及住院患者的各种标本中分离。
1.1.2 细菌鉴定均采用法国生物梅里埃公司的API-20E系统。
1.1.3 培养基 MAC琼脂、血液琼脂为杭州天和微生物制剂有限公司生产;MH琼脂为法国生物梅里埃公司提供的产品。
1.1.4 抗菌药物纸片 阿莫西林、哌拉西林、头孢噻肟钠、头孢他啶、头孢曲松、氨曲南、头孢吡肟、庆大霉素、丁胺卡那霉素、诺氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、氯霉素、呋喃妥因、复方新诺明、阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦、头孢噻肟钠/克拉维酸、头孢他啶/克拉维酸、替卡西林/棒酸、头孢唑啉钠、氨苄西林均购自北京天坛药物生物技术开发公司。亚胺培南为Uxoid公司产品。
1.1.5 质控菌株 大肠埃希氏菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、金黄葡萄球菌ATCC25923。
1.2 操作方法
1.2.1 ESBLs检测采用2种方法 （1）双纸片协同试验:将阿莫西林+克拉维酸纸片置于用受试菌涂布好的MH平板内,然后在其上下左右分别贴上头孢曲松钠、头孢噻肟钠、头孢他啶和氨曲南纸片,置37℃恒温培养箱培养24小时观察结果,如周围的4个纸片中的任何1个与中心纸片之间的抑菌圈扩大或变形,为ESBLs阳性。（2）确证试验:头孢噻肟钠或头孢他啶任何1种抗生素+克拉维酸后其抑菌圈直径的增加值大于5mm为阳性。
poco图客1.2.2 AmpC酶的检测 根据亚胺培南敏感、头孢吡肟敏感或耐药,而头孢吡肟、头孢噻肟钠+克拉维酸和头孢他啶+克拉维酸耐药,或在抑菌圈内存在散在菌落,则判定产AmpC酶阳性。
1.2.3 金属β-内酰胺酶（MBL）的检测 采用改良Hodge试验[2]仅做亚胺培南不敏感菌株,MH琼脂中加入硫酸锌使其最终浓度为70μ g/ml,高压灭菌,倾注平板,将0.5麦氏浓度菌液用棉拭子均匀涂抹于MH平板,每个平板贴2张亚胺培南纸片,纸片中心距离约为5cm,在其中1张亚胺培南纸片旁放一空白无菌滤纸片,两纸片中心距离为1-2.5cm,加 5μ l EDTA-Na2于空白纸片后 ,置 37℃恒温培养箱培养24小时观察结果,如果两纸片之间的抑菌圈有所扩大,则判断为产MBL阳性。
1.2.4 其他药敏试验均采用纸片扩散法（KB） 参照2005年美国临床实验室标准委会推荐的CLSI/NCCIS标准测定。
2 结果
2.1 从广州地区部分医院门诊和住院的患者各种标本中获得62株奇异变形杆菌。这些菌株主要来自尿液和痰液,其次为分泌物,具体情况见表1。
表1 奇异变形杆菌在不同标本中的分布及构成比
2.2 62株奇异变形杆菌对23种抗菌药物的耐药情况 62株奇异变形杆菌对23种抗菌药物均产生不同程度的耐药性,具体情况见表2。
表2 62株奇异变形杆菌对23种抗菌药物的耐药情况
2.3 62株奇异变形杆菌产生超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶、金属β-内酰胺酶的情况 62株奇异变形杆菌中,ESBLs阳性16株。8株头孢噻肟钠/克拉维酸耐药菌株中有6株AmpC酶阳性。1株亚胺培南耐药菌株金属β-内酰胺酶阴性。
3 讨论
3.1 目前变形杆菌属包括已命名的5种（奇异变形杆菌、普通变形杆菌、潘尼变形杆菌、产黏液变形杆菌及hauseri变形杆菌等）和3个变形杆菌复合4,5,6[3]。其中奇异变形杆菌引起的感染有日益增长的趋势,由表1的结果明显可以看出,奇异变形杆菌是泌尿道和呼吸道感染的主要病原菌之一,其在分泌物中的检出率也在增加。这62株奇异变形杆菌多数来自长期住院及重症监护病房患者的临床标本,因此医院需要加强奇异变形杆菌的鉴定及其耐药性的
检测以控制奇异变形杆菌感染在医院的流行。
3.2 近年来由于抗菌药物广泛而大量的使用,病原菌的耐药性日趋严重,不断诱导出新的耐药菌株。新抗菌药物问世不久,就会出现水解它的新的β-内酰胺酶[4],其中质粒介导的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株的比率在逐步升高[5],因此,明确奇异变形杆菌产ESBLs的情况,并建立切实可行的检测方法,对奇异变形杆菌感染的抗菌具有重要的意义。本实验 62株奇异变形杆菌中产酶率为25.8%（16/62）,其中产ESBLs菌株为16.1（10/62）,比意大利报道的24.8%（70/282）低[6],比法国报道的 14.2%高[7]。62株奇异变形杆菌中产AmpC酶的菌株阳性率为 9.7%（6/62）,高于Coudron等[8]的报道。我们采集的奇异变形杆菌产酶率与国外资料的差异可能与国内外使用的抗菌药物不同有关,也可能是地区差异造成的,提醒我们不仅要加强对产ESBLs菌株的监测,更应重视抗菌药物的合理使用问题,以避免抗感染的失败。
3.3 从表2可以看出,奇异变形杆菌对呋喃妥因的耐药率为87.1%,磺胺类的复方新诺明耐药率为77.4%,青霉素类的氨苄西林耐药率为56.5%,阿莫西林的耐药率为37.1%,氨基糖甙类的庆大霉素耐药率为69.4%,氯霉素的耐药率为46.8%,喹诺酮类的诺氟沙星和环丙沙星的耐药
率分别为50.0%和41.9%。这些抗菌药物均未显示良好的抗菌活性,提示由此菌引起的感染,临床不宜选用上述药物。但对青霉素类/β-内酰胺酶抑制剂复合剂的敏感率则大大升高,耐药率为14.5%。奇异变形杆菌对一代头孢类抗菌药物头孢唑啉钠的耐药率为33.9%,故不宜作为经验的首选用药,而三、四代头孢类的耐药率均在20%以下,头孢曲松钠的耐药率为19.4%。碳青霉烯类的亚胺培南在所有检测的抗菌药物中耐药率最低,仅为1.6%,故可作为变形杆菌重度感染及产ESBLs奇异变形杆菌引起感染的经验用药的首选,孙长贵等[9]也有类似结果。氨基糖甙类的丁胺卡那霉素的耐药率为4.8%,仅次于亚胺培南,也可为经验用药所选用。
参考文献
[1]周正任.医学微生物学[M].第6版.北京:人民卫生出版社,2004,181-182
[2]Lee K,Lim Y,Yong D,et al.Evaluation of the hodge test and the imipenem-EDTA double-disk synergy test for differentiating metallo-β-lactamase-producing isolates ofpseudomonas spp and acinetobacter spp[J].J Clin Microbiol,2003,41（10）:4623-4629
[3]M ohr C,Brenner W,Miller JM.Classification,identification,and clinical significance of proteus,providencia,and morganella[J].Clin Microbiol Rev,2000,13（4）:534-546
[4]吕媛,李家泰,单爱莲.β-内酰胺酶抑制剂与内酰胺类抗生素联合应用的抗菌作用评价[J].中国临床药理学杂志,1998,14（1）:53-54
[5]Saurina G,Quale JM,Manikal VM,et al.Antimicrobial resistance in Enterobacteriaceae in Brooklyn,NY:epidemiology and relation to antibiotic usage patterns[J].J Antimicrob Chemother,2000,45（6）:895-898
[6]Chanal C,Bonnet R,Champs CD,et al.Prevalence of β-lactarnases among 1072 clinical strains of proteus mirabilis:a 2-year survey in a French hospital[J].Antimicrob Agents Chernarher,2000,44（7）:1930-1935
[7]Pagani L,Migliavaca R,PallecchiL.Emerging extended spectrumβ-lactamases in proteus mirabilis[J].J Clin Microbio1,2002,40（4）:1549-1552
[8]Coudron PE,Moland ES,T hwnson KS.Occurrence and detection of AmpC beta-lactam
ases among Escherichia coli,klebsiella pneumoniae,and proteus mirabilis isolates at a veterans medical center[J].J Clin Microbiol,2000,38（5）:1791-1796
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