任继欣;岳美玉;郭彦言
【摘 要】目的 对基层医院尿液分离类香味菌属患者的临床实验室特点及菌株的耐药性进行回顾性分析,为临床精准提供依据,减少抗生素滥用.方法 采用法国梅里埃全自动VITEK2 compact及配套试剂对2018年1～12月期间住院患者送检的尿液培养标本进行定量培养、鉴定及药敏分析.结果 2018年度住院患者送检尿液培养标本953份,占全部微生物送检标本(13 239份)的7.20％,检出病原菌300株,阳性率为31.5％,其中分离类香味菌属13株,占阳性标本的4.3％,标本来源:均为危重患者的留置导尿标本,药敏结果显示仅对四环素类药物敏感性较好,对其余多种抗生素高度耐药.结论 该基层医院危重导尿患者尿液标本类香味菌属的分离率及耐药率均较高,应该引起临床高度重视,应合理分析其致病性及临床意义,精准诊断精准,减少抗生素滥用. 【期刊名称】《现代检验医学杂志》
【年(卷),期】2019(034)003
插叙
【总页数】4页(P124-127)
【关键词】类香味菌;耐药性;抗生素
【作 者】任继欣;岳美玉;郭彦言
【作者单位】假如我是一个病人唐山市丰润区中医医院检验科,河北唐山 064000;唐山市丰润区中医医院检验科,河北唐山 064000;唐山市工人医院检验科,河北唐山 063000
【正文语种】中 文
【中图分类】美术教育研究R378;R446.5
类香味菌(Myroides spp)原属黄杆菌属细菌，1996年VANCANNEYT等[1-2]将该菌从黄杆菌属中分离出来，归为新菌属类香味菌属。该菌属为非发酵革兰阴性杆菌，广泛存在于自然环境当中，属于条件致病菌，由气味类香菌、香味类香味菌以及最近发现的新种Myroides injenensis组成，目前的研究资料对其致病性及尚未有明确的定论。通过回顾分析该基层医院住院患者尿液分离类香味菌属的临床实验室特点及耐药性，为临床合理使用抗生素提供依据，现总结报道如下：
1 材料与方法
1.1 研究对象 我院2018年1～12月住院患者送检的尿培养标本。严格用无菌方法留取中段尿或导尿标本于无菌专用尿培养管中，立即送检(<2 h)，去除同一患者相同标本类型的重复株。
1.2 质控来源及种类 温州康泰生物的标准菌株(为-20℃冷冻保存的干粉)种类：大肠埃希菌ATCC25922，金黄葡萄球菌ATCC29213，铜绿假单胞菌ATCC27853，阴沟肠杆菌ATCC 700323，铅黄肠球菌ATCC700327。
1.3 仪器与试剂 法国梅里埃VITEK2 compact全自动微生物鉴定仪及其配套使用的鉴定和药敏卡(中国定制药敏卡：肠杆菌科N334，非发酵菌N335，阳性球菌GP639)，仪器提示药敏结果需要复核时，应使用英国Oxoid药敏纸片，严格按照《全国临床检验操作规程》[3]第四版要求进行，KB法结果参照CLSI最新版标准判读(头孢哌酮/舒巴坦参考头孢哌酮的折点)，所用培养皿为温州康泰生物产品。
1.4 统计学分析 对所有送检尿液培养标本及时处理，离心定量培养，所有操作均严格按照《全国临床检验操作规程》[3]第四版要求和仪器产品的使用说明书进行。
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2 结果
2.1 检出类香味菌属患者的主要临床特点及实验室检查 2018年度住院患者送检尿液标本953份，检出病原菌300株，阳性度为31.5%。检出13株类香味菌，其中9株来自ICU重症病房，4株来自肾病科，均为年龄偏大免疫力低下、重症衰竭的导尿患者，留取尿液培养标本时均无发热，体征平稳，患者的炎症相关因子及尿常规结果均正常者有10例，其余3例C反应蛋白稍高，介于10～20 mg/L之间，白细胞总数在(9.8～12.0))×109/L，尿白细胞(+)。13株类香味菌属患者的临床实验室特点见表1。
表1 13株类香味菌属患者的临床实验室特点患者编号性别年龄(岁)炎症相关因子白细胞总数[(3.5～9.5)×109/L]中性粒细胞浓度[(1.8～6.3)×109/L]C反应蛋白(0～10mg/L) 尿常规结果降钙素原(0～0.5ng/L)白细胞尿干化白细胞尿沉渣(女:0～39/μl,男0～9.2/μl)12345678910111213男男男男女女女男男男女男女526385867375927393936591684.8911.765.126.794.899.815.569.128.8110.717.114.696.323.716.713.123.512.585.813.835.415.616.314.322.723.715.4912.72.435.683.8911.96.876.015.6113.84.797.153.89 0.120.450.230.020.060.390.170.070.190.410.230.330.19±+1±-±+1±--+1±±±10.231.314.26.541.980.546.211.613.459.540.615.241.1涿州市财政局
注：以上患者均是有基础疾病的导尿患者，均无发热、生命体征平稳；血细胞检测仪器：西门子ADVIA 2120i，尿常规仪器：希森美康Sysmex UF-1000i。
2.2 细菌培养鉴定结果 在35℃有氧条件下孵育24 h后，血平板上出现具有特殊芳香气味的浅黄、中等大小、光滑湿润、边缘整齐有光泽的菌落，中国兰平板上出现细小、黄半透明菌落，菌落计数>105CFU/ml，革兰染阴性杆菌，VITEK2 compact GN鉴定卡的生物编码为3种：5042000200040000，5042000300040000，50420023 00040000，结果为Myroides spp(97.0%)极好的鉴定，基本的生化反应：氧化酶(+)、尿素酶(+)、磷酸酶(+)、脂酶(+)、谷氨酰芳胺酶(+)、络氨酸芳胺酶(+)等。
2.3 药物敏感试验结果 分离的13株类香味菌属对多种抗生素包括氨基糖甙类，喹诺酮类、头孢类及其含酶抑制剂复方制剂、黏菌素、单环类全部耐药，对碳青霉烯类药物高度耐药，只对四环素类药物敏感性较好，替加环素和米诺环素均为敏感。
3 讨论 类香菌属是一种寄居环境的特定细菌，常从潮湿的环境、泥土、昆虫肠道以及海水中分离出来，可引起免疫缺陷患者的尿路感染、蜂窝织炎、败血症、肺炎、脑膜炎、筋膜炎及静脉炎等感染性疾病[4]。近年国内外已多有报道，国内刘静娴等[5]曾报道过尿路感染
右肾造瘘分离出一株香味类香味菌，解春宝等[6]也曾对临床分离的类香味菌属的耐药谱进行总结分析。本篇报道虽然在时间和地域上与其它报道存在差异，但分析结果与已有的资料基本符合，不足之处是本报道未能对所有检出的类香味菌属进行质谱或者PCR测序鉴定到种，所以种间的耐药性是否存在差异还有待于进一步的探讨研究。
本研究显示该院2018年度从尿液(导管尿)培养中分离出13株类香味菌属，占尿培养阳性标本的4.3%，且菌株集中分布在ICU和肾内科，病患年龄偏高，男女比例无差异，且均具有基础疾病、免疫力低下、留置导尿，推测长期留置导尿管可能是一个促成此菌感染或定植的媒介，导尿管可以作为类香菌属感染的一个独立危险因素，这与相关报道[7]基本吻合。 类香菌属本身有很强的黏附能力，对免疫正常的宿主亦具有一定的侵袭能力[8]，还曾有报道在食肉蝇的胃肠道中分离出多重耐药的类香菌属[9]，回顾我院的检出病例并未发现有此特性。
本研究中13株类香味菌病患的实验室检查显示：有10例病患，在导管尿中培养出类香味菌属同时，尿液常规检查中均未出现白细胞，其它炎性指标也趋于正常，仅3例患者尿白细胞(+)，白细胞总数在(9.8～12.0)×109/L，但尿白细胞(+)有可能是由于导尿和留置尿管致尿道
机械性损伤而引起的机体反应[10]。13例患者各项生命体征平稳，无发热，说明类香味菌属并未侵犯泌尿系统黏膜造成感染，曾有陈杏春等[11]报道芳香黄杆菌是可以事先附着在受污染导管中，或者环境中的芳香黄杆菌可以沿着导管进入插在体内的管腔，逆行生长繁殖，类香味菌是近年从芳香杆菌属中独立出来的新菌属，由此可以推断也可能具备这一特性。因此要求临床医生在尿液标本中(尤其导尿标本)培养出类香味菌属时，应结合患者近期全部的实验室检查资料、临床表现、症状体征等综合考虑是否为导管内的定植或感染，重新评估导尿管的使用，必要时予以更换或拔除，复查尿液培养结果等，正确评估其临床意义以及抗生素的必要性。
本研究中13株类香味菌的药敏结果显示：对氨基糖甙类、喹诺酮类、头孢类及某些含酶抑制剂复方制剂、呋喃妥因、氨曲南、黏菌素呈100.0%全耐药，对碳青霉烯类、磺胺类药物的耐药高达92.31%，刘婧娴等[5]报道发现了类香味菌金属酶抑制试验阳性，再通过PCR及测序等方法证实该菌株携带有blaMUS-1基因，有学者们推测该菌还有其他机制导致其多重耐药性，如外泌体、质粒、膜孔蛋白等[12]，也有报道指出当培养的药敏结果提示为广泛耐药时，尽管体外药敏试验多提示对碳青霉烯类抗生素耐药，但在联合方案中加入亚胺培南或美罗培南仍可取得满意的疗效[13]。
综上所述，临床医生应提高对类香味菌属致病性的认识，多学习多了解医学前沿知识并取他人之长，来提高自身的诊疗水平，争取做到精准诊断、精准用药、精准，以减少抗生素的滥用和细菌耐药性的发生。
参考文献：
【相关文献】
视觉点胶系统[1] VANCANNEYT M， SEGERS P， TORCK U，et al．Reclassification of Flavobacterium odoratum(Stutzer 1929) strains to a new genus，Myroides，as Myroides odoratus comb．nov．and Myroides odoratimimus sp．nov[J]．International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology，1996，46：926-932．
[2] KIM D S，PAEK J，SHIN J H，et al．Genome sequence of Myroides injenensis M09-0166(T)，isolated from clinical specimens[J]．J Bacteriol，2012，194(10)：2748-2749．
[3] 尚红，王毓三，申子瑜．全国临床检验操作规程[S]．4版．北京：人民卫生出版社，20
15：322-324．
SHANG Hong，WANG Yusan，SHEN Ziyu．National guide to clinical laboratory procedures[S]．4th Ed．Beijing：People’s Medical Publishing House，2015：322-324．
[4] BENEDETTI P，RASSU M，PAVAN G，et al．Septic shock，pneumonia，and soft tissue infection due to Myroides odoratimimus：report of a ease and review of Mroides infections[J]．Infection，2011，39(2)：161-165．
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