国家安全委员会1 常⽤名词解释
酶活⼒(enzyme activity)也称酶活性，是指酶催化⼀定化学反应的能⼒。酶活⼒的⼤⼩是⽤酶的单位数来表⽰。
酶活性单位：在⼀定条件下(PH，温度，反应体系等)，使酶反应速率达到某⼀值所需要的酶量，这⼀速率就是指单位时间内转化底物的变化量。 国际酶活性单位(IU)：酶反应最适条件下(最适温度、最适pPH值等)，每分钟催化1μmol底物转化所需要的酶量。酶量表⽰为IU/mL或者
IU/g。
⾃定义单位：在很多情况下我们可以根据酶活⼒的定义和实际情况进⾏⾃定义酶活性单位。⽐如在⼀定条件下，催化转化1μg底物所需要的酶量定义为⼀个酶活性单位。
⽐酶活：⽐活⼒ 为每毫克蛋⽩质所具有的酶活⼒单位数，⼀般⽤酶活⼒单位/mg蛋⽩质表⽰。酶的⽐活⼒在酶学研究中⽤来衡量酶的纯度，对于同⼀种酶来说，⽐活⼒越⼤，酶的纯度越⾼。利⽤⽐活⼒的⼤⼩可以⽤来⽐较酶制剂中单位质量蛋⽩质的催化能⼒，是表⽰酶的纯度⾼低的⼀个重要指标。
酶促反应速率：单位时间内转化底物的量，影响酶促反应速率的因素有温度，pH，底物浓度，酶量，促进剂和抑制剂等。单位根据酶活性单位定义决定。在其他条件⼀定的情况下，酶促反应速率和底物的浓度可⽤⽶⽒⽅程来解释和诠释。在后续会有详细说明。
初速率：酶反应的初速度即为底物消耗量很⼩(⼀般在5％以内)时的反应速度。在该阶段，酶的反应速率和酶量成正⽐，和底物浓度⽆关，酶初反应速率最⼤，因此酶活性测定⼀般选择酶促反应初速率计算。 2 酶活性测定原理
酶活性测定原理：
根据酶活⼒单位的定义，可以看出，我们需要测定酶的催化反应速率。酶的反应速率可以⽤单位时间内底物的减少和产物的增加来表⽰。⼀般情况下，产物和底物的该变量(mol或者μmol)是⼀致的，因此理论上⽤两者都可以计算酶的反应速率。但是，由于实际情况，底物的浓度是过量的，⽽为了测定初速度，反应时间往往⽐较短，也就是底物的转化⽐例往往较低，这就增加了检测的系统误差。⽽产物是从⽆到有的过程，系统误差⽐较⼩，所以⼀般检测反应产物，但是在产物没有办法测定时，还是会⽤底物的转化率来测定。
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2 酶活性测定⽅法
按照仪器检测⽅法分：分光光度法，浊度法，荧光法，⾼效液相⾊谱法，电极法，电位滴定法，量⽓法，放射性核素法。根据底物的特性，选择恰当的⽅法，仪器优选简单的设备，⽅便推⼴应⽤。优选检测通量⾼的设备，能够快速⾼通量测定样品。我们平常⽤的最多的设备就是分光光度法，也是最为成熟的体系。
按照反应时间分：定时法，连续监测法和平衡法。
固定时间法：测定酶促反应开始⼀段时间内底物的减少量或者产物的增加量，从⽽来计算酶活性。固定时间法⼜可以分为：终点法(0-t)和两点法(t1-t2)。
优点：简单；缺点：难以确定反应时间内，是否处于线性期。固定时间段所选时间不宜过长。
连续监测法：测定底物和产物随时间的变化量，⼜称速率法。该⽅法每隔⼀定时间(10s-60s)测定⼀次底物或者产物的变化量，连续测定多点，然后将测定结果对时间作图，汇制反应速率曲线。计算酶活性。
优点：能动态反应酶促反应的进程，可以明显到反应的线性期，结果可靠，样品和试剂⽤量少，可在短时间内完成测试。
缺点：要求能精确控制温度，PH，温度，底物浓度等条件，检测指标要能在线测得。
按照检测对象分：直接法和间接法(⼀步间接法，酶偶联法)。
超固态
例如葡萄糖氧化酶的测定⽅法：会⽤到过氧化氢酶的作⽤，检测氧化型领联茴⾹胺的含量来计算葡萄糖氧化酶的活性。碳化硅粉
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