肽核酸探针在微生物诊断领域中的应用中央人民政府政务院
肽核酸（PNA）是近年发展起来的一种脱氧核糖核酸类似物，其可通过与DNA以及RNA进行特异性结合，制成探针，被称为PNA探针。相较于DNA探针，其特异性以及稳定性均有所增加，可以大幅度提高微生物学检测的灵敏度，也可以提高诊断效率，对PNA探针进行继续研究十分具有临床价值。
标签：肽核酸；探针；微生物；诊断牙密
2012北京高考理综肽核酸是1991年由丹麦科学家Nielsen等设计的以中性酰胺键为骨架的DNA类似物，其骨架结构单元为（2-氨乙基）甘氨酸，碱基部分通过亚甲基碳基与主骨架氨基连接，可以与DNA特异性结合[1]。其骨架为电中性，与DNA-DNA或RNA-DNA相比不存在静电排斥作用，因此具有很高的核酸亲和性及热稳定性。目前根据不同微生物的特点和诊断方法的要求进行微生物快速诊断主要有三种策略：①分离培养后快速鉴定；②短时间富集后检测；③林丹自传直接检测。针对rRNA的PNA探针已经成功运用于以上三种方式，而且能够提供了更快速准确的结果，并在此基础上发展出多种检测模式，如基于玻片的荧光原位杂交，基于滤膜的荧光原位杂交、化学发光原位杂交、液相杂交、Q-PNA PCR等。随着以rRNA多态性为基础的微生物分类学 的发展，两者结合正在共同推进微生物诊断技术的快速发展。
1 PNA技术纪泽希
1.1 PNA探针 PNA特殊的结构和性质使其作为探针在微生物诊断领域显示出独特的优势。PNA探针一般是指序列长度为13～18bp的寡聚PNA，其长度比DNA探针短。电中性的骨架使PNA具有比DNA更高的杂交亲和性和碱基配对特异性，并可以通过单碱基错配来分辨不同的核酸序列。PNA探针杂交条件也比DNA探针温和，低离子浓度下也可以发生杂交，且能够抵抗核酸酶和蛋白酶的降解。 黑斑息肉病
1.2自身报告的PNA探针 LightUp探针和LightSpeed探针是荧光标记的PNA探针，LightUp探针是偶联有唾哇橙染料的PNA探针，LightSpeed探针是双标记的PNA探针，即在PNA分子的两端分别联上荧光染料和淬灭剂。在水溶液环境中，LightSpeed探针的构象使荧光染料和淬灭染料彼此靠的很进，荧光被淬灭。当探针与靶序列结合时，荧光剂和淬灭剂在空间上得到分开，使PNA的荧光染料发出荧光。LightUp探针在非杂交状态下是内在非荧光的，当探针与靶序列结合时发出荧光，但这种发光效应与PNA的序列有很大程度的相关性，目前这种关系机制还没有完全清楚。这两种探针都可以用于实时PCR分析，并且具有
很高的敏感性和特异性。
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