·基础研究
·
马小华１，刘爱凤２，刘姝灵１，向延根１
（南华大学附属长沙中心医院，１．检验科，２．病理科，湖南长沙４１０００４）
ＤＯＩ：１０．１１７４８／ｂｊｍｙ．ｉｓｓｎ．１００６－１７０３．２０２０．１１．０２８收稿日期：２０２０ ０７ ３１；修回日期：２０２０ ０９ １８
基金项目：湖南省卫生健康委科研计划项目资助（编号：２０２０１８２７）
作者简介：马小华（１９８３—），男，硕士，主管技师。研究方向：结核病耐药机制研究。
通讯作者：向延根（１９６３—），男，硕士，主任技师。研究方向：临床微生物学。Ｅ ｍａｉｌ：ｘｉａｎｇｙａｎｇｅｎ＠１２６．ｃｏｍ 摘要：目的 探讨非结核分枝杆菌（ｎｏｎｔｕｂｅｒｃｕｌｏｕｓｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ，
ＮＴＭ）在区域内分布及常见菌种药敏结果，为临床ＮＴＭ病提供用药参考。方法 采用基因芯片法进行ＮＴＭ菌种鉴定，对不同类型菌种进行归类，并采用微量稀释法进行ＮＴＭ药物敏感试验，依据ＣＬＳＩ标准判断结果，计算药物对细菌的ＭＩＣ５０和ＭＩＣ９０值，分析药敏结果。结果 成功鉴定出８种ＮＴＭ菌种，包括鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌、龟分枝杆菌或脓肿分枝杆菌、偶然分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、戈登分枝杆菌、蟾蜍分枝杆菌和土分枝杆菌。其中以鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌和龟分枝杆菌或脓肿分枝杆菌为主，分别占２５．３％、２９．１％和３０．４％。鸟分枝杆菌对利奈唑胺、阿米卡星药物敏感性均为１００％，对利福平、克拉霉素、莫西沙星和利福布丁等药物敏感性均在８０％以上；胞内分枝杆菌对莫西沙星、利奈唑胺、阿米卡星等药物敏感性达８０％以上，其次对利福平、利福布丁和克拉霉素敏感性达到７ ０％以上；龟分枝杆菌或脓肿分枝杆菌对阿米卡星敏感性达９３．７％，对克拉霉素和利奈唑胺敏感性均为６２．５％。结论 明确了ＮＴＭ在本地区的菌株分布和常见ＮＴＭ菌种的药敏结果，为临床提供理论依据。关键词：基因芯片； 非结核分枝杆菌； 药敏模式中图分类号：Ｒ３７２ 文献标识码：Ａ
ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＮｏｎｔｕｂｅｒｃｕｌｏｕｓＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍａｎｄＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＤｒｕｇ
ＲｅｓｉｓｔａｎｃｅＰａｔｔｅｒｎｓｏｆＤｉｆｆｅｒｅｎｔＳｔｒａｉｎｓＢａｓｅｄｏｎＧｅｎｅＣｈｉｐ
ＭＡＸｉａｏｈｕａ１，ＬＩＵＡｉｆｅｎｇ２，ＬＩＵＳｈｕｌｉｎｇ１，ＸＩＡＮＧＹａｎｇｅｎ
１
（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙ，ＴｈｅＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＣｈａｎｇｓｈａＣｅｎｔｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌ，
ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｏｕｔｈＣｈｉｎａ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０００４，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎａｎｄｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｐａｔｔｅｒｎｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｎｏｎ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ
ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌ（ＮＴＭ）ｓｔｒａｉｎｓｉｎｔｈｅｒｅｇｉｏｎｉｎｏｒｄｅｒｔｏｐｒｏｖｉｄｅａｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆＮ
ＴＭ
ｄｉｓｅａｓｅ．
ＭｅｔｈｏｄｓＮＴＭｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙａｇｅｎｅｃｈｉｐｍｅｔｈｏｄａｎｄｗｅｒｅｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔｌｙｃｌａｓｓｉｆｉｅｄ，ａｎｄＮＴＭｄｒｕｇｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｔｅｓｔｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｂｙｍｉｃｒｏｄｉｌｕｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅｅｖａｌｕａｔｅｄａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏ
ＣＬＳＩｓｔａｎｄａｒｄ
，ａｎｄｔｈｅＭＩＣ５０ａｎｄＭＩＣ９０ａｎｄｄｒｕｇｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｔｅｓｔｏｆｖａｒｉｏｕｓｄｒｕｇｓｔｏｂａｃｔｅｒｉａｗｅｒｅｃａｌｃｕｌａｔｅｄ．ＲｅｓｕｌｔｓＥｉｇｈｔｋｉｎｄｓｏｆＮＴＭｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ，ａｎｄｔｏｐｔｈｒｅｅｏｆｔｈｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ
ａｖｉｕｍ，Ｍｙ
ｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅ，ａｎｄＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｃｈ
ｅｌｏｎａｅ／ａｂｓｃｅｓｓ，ａｃｃｏｕｎｔｅｄｆｏｒ２５．３％，２９．１％ａｎｄ３０．４％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍａｖｉｕｍｗａｓ１００％ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅｔｏｌｉｎｅｚｏｌｉｄａｎｄａｍｉｋａｃｉｎ，ｆｏｌｌｏｗｅｄ
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０％ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅｔｏｒｉｆａｍｐｉｃｉｎ，ｃｌａｒｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ，ｍｏｘｉｆｌｏｘａｃｉｎａｎｄｒｉｆａｂｕｔｉｎ．Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｗａｓｍｏｒｅｔｈａｎ８０％ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅｔｏｍｏｘｉｆｌｏｘａｃｉｎ，ｌｉｎｅｚｏｌｉｄ，ａｎｄａｍｉｋａｃｉｎ，ｆｏｌｌｏｗｅｄｂｙ７０％ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ
ｔｏｒｉｆａｍｐｉｃｉｎ
，ｒｉｆａｂｕｔｉｎａｎｄｃｌａｒｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ．Ｔｈｅｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｓｏｆｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｏｆａｍｉｋａｃｉｎ，ｃｌａｒｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎａｎｄｌｉｎｅｚｏｌｉｄｔｏＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｃｈｅｌｏｎａｅ／ａｂｓｃｅｓｓｗｅｒｅ
９２．７％，６２．５％ａｎｄ６２．５％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＡ
ｂｅｔｔｅｒｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇｏｆｔｈｅｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｆｏｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔＮＴＭｓｔｒａｉｎｓｉｓｂｅｎｅｆｉｃｉａｌｆｏｒｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆ
ＮＴＭｄｉｓｅａｓｅ
，ｗｈｉｃｈｃａｎｓｅｒｖｅａｓａｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｄｒｕｇｕｓｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｇｅｎｅｃｈｉｐ； Ｎｏｎｔｕｂｅｒｃｕｌｏｕｓｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ； Ｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｐａｔｔｅｒｎ
非结核分枝杆菌（ＮＴＭ）指除了结核分枝杆菌复合、麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌的总称，又称为非典型分枝杆菌［１］。根据其生长条件不同，将其分为快速生长型分枝杆菌和慢速生长型分枝杆菌。ＮＴＭ引发的感染未列入国家法定传染病中，尚未引起人们对ＮＴＭ病的足够重视［２］。随着实验室检测技术的提高，ＮＴＭ分离率逐年提高［３］，在发达国家，ＮＴＭ肺病发生率高于结核病。本课题组前期统计ＮＴＭ平均检出率为８．４％，从２０１２年６．２％上升至２０１７年１１．３％［４］。ＮＴＭ为条件致病菌，广泛分布于自来水等环境中［５］，检出ＮＴＭ并不意味着致病，需连续多次检出同一种菌及结合相关的临床症状才能确诊。目前认为ＮＴＭ病常见的感染部位累及肺部、皮肤、骨髓和软组织等［６］。ＮＴＭ病的诊断与菌种有关，美国胸科协会发布的ＮＴＭ
肺部诊断标准认为脓肿分枝杆菌、鸟胞内分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌等为常见致病菌。段鸿飞［７］认为ＮＴＭ与临床疾病相关性最关键的一步是将ＮＴＭ鉴定到种水平。由此可见，菌种鉴定是临床诊断并ＮＴＭ病中最为重要的环节。
ＮＴＭ病药物的选择是临床急切需要解决的问题。ＮＴＭ病现已经成为国际上的公共卫生问题，疾病疗程很长，药物不良反应大，效果也不理想，已经成为临床医师的“心病”［８］。美国感染病协会（ＩＤＳＡ）和美国胸科协会（ＡＴＳ）推荐ＮＴＭ前应该进行药物敏感试验，以指导临床合理用药。对于ＮＴＭ药敏试验，非结核分枝杆菌病实验室诊断专家共识强调，虽然美国临床与实验室标准化研究所（ＣＬＳＩ）对于菌种有推荐的临界浓度和药敏方法，但是仍有待于临床进行充分评估［１］。本研究采用基因芯片进行ＮＴＭ菌种鉴定，采用ＣＬＳＩ推荐的药物及方法对不同菌株进行药物敏感试验，以期了解ＮＴＭ对ＣＬＳＩ推荐的各种药物的耐药程度，为临床合理用药提供参考。
材料和方法
１ 研究对象
回顾性分析２０１９年６月至２０１９年１２月就诊于南华大学附属长沙中心医院怀疑结核病的患者痰液、灌洗液。经ＭＩＧＩＴ９６０培养阳性，同时选择经基因芯片和非结核分枝杆菌药物实验鉴
定为ＮＴＭ的菌株。 ２ 主要仪器和试剂
本研究所用仪器［９］，分别为Ｅｘｔｒａｃｔｏｒ３６核酸快速提取仪、基因扩增仪（ＰＣＲ）、ＢｉｏＭｉｘｅｒＴＭⅡ芯片杂交仪、ＳＬｉｄｅＷａｓｈｅｒＴＭ芯片洗干仪和ＬｕＳｃａｎ１０Ｋ Ｂ微整列芯片扫描仪，均为北京博奥生物有限公司产品；ＨＢ １００型干式恒温金属浴为上海之信器有限公司生产；Ｈ１６５０ Ｗ型高速台式离心机为湖南湘仪有限公司产品；ＦＸ １２００ Ｂ２型生物安全柜为上海瑞仰净化装备有限公司产品；基因芯片配套试剂为北京博奥生物有限公司产品；细菌超声分散计数仪购于广东希格生物技术有限公司；非结核分枝杆菌药敏试剂盒（批号：２００６１５１）为珠海银科公司产品。
３ 基因芯片法鉴定ＮＴＭ菌种
菌种基因具体操作［１０］，如下：（１）ＤＮＡ提取：挑取改良罗氏培养基阳性菌株并调整菌液浓度约１个麦氏单位，取２０μＬ菌液加于８０μＬ的核酸裂解液中充分震荡混匀１０ｍｉｎ，置１００℃金属浴充分裂解１０ｍｉｎ，１２０００ｒ／ｍｉｎ离心１ｍｉｎ，上清即为待测模板。（２）基因扩增：吸取１８μＬ复温的菌种扩增试剂加入八连管中，加入２μＬ待测模板，置配套扩增仪中扩增，扩增条件设为：３７℃６００ｓ；９４℃６００ｓ；９４℃３０ｓ，６０℃３０ｓ，７２℃４０ｓ，共３５个循环；９４℃３０ｓ，７２℃６０ｓ，共１０个循环；７２℃４２０ｓ延伸。（３）基
因杂交：杂交前，将扩增产物进行９５℃变性５ｍｉｎ，迅速移至－２０℃５ｍｉｎ冰箱，即为待测产物。杂交时，将９μＬ杂交缓冲液与６μＬ基因扩增产物按比例混合，取１３．５μＬ混合液加入芯片加样孔中，置入杂交仪中５０℃杂交２ｈ。杂交完成后，进行芯片洗涤和干燥，扫描芯片及分析结果。
夺命钱
４ 非结核分枝杆菌药物敏感试验
４．１ 非结核分枝杆菌药物敏感试验 ＮＴＭ药敏试验严格按说明书操作，简要操作如下：（１）取出杂菌抑制剂、药敏培养基和９６孔药敏测试板，使其恢复室温，吸取２００μＬ杂菌抑制剂加入到药敏培养基，充分混匀；（２）无菌吸头吸取１８０μＬ药敏培养基加入到Ｅ１、Ｆ１孔，作为１／１０和１／１００参照孔，同时吸取２００μＬ药敏培养基到Ａ１和Ｂ１，作为阴性对照；（３）采用细菌超声分散仪调整菌株浓度至１ｍｇ／ｍＬ，吸取２００μＬ加到整支药敏培养基中，混匀，每孔吸取２００μＬ到其余各孔（除上述４孔外），再吸取２０μＬ含菌液培养基至Ｅ１孔做１／１０参照孔，从Ｅ１孔吸取２０μＬ到Ｆ１孔做１／１００参照孔，盖上盖子，用透明胶带沿周边封一圈后，置３７℃培养。
４．２ 结果判读 接种后第３天开始观察结果，当阳性对照孔（Ｅ１和Ｆ１）孔底出现白沉淀时，而阴性对照孔（Ａ１和Ｂ１）不生长时，进行其余药物孔结果判读，记录每个药物的ＭＩＣ值，ＭＩＣ值为无白沉淀的最低药物浓度孔。若阳性对照孔不生长，则
继续培养并每隔１～２ｄ观察一次结果，直到２１ｄ。药物耐药折点严格按照ＣＬＳＩ标准进行判断。详见表１和表２。
表１ 推荐快速生长分枝杆菌肉汤稀释法折点判断
抗菌药物
ＭＩＣ（μｇ／ｍＬ）
敏感中敏耐药
阿米卡星≤１６３２≥６４头孢西丁≤１６３２～６４≥１２８克拉霉素≤２４≥８多西环素≤１２～４≥８米诺环素≤１２～４≥８利奈唑胺≤８１６≥３２莫西沙星≤１２≥４妥布霉素≤２４≥８
表２ 推荐慢性生长分枝杆菌肉汤稀释法折点判断
抗菌药物
ＭＩＣ（μｇ／ｍＬ）
敏感中敏耐药
阿米卡星≤１６３２≥６４利福平≤１－≥２乙胺丁醇≤２４≥８利福布丁≤２－≥４复方新诺明≤３２－≥６４克拉霉素≤８１６≥３２莫西沙星≤１２≥４利奈唑胺≤８１６≥３２米诺环素≤１２～４≥８多西环素≤１２～４≥８ 注：－表示无耐药折点 ５ 统计学处理
采用ＥＸＣＥＬ２００７收集数据，并严格根据ＣＬＳＩ标准对各ＮＴＭ菌株进行药物敏感性判读，将细菌对药物的敏感性用敏感比例、中敏比例和耐药比例进行分类。
结 果
１ 非结核分枝杆菌菌种鉴定
本次随机选择的ＮＴＭ中快速生长分枝杆菌以龟分枝杆菌或脓肿分枝杆菌为主，占３０．４％，慢速生长分枝杆菌以鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌为主，占２９．１％和２５．３％。此外，尚分离出少量分枝杆菌如偶然分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌等，由于菌株数较少，并没有纳入后续的药敏统计。菌种鉴定结果分布及基因芯片结果详见表３和图１。
表３ 菌种鉴定结果分布图
菌种例数构成比（％）龟或脓肿分枝杆菌２４３０．４
胞内分枝杆菌２３２９．１
鸟分枝杆菌２０２５．３
偶然分枝杆菌４５．１
土分枝杆菌３３．８
蟾蜍分枝杆菌２２．５
堪萨斯分枝杆菌１１．２
戈登分枝杆菌１１．２
总计７８１０
０
（续图１
）
注：Ａ鸟分枝杆菌；Ｂ胞内分枝杆菌；Ｃ龟或脓肿分枝杆菌；Ｄ戈登分枝杆菌；Ｅ土分枝杆菌；
Ｆ堪萨斯分枝杆菌；Ｇ蟾蜍分枝杆菌；Ｈ偶然分枝杆菌
图１ ＮＴＭ菌种鉴定结果代表性图
２ 龟分枝杆菌或脓肿分枝杆菌药物敏感试验 本研究选择ＣＬＳＩ推荐的具有耐药折点的药物，其药敏试验结果见表４。结果显示，对阿米卡星和克拉霉素的敏感性分别达９３．７％和６２．５％。本研究中１６株菌株对多西环素、米诺环素和妥布霉素的耐药性均在９３％以上。
表４ 龟分枝杆菌或脓肿分枝杆菌药物敏感试验
（％，ｎ＝１６）
药物ＭＩＣ范围（μｇ／ｍＬ）敏感比例中敏比例
沈阳体育学院学报
耐药比例阿米卡星１～６４９３．７０６．３头孢西丁４～１６０３１．３４３．７２５．０克拉霉素０．５～６４６２．５６．３３１．２多西环素０．５～１２８００１００．０米诺环素０．５～１２８００１００．０利萘唑胺０．５～３２６２．５０３７．５莫西沙星０．１２５～１６６．３２５６８．７妥布霉素
０．５～６４
６．３
０
９３．７
３ 胞内分枝杆菌药物敏感试验结果
本研究选择ＣＬＳＩ推荐的具有耐药折点的药物，其药敏试验结果见表５。结果显示，胞内分枝杆菌对莫西沙星、利奈唑胺、阿米卡星等药物的敏感性达８０％以上，其次是对利福平、利福布丁和克拉霉素的
敏感性达到７
０％以上。胞内分枝杆菌对多西环素和米诺环素耐药性达到９０％以上。
表５ 胞内分枝杆菌药物敏感试验结果（％，ｎ＝２０）
药物ＭＩＣ范围（μｇ／ｍＬ）敏感比例中敏比例
耐药比例利福平１～１６７０－３０克拉霉素０．５～６４７５０２５莫西沙星０．１２５～１６８
５５１０多西环素０．５～１２８０１０９０米诺环素０．５～１２８１００９０磺胺甲唑８～２５６４０－６０利萘唑胺０．５～３２８５０１５阿米卡星１－６４９５０５乙胺丁醇２．５～２０５００５０利福布丁
０．５～３２
７５％
－
２５
注：
－表示该药物在ＣＬＳＩ上没有药物临界折点 ４ 鸟分枝杆菌药物敏感试验结果
本研究选择ＣＬＳＩ推荐的具有耐药折点的药物，其药敏试验结果见表６。结果显示，鸟分枝杆菌对利奈唑胺、阿米卡星药物敏感性均为１００％，对利福平、克拉霉素、莫西沙星、乙胺丁醇和利福布丁等药物敏感性均在８０％以上，对多西环素、米诺环素耐药性则达到８０％以上。由此可见，临床在选择药物鸟
分枝杆菌引起的感染时，可选择对其敏感的药物。
表６ 鸟分枝杆菌药物敏感试验结果（％，ｎ＝１５）
药物ＭＩＣ范围
（μｇ／ｍＬ）
敏感比例中敏比例耐药比例
利福平１～１６８６．７－１３．３
克拉霉素０．５～６４９３．３６．７０
莫西沙星０．１２５～１６８６．６６．７６．７
多西环素０．５～１２８６．７０９３．３
米诺环素０．５～１２８６．７１３．３８０．０
磺胺甲唑８～２５６６０．０－４０．０
利萘唑胺０．５～３２１００．０００
阿米卡星１～６４１００．０００
乙胺丁醇２．５～２０８０．０６．７１３．４
利福布丁０．５～３２９３．３－６．７
注：－表示该药物在ＣＬＳＩ上没有药物折点
讨 论
我国ＮＴＭ的分离总体情况是南方高于北方，沿海高于内陆，气候温和区域高于气候寒冷区域。ＮＴＭ广泛分布于环境中，属于条件致病菌。临床分离出ＮＴＭ并不意味着致病，必须排除定值菌或污染菌［１１］。ＮＴＭ引起的疾病涉及全身，其中肺部疾病占９０％。不同国家ＮＴＭ流行的菌种类型不同［１２ １３］，其致病性也存在差异，如蟾蜍分枝杆菌在加拿大和欧洲致病性强于在美国，胞内分枝杆菌和鸟分枝杆菌致病性在荷兰和美国恰恰相反［１］。因此，了解ＮＴＭ的耐药模式对于临床ＮＴＭ病至关重要。目前ＮＴＭ药敏试验在基层实验室尚未广泛开展，以往的报告模式仅仅采用ＭＴＢ模式报告。因此，根据菌种进行ＮＴＭ药敏试验是制定ＮＴＭ方案的重要依据。本研究为进一步落实ＣＬＳＩ界定的药物的临界点划分对ＮＴＭ敏感性研究，首先对所选的ＮＴＭ采用基因
芯片法进行菌种鉴定，然后将鉴定出的菌种进行药敏试验，结果严格按照ＣＬＳＩ标准判读，以便了解不同ＮＴＭ菌种对ＣＬＳＩ推荐药物进行评估。
繁峙秧歌 本研究所选用的菌株均来自２０１９年６月份以来分离并鉴定为ＮＴＭ，经基因芯片法鉴定出具体某种。本次主要选择鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌和龟分枝杆菌或脓肿分枝杆菌作ＮＴＭ药敏试验。对于鸟分枝杆菌引起的疾病，指南推荐未经的鸟胞内分枝杆菌进行克拉霉素体外试验，而临床上推荐包含克拉霉素在内的至少２种以上抗生素联合［１４］。本研究中，鸟分枝杆菌对克拉霉素较为敏感，与文献报道基本一致［１５ １６］。此外，鸟分枝杆菌对利福平、莫西沙星、利奈唑胺、阿米卡星和利福布丁也有较好的敏感性。胞内分枝杆菌对克拉霉素敏感性稍差于鸟分枝杆菌，对莫西沙星、利奈唑胺、阿米卡星等药物较为敏感，对利福平、利福布丁敏感性也在７０％以上。值得指出的是，本研究结果显示利奈唑胺对鸟胞内分枝杆菌药物抑菌效果较高，与胡飞枢等［１４］研究相符，与刘东鑫等［１６］结果有差异。可能与不同地区用药习惯有关或不同地区菌株耐药模式不同有关。在龟分枝杆菌或脓肿分枝杆菌药敏实验中，阿米卡星敏感性最高，其次是克拉霉素，与《非结核分枝杆菌病诊断与专家共识》指南推荐药物试验基本相符［１７］。此外，本研究发现上述细菌对多西环素、米诺环素耐药性较高，与文献报道相似［１８］。说明多西环素、米诺环素可能不适用于分枝杆菌。
塞西莉亚
本研究有其局限性。首先，ＮＴＭ专用液体药敏试验在本科室开展时间不长，ＮＴＭ药敏数据仍需
进一步收集；其次，有些ＮＴＭ只做了菌种鉴定，尚未开始ＮＴＭ药敏试验，未纳入统计。原因可能是临床上怀疑该菌种并非致病菌，因此并未进一步开始药敏检测。
总而言之，不同菌种其耐药模式有差异，本研究根据ＣＬＳＩ推荐的药物及其临界点进行药敏试验评估，了解不同ＮＴＭ菌种的药物敏感结果，在一定程度上有利于临床ＮＴＭ病时作为用药参考。
参考文献
［１］中华医学会结核病学分会，非结核分枝杆菌病实验室诊断专家共识编写组．非结核分枝杆菌病实验室诊断专家共识［Ｊ］．中
辣椒红素的提取华结核和呼吸杂志，２０１６，３９（６）：４３８ ４４３．罗明路线
［２］ＣＨＩＮＫＬ，ＳＡＲＭＩＥＮＴＯＭＥ，ＡＬＶＡＲＥＺ ＣＡＢＲＥＲＡＮ，ｅｔａｌ．Ｐｕｌｍｏｎａｒｙｎｏｎ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｕｓｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ：ｃｕｒｒｅｎｔｓｔａｔｅａｎｄｆｕｔｕｒｅｍａｎａｇｅｍｅｎｔ［Ｊ］．ＥｕｒＪＣｌｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌＩｎｆｅｃｔＤｉｓ，２０２０，３９（５）：７９９ ８２６．
［３］王黎霞，成诗明，陈明亭，等．２０１０年全国第五次结核病流行病学抽样调查报告［Ｊ］．
中国防痨杂志，２０１２，３４（８）：４８５ ５０８．［４］潘建华，石国民，彭雪峰，等．长沙地区２０１２ ２０１７年非结核分枝杆菌流行状况分析［Ｊ］．国际检验医学杂志，２０１８，３９（２０）：２４９６ ２４９８．
［５］陈超，徐鹏，李静，等．城市生活饮用水中非结核分枝杆菌调查［Ｊ］．微生物与感染，２００８，３（４）：２１５ ２１８．
［６］中华医学会热带病与寄生虫学分会艾滋病学组．人类免疫缺陷病毒／艾滋病患者合并非结核分枝杆菌感染诊治专家共识［Ｊ］．中华传染病杂志，２０１９，３７（３）：１２９ １３８．
［７］段鸿飞．非结核分枝杆菌与疾病的相关性［Ｊ］．中国医刊，２０１６，５１（３）：３ ５．
［８］聂文娟．非结核分枝杆菌的菌种鉴定、药敏试验和耐药机制的研究［Ｄ］．北京市结核病胸部肿瘤研究所，２０１４．
（下转第１９８１页）
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